<<
>>

§ 2. Физико-химические свойства

Аскорбиновая кислота.

Представляет собой 7 - л актон-2,3 - деглд- ро-а-гулоновую кислоту. Наличие двойной связи в молекуле обусловливает цис-, транс*изомерию:

сиуш СН2ОН

^«онзомер тралс-и зо мер

Это белый кристаллический порошок кислого вкуса, легко растворимый в воде, спирте, нерастворимый в органических растворителях, таких, как эфир, хлороформ, бензол. Легко окисляется, поэтому принимает участие в окислительно-восстановительных процессах;

Аскорбиновая кислота — нестойкое вещество — в водных растворах она легко разрушается; воздух, свет ускоряют ее окисление.

Каротиноиды. Это группа природных пигментов желтого или оранжевого .цвета; по своей химической природе относится к тетра- терненам (С40Н&).

В растениях витамины А группы А отсутствуїбт, однако в них содержится каротин — провитамин А, который под влиянием ферментов превращается в организме в витамин А. Каротин в растениях может быть в форме трех изомеров; и-, р- и 7-каротин а. Из них наиболее распространен р-кароищ:

Каротин легко образует пероксиды, поэтому может окислять различные вещества. Каротины нерастворимы в воде, растворимы и жирных маслах, хлороформе, эфире, ацетоне, бензине и трудно растворимы в спирте. Неустойчивы на воздухе и свету.

Для обнаружения и идентификации витаминов в лекарственном сырье в основном используют хроматографические методы.

Учитывая разнообразное строение витаминов, методы количественного определения их различны. Для определения аскорбиновой кислоты используют титрометрические методы, каротинов — колориметрический метод, витамина ' Р (рутина) — хромато-спек- трофотометрический метод (рассматривается в разделе «Флаво- ноидьг»).

Методика хроматографического определения аскорбиновой кислоты в плодах шиповника (Fructus Rosae). В ступке измельчают 0,5 г плодов шиповника, заливают 5 мл воды, перемешивают, оставляют на 15 мин и фильтруют. Полученное извлечение наносят капилляром на пластинку (один капилляр), рядом как свидетель наносят чистую аскорбиновую кислоту; пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой растворителей эти л ацетат — ледяная уксусная кислота (80 : 20). Хроматографирование ведут

20 мин (пробег растворителя ^13 см), после чего хроматограмму высушивают на воздухе.

Хроматограмму обрабатывают 0,04 % (или 0,001 н.) раствором 2, б-дихл орфе иол индофенол ятом натрия в воде. Аскорбиновая кислота обнаруживается в виде белого пятна на розовом фоне.

Методика хроматографического определения каротиноидов в плодах рябины обыкновенной (Fructus Sorbi). 1 г измельченных плодов рябины заливают 5 мл хлороформа в колбе вместимостью 25 мл, экстрагируют 1,5 ч, после чего фильтруют и полученное извлечение наносят капилляром на пластинку, рядом наносят свидетель — (1-каротин. Пластинку помещают в камеру с системой растворителей циклогексан — эфир (80 : 20). Хроматографирование ведут /-J 20 мин (пробег растворителя ^ 13 см). После этого хроматограмму высушивают на воздухе.

Затем хроматограмму обрабатывают 10%-ным раствором фосфорномолибденовой кислоты в этиловом спирте. После прогревания пластинки при температуре 60—80 °С каротиноиды проявляются в виде пятен синего цвета на желто-зеленом фоне.

Приготовление реактива. Юг фосфорномолибденовой кислоты добавляют к 100 мл этилового спирта, полученную суспензию нагревают и пера- створившуюся часте отфильтровывают.

Реактивы и оборудование: вода дистиллированная! аскорбиновая кислота; этилавдтат; ледяная уксусная кислота; натрий 2,6-ди хлор фен олин до- фенолят; хлороформ; р-каротин; циклогексан; эфир; фосфорномолибденовая кислота; этиловый спирт 95%-ный (этанол).

Хроматографическая пластинка «Силуфол»; вата гигроскопическая; бумага фильтровальная; весы ручные; ступка фарфоровая с пестиком; капилляры стеклянные; камера хроматографическая для ТСХ; пульверизатор; колбы вместимостью 25 мл; колбы конические вместимостью 150—200 мл; цилиндры мерные па 100 мл; воронки стеклянные для фильтрования диаметром 5-^10 см, .

Методика количественного определения аскорбиновой кислоты itlMxhix шиповника (Fructus Rosae) (по ГФ X, ст. 293). Метод коли- :ті if иного определения аскорбиновой кислоты основан на способ- остн восстанавливать 2,6-дихлорфеполиндофенол:

2,6-дихлорфенолиндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой — красную, а при восстановлении обесцвечивается:

бесцветная

20 г целых или 10 г очищенных плодов шиповника в ступке растирают со стеклянным порошком (около 5 г) при постепенном добавлении 300 мл дистиллированной воды. Настаивают 10 мин, затем размешивают, центрифугируют или фильтруют. В коническую колбу вместимостью 50—100 мл вносят 1 мл 2%-ного раствора ІІСІ, затем 1 мл полученного извлечения и 13 мл вода и титруют из микробюретки 0,001 н, раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 1/2—1 мин. Титрование должно проводиться не более 2 мин. В случае интенсивной окраски центрифугата или фильтрата или высокого содержания аскорбиновой кислоты (расход раствора 2,6-ди-

хлорфенолиндофенолята натрия более 2 мл), обнаруженного пробным титрованием, их разводят перед титрованием водой в два раза или более.

1 мл 0,001 н. раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия соответствует 0,000088 г аскорбиновой кислоты,

Процентное содержание аскорбиновой кислоты (х) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

_ ^0,000088^100. 100 Х mV г (100 —ш) ’

где V — объем 0,001 н. раствора 2,6-дихлорфеноли ндофенолята натрия, пошедшего на титрование, мл; F — поправка на титр 0,001 н, раствора 2,6-дихлорфенолиндофецолята натрия; Ід — объем извлечения, соответствующий всей навеске, мл; т — масса навески сырья, г; V2 — объем извлечения, взятого для титрования, мл; w— потеря в массе сырья при высушивании, %.

Приготовление 0,001 н. раствора 2,6-д и хлорфенолип- дофенолята. 0,22 г 2, G- дп х л ор феи о л и н дофен од а растворяют в 500 мл свеже- прокипячештой и охлажденной воды при энергичном взбалтывании (для растворения навеску оставляют на ночь), Раствор фильтруют в мерную колбу и доводят объем раствора водой до 1 л, Срок годности раствора не более 7 сут при условии хранения в холодном, темном месте.

Установка титра. Несколько кристаллов (3—5) аскорбиновой кислоты растворяют в 50 мл 2%-ного раствора H3S04. Полученный раствор в количестве 5 мл титруют из микробюретки рабочим раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до появления розового окрашивания, исчезающего в течение 1—2 мин. Другие 5 мл этого же раствора аскорбиновой кислоты титруют точно 0,001 н. раствором йодата калия в присутствии нескольких кристаллов (около 2 мг) иодида калия и 2—3 капель раствора крахмала до появления голубого окрашивания.

Поправочный коэффициент К вычисляют по формуле К = V'/V'i, где V —а объем точно 0,001 п, раствора йодата калия, пошедшего на титрование, мл; —.

объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титрование, мл.

Содержание аскорбиновой кислоты должно быть для цельного сырья не менее 1 % (ГФ X),

Реактивы и оборудование: вода дистиллированная; аскорбиновая кислота; натрий 2,6-дихлорфенолиндофеиолят; НС1 2%-пая; H2S04 2%-ная; калий иодид; калий йодат; крахмал (р-р)-

Бумага фильтровальная; вата гигроскопическая; стеклянный порошок; весы ручные; ступка фарфоровая с пестиком; колбы конические вместимостью 50, 100, 500 мл; цилиндры мерные на 15, 50, 100 мл; колбы мерные вместимостью 1 л; стаканы химические вместимостью 300 мл; воронки стеклянные для фильтрования диаметром 5—10 см; бюретки вместимостью 25 мл; пипетки измерительные вместимостью 25 мл.

Методика количественного определения каротина в плодах рябины обыкновенной (Fructus Sorb і). Метод основан на экстракции каротина'органическими растворителями (ацетон, бензин), очистки от сопутствующих веществ методом хроматографической адсорбции. Количество каротина в очищенном растворе определяют колориметрически по интенсивности желтой окраски раствора сравнением его с раствором азобензола или раствором дихромата калия, который стандартизован по чистому каротину.

5—20 г измельченного сырья тщательно растирают в ступке с кварцевым песком или стеклянным порошком. Так как каротин

Ю

слой среде неустойчив, то для нейтрализации кислот при расти- ин добавляют немного карбоната натрия. После растирания у їжу постепенно прибавляют 10 мл ацетона и снова растирают риал. Затем содержимое ступки фильтруют под вакуумом, ЬШ.тют ступку ацетоном и промывают материал па фильтре не- ,щиш| порциями ацетона до исчезновения окраски стекающего лвтрата. Ацетоновый экстракт переносят в делительную воронку, тобы перевести пигмент в бензин, к экстракту в делительной ВОДІЮ! добавляют Ю—20 мл бензина и смесь тщательно перемеши- ІИОТ, Ацетон из смеси удаляют промыванием водой, добавляя ее делительную воронку небольшими порциями и слегка встряхивая днесь. Промывные воды сливают, они не должны содержать раствори мых в бензине пигментов.

Полностью освобожденный от ацетона бензиновый раствор су- 1ШІТ фильтрованием через безводный сульфат натрия. После этого Хроматографической адсорбцией в бензиновом растворе отделяют Каротин от хлорофилла, ксантофилла, ликопина и других пигментов.

На дно хроматографической колонки (диаметр 1—1,5 см, длина 15—20 см) плотно вставляют ватный тампон толщиной 1 см, который Препятствует прохождению адсорбентов в приемник. Затем в колонку вносят небольшими порциями оксид алюминия, слегка уплотняя каждую порцию стеклянной палочкой. Длина столбика адсорбента в колонке должна составлять 5—7 см. Бензиновый раствор пигментов при слабом отсасывании пропускают через хроматографическую колонку (необходимо следить, чтобы на поверхности адсорбента постоянно был слой бензина, так как каротин окисляется мод действием воздуха). Затем через колонку пропускают чистый бензин, пока весь каротин, отделяясь от других пигментов в виде желтой полоски, не пройдет в приемник. Каротин адсорбируется оксидом алюминия слабее других пигментов. Конец хроматографирования определяют по исчезновению желтой окраски вытекающего из колонки элюата. Бензиновый раствор каротина переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят бензином до метки. Так кик химически чистый каротин нестойкое вещество, то при колори- метрировании в качестве стандартного раствора используют раствор азобензола или раствор дихромата калия.

При колориметрировании в одну кювету наливают стандартный раствор, а в другую раствор каротина. Если раствор каротина получается слишком концентрированным, то рекомендуется перед і ш л о р иметр и р ов а нием разбавить его бензином.

Процентное содержание суммы каротиноидов вычисляют по формуле

= КЮОЕфЮО Х~ mh3 (100—ш) ’

где К — количество каротина в 1 мл стандартного раствора равно 0,00208 мг, если стандартньїй раствор—дихромат калия, и 0,00235 мг, если стандартный раствор—азобензол; V — объем бензинового раст-

вора каротипа, мл; hy—оптическая плотность стандартного раствора; h,t — оптическая плотность исследуемого раствора каротина; т —- масса навески абсолютно сухого сырья, г; w — потеря в массе сырья при высушивании, %,

Приготовление стандартных растворов. Приготовление стандартного раствора азобензола: 0,145 г предварительно пе ре к р и сталл и з о- ванного нз этилового спирта и высушенного азобензола растворяют в 100 мл 95%-ного этилового спирта. Для работы основной раствор азобензола разбавляют в 10 раз: берут 10 мл основного раствора и доводят до метки 95%-ным этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Хранят раствор в темном месте, Приготовление стандартного раствора дихромата калия: 0,360 г перекри- сталлизованного дихромата калия растворяют в 1 л дистиллированной воды.

Реактивы и оборудование: азобензол; калил дихромат; ацетон; бензин; алюминил оксид (просеянный через сито с размером отверстий 0 25 мм)’ NaaC03; Ka2S04 (безвод,), ’ ’

Вата гигроскопическая; кварцевый песок или стеклянный порошок; ступка

рфоровая с пестиком; колба вместимостью 25 мл; воронки стеклянные для ильтроваяия диаметром 3—5 см; колонка хроматографическая- воронки делительные вместимостью 200 мл; колбы Бунзена; колбы мерные вместимостью 50, 100 и 1000 мл; цилиндры мерные на 50 мл; фотоэлектр о калориметр ФЕК.-М,

<< | >>
Источник: Коллектив авторов. Химический анализ лекарственных растений: Учеб, пособие для фармацевтических вузов /Ладыгина Е. Я., Сафро- нич Л. Н., Отряшенкова В, Э. и др. Под ред. Гринкевич Н. И., Сафронич Л. Н.■— М.: Высш. школа, 1983,— 176 с., ил.. 1983

Еще по теме § 2. Физико-химические свойства:

  1. ПРОГНОЗИРОВАНИЕ БИО-ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВЕЩЕСТВ
  2. КЛАССИФИКАЦИЯ ВИТАМИНОВ. ОСНОВНЫЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
  3. ИЗМЕНЕНИЯ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ И НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ ПРИ АНАФИЛАКСИИ
  4. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
  5. Физико-химическая несовместимость
  6. Химические свойства и химические модификации алкалоидов
  7. Осложнения методов искусственной физико-химической детоксикации
  8. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРИНЦИПОВ И ПОДХОДОВ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИИ В РАЗРАБОТКЕ НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
  9. Альберт А.. Избирательная токсичность. Физико-химические основы терапии. Пер. с англ. В 2 томах. Т. 1. — М.: Медицина1989, 400 с.; ил., 1989
  10. Альберт А.. Избирательная токсичность. Физико-химические основы терапии. Пер. с англ. В 2 томах. Т. 2. — М.: Медицина,1989,32 с.: ил., 1989
  11. Химические свойства моносахаридов