§ 9. Качественное определение

Получение извлечения: 1 г измельченного сырья помещают в колбу с притертой пробкой, заливают 4-кратным количеством хлороформа (этиловый, метиловый спирт) и оставляют на сутки, периодически взбалтывая.

Получение сырого филицина. 10 г измельченных корневищ сырья заливают восьмикратным количеством этилового спирта, взбалтывают в течение 30 мин и оставляют на 3 ч для экстракции. Извлечение фильтруют и упаривают в вакууме при температуре 55 60 С до густой консистенции. Остаток обрабатывают несколько раз насыщенным раствором гидроксида бария и фильтруют. Фильтрат подкисляют концентрированной НС! до pH 2,0. Выпавший осадок сырого филицина отфильтровывают, промывают дистиллированной водой и высушивают в эксикаторе.

Методики качественных реакций. 1. К 1 мл извлечения добавляют

3— 5 капель смеси равных объемов 1 %-ного раствора FeCl3 и K4Fe(CN)e. Образуется темпо-зеленое окрашивание.

2. К 1 мл извлечения добавляют 2—3 капли реактива Паули по Кутачеку: вишнево-красная окраска переходит в оранжевую.

3. К J мл извлечения прибавляют раствор ванилина в концентрированной НС1: появляется красное окрашивание.

4. К 1 мл извлечения добавляют раствор FeCl3, K4Fe(CN)„ (1:1) и 10 капель концентрированной HN03.

Образуется темно-бурое окрашивание.

5. Хроматографическое определение.

На пластинку «Силуфол», пропитанную лимонно-фосфатным буфером (pH 6,0), с последующим активированием пластинки при температуре 70—80 “С (3 ч) наносят 1 /Ь-ный сырой филицин из мужского папоротника (5—6%-ный раствор из игольчатого папоротника) в хлороформе капилляром в одно касание на стартовую линию хроматографической пластинки, высота жидкости в капилляре 1,5—2 см, диаметр полученного пятна 2—3 мм. Высушенную пластинку помещают в хроматографическую камеру со свежеприготовленной, насыщенной системой н-гексан — хлороформ (1 : 1) с 5 % этилового спирта.

Проявляют флороглюци новые производные реактивом Паули по Кутачеку, отмечая вдет пятен (рис. 11).

В мужском папоротнике обнаруживаются пе менее 6 пятен, из них идентифицированы флаваспидовая кислота, ас- пидинол, альбаспидин; в игольчатом папоротнике не менее 8 пятен, для 4 из них установлено строение (флаваспидовая кислота, аспидинол, дезас- пидин и аспидин),

Хроматографическое разделение можно проводить в тонком слое силикагеля марки КСК, смешивая 4 г силикагеля с 10 мл лимоннофосфатного буфера с pFI 6,0 и последующим активированием пластинки в течение 1 ч при t = 105—110 “С в той же системе.