<<
>>

§ 5. Количественное определение

Весь процесс количественного определения аАгалоидов в растительном сырье можно разделить на три основных этапа (стадии): 1) извлечение алкалоидов из растительного сырья; 2) очистка полученных извлечений и, если требуется по методике, разделение, смеси алкалоидов на индивидуальные соединения; 3) определение содержания алкалоидов.

Извлечение алкалоидов. При количественном определении алкалоиды из растительного сырья, так же как и при их ^выделении (получении), извлекают или в виде оснований, или солей.

1. Извлечение алкалоидов в виде основания. При извлечении (.алкалоидов в виде оснований соли алкалоидов, в виде которых

они содержатся в растениях, переводят в основания. Это достигается обработкой сырья различными щелочами. При количественном определении алкалоидов в растительном сырье чаще всего используют растворы аммиака и едкого натра, а также карбонат натрия и гидроксид кальция. Выбор щелочи зависит от свойств и ; строения алкалоидов. Извлечение свободных оснований алкалоидов * Проводится органическими растворителями, не смешивающимися !: с водой, обычно хлороформом, этиловым эфиром или дихлорэтаном.

2. Извлечение алкалоидов в виде солей. Соли алкалоидов в боль- [шинстве своем хорошо растворяются в воде и спиртах (этиловый,

Метиловый). Обычно алкалоиды экстрагируют 1—2%-ной серной, долиной, винной, уксусной кислотой или подкисленным спиртом. Ї, Очистка извлечения. Для очистки извлечений чаще 'всего проводится повторное переведение солей алкалоидов в водный Ьаствор и свободных оснований в органический растворитель (см. jC- 133). Кроме того, для очистки извлечений, а также для разделения Алкалоидов широко используется хроматографический метод (колоночная хроматография, хроматография в тонком слое сорбента А на бумаге).

ї: Определение содержания алкалоидов. Ко

личественное содержание алкалоидов можно определять: гравимет- Зическим, титрометрическим, колориметрическим, полярометриче- ;ким, поля рографичес ким, с пектрофотометр ическим, денситометриче- ским или другими методами.

j Методика количественного определения алкалоидов в листьях Красавки (Folium Belladonnae), траве красавки (Herba Belladonnae), корнях красавки (Radix Belladonnae), листьях белены (Folium Hyoscyami) и листьях дурмана (Folium Stramonii).

В листьях, траве и корнях красавки (Alropa bellodonna L.), Листьях белены (Hyoscyamus nlger L.) и дурмана обыкновенного jfDatura stramonium L) сем. пасленовых (Solanaceae) содержатся ^ ткало иды производные тропана. В этих видах растительного ірья преобладает гиосциамин, переходящий под влиянием щело- :ей в оптически инактивиый атропин. Кроме того, в значительно [еньшем количестве содержится скополамиц и другие близкие

r_(15-F) 0,005780-100.100 ~ m (100—w) >

где V объем 0,02 и. NaOH, пошедшего на титрование т

™яСаг”»-Кї СЫрМ' “°тает‘™ую.цая объему Іфирн^гі "зІ7

. , потеря в массе сырья при высушивании, %.

методом. , сырья измельчают ДО размера ^стиц

Аналитическую пРобУс^^й 2о г (с погрешностью неболее


стоять в течение 6 ч при периодическом встряхивании и затем кислотное извлечение фильтруют через бумажный фильтр.

100 мл фильтрата помещают в делительную воронку, подщелачивают концентрированным раствором аммиака (по фенолфталеину) и алкалоиды исчерпывающе извлекают этиловым эфиром порциями 70, 30, 30 мл и т. д. (пробы на полноту извлечения с I %-ным раствором кремневольфрамовой кислоты).

Эфирные извлечения объединяют, сушат безводным Na3S04, отфильтровывают и отгоняют досуха на водяной бане. Сухой остаток растворяют в 5 мл хлороформа. 0,05 мл полученного раствора наносят на линию старта стеклянной пластинки размером 6 X 18 см с закрепленным слоем силикагеля марки КСК. Пластинку с нанесенной пробой высушивают на воздухе в течение 5—10 мин, а затем помещают в хроматографическую камеру с метиловым спиртом и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат сначала па воздухе в течение 5 мин, затем в сушильном шкафу 30 мин при температуре 50 °С, охлаждают на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа. При этом на пластинке должно появиться пятно платифиллина (R, около 0,36) и выше — пятно сенецифиллина (fy около 0,50). Проявленное пятно платифиллина обводят препаровальной иглой. Отмеченный участок счищают в делительную воронку вместимостью 50 мл, в которую затем прибавляют 15 мл 1%-ной НО и встряхивают в течение 3 мин. При этом образовавшийся на адсорбенте комплекс алкалоида с реактивом Драгендорфа разрушается. Затем в воронку прибавляют 0,2 мл 1%-ного раствора тропеолина 000 — И и 10 мл хлороформа, вновь встряхивают в течение 3 мин и окрашенный хлороформный слой, содержащий соединение алкалоида с тропеолином, фильтруют через бумажный фильтр, предварительно смоченный хлороформом, в мерную колбу вместимостью 50 мл. Экстракцию хлороформом повторяют еще Два раза, объем раствора в колбе доводят до метки хлороформом, перемешивают и интенсивность окраски раствора определяют при помощи фотоэлектроколориметра ФЭК-56М со светофильтром № 5 (X — 490 нм) на фоне хлороформа в кювете с толщиной слоя 10 или 50 мм в зависимости от интенсивности окраски раствора. Количество платифиллина в пятне хроматограммы в мкг находят по калибровочному графику. Процентное содержание платифиллина в виде основания в абсолютно сухом сырье х вычисляют по формуле

47100-5.100

Х~ Угт • I 000 000 (100—к>) ’

где а — содержание алкалоидов в пятне хроматограммы, найденное по калибровочному графику, мг; V — объем хлороформного раствора, полученного при растворении сухого остатка, мл; V1 — объем хлороформного раствора, нанесенного на хроматограмму, мл; т — масса навески сырья, г; и> — потеря массы сырья при высушивании, %.

Содержание платифиллина-основания должно быть не мецее .0,3 %.

При необходимости после хроматографического разделения ДТГьэуясь ачкачоилов аналогичным способом можно определить сенецифиллин, пользуясь

™ WoTillTZr ГЛ?,"«Тр = . о . К о , о г р » ф . К «. 0,2390 г |кислота, Na2S04 (б води.)’; CaSOj; тропеодпн ООО-II; реактив Драгендорфа; платифиллин гидротарт- рат- вода дистиллированная; сил н к а гм ь марки КС К; бумага фильтровальная Еата гигроскопическая; колбы вместимостью 100, 200 и 1000 мл; кагбы мерные вместимостью 50 МЛ- воронки делительные вместимостью 250—300 мл; воронки стеклянные для фильтрования диаметром 5 и 10 см; цилиндры мерные на 10, 100 "и 500 мл* пластинки стеклянные для ТСХ размером 6 X 18 см, камеры хроматографические для ТСХ; микропипетки измерительные вместимостью 0 2 мл, бгоксы с притертой Крышкой; эксикатор; бани водяные лабораторные, весы ручные* весы лабораторные аналитические; сито с диаметром отверстий 2 мм; ступка фарфоровая с пестиком; электрокофемолка бытовая; фотоэлектрокаюр им етр ФЭК-56 М; шкаф сушильный лабораторный; штативы лабораторные.

Методика количественного определения алкалоидов в рожках спорыньи эрготаминового штамма (Cornua Secalis cornuti stamm Ereotamini) {ФС 42-1432-80). Рожки спорыньи, паразитирующей на ржи, содержат индольиые алкалоиды — производные лизерги- новой и изомерной ей изолизертиповой кислот. Основными являются зргометрин, эрготамин, эргокристин, эргокриптин, эргокорнин и др,.


сн3
1| N—СН3

/W

Н—N-
эргометрнн
эрготамин



Количественное определение алкалоидов проводится колориметрическим методом. 3 г (с погрешностью не более 0,01 г) свежеизмель- ченного порошка спорыньи, просеянного сквозь сито с размером отверстии 0,315 мм, обезжиривают в аппарате Сокслега в течение О ч петролеиным эфиром (температура кипения 40—60 °С). Обезжиренный порошок высушивают при температуре не выше 30 °С и пето0^ количественно в колбу С притертой Пробкой вместимостью ши. мл, Приливают 30 мл этилового эфира и оставляют на 10 мин .Затем прибавляют 0,13 г свежепрокаленного оксида магния, тщательно растертого с 6 мл воды; смесь непрерывно встряхивают в течение 2 ч, затем прибавляют 6 г безводного Na2S04, сильно встряхивают в течение 5 мин, дают отстояться и быстро процеживают через вату, 15 мл фильтрата (1,5 г спорыньи) помещают в делительную воронку и извлекают 4 раза по 20 мл 2%-ным раствором винной кислоты; колбу с объединенными виннокислыми извлечениями помещают на водяную баню и нагревают до 40—50 °С для Удаления остатков эфира.

Охлажденный раствор процеживают через вату в мерную колбу вместимостью 200 мл, колбу и воронку с ватой тщательно промывают г /о-кым раствором винной кислоты и доводят объем раствора > до метки той же кислотой (раствор А). К 2 мл раствора А прибавляют 4 мл реактива вап-Урка, перемешивают и оставляют раствор на свету на 30 мин, после чего колориметрируют на ФЭК.-М с зеленым светофильтром (длина волны 530-540 нм) в кювете с толщиной слоя 1U мм.

Процентное содержание эргоалкалоидов в сырье х вычисляют по формуле

q200 ■ юо ■ юо 1,5 (100—w) ’

где а ~ количество эргоалкалоидов в 1 мл раствора А, г, найденное по калибровочному графику; w — потеря в массе сырья при высушивании, %. .

Построение калибровочного графика. Для построения калибровочного графика готовят серию разведений . эрготамина тартрата-стандарта (ФС 42-1070-76) в 2%-иой винной і кислоте разбавлением исходного раствора эрготамина тартрата- стандарта. Для этого сначала готовят исходный раствор: точную . навеску 0,0] 13 г эрготамина тартрата-стандарта (0,0100 г основания) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 2%-ной винной : кислоте и доводят этой же кислотой до метки. Полученный раствор ■; содержит 0,0001 г эр готами на-основания в 1 мл (исходный раствор).

■ о пробирках вместимостью 10 мл готовят следующий ряд разбавлений раствора (см. табл, на стр. 156).

. К полученным растворам прибавляют 4 мл раствора ван-Урка ' тщательно перемешивают и оставляют раствор на свету на 30 мин’ после чего колориметрируют в тех же условиях, что и в основном опыте. Строят Калибровочный график, откладывая на оси абсцисс количество граммов эрготамина-основания, а на оси ординат —

Количество исходного ра- створа* мл


соответствующее значение оптической плотности колориметрируе- мых растворов.

Для определения содержания эрготамина на стартовую лини'^ хроматографической бумаги марки «С» (55 х 1G см) узкой полоской наносят из микропинетки 0,4 мл эфирного извлечения (0,04 г спорыньи). Бумагу импрегнируют 50%-ным спиртовым раствором формамида, pH которого 7,05—7,20, оставляя стартовую линию в 2 см сухой; тщательно отжимают избыток формамида между листами фильтровальной бумаги, стартовую линию опрыскивают из пульверизатора тем же раствором формамида. В течение Ш мин полоску бумаги высушивают на воздухе в темном^ месте.

Хроматографирование проводится в затемненной камере нисходящим методом, в системе бензол — петролейний эфир (Фип — .= 70—100 °С) (6:1) до продвижения фронта 40—45 см, после чего бумагу высушивают и просматривают в ультрафиолетовом свете отмечают светящуюся полоску эрготамина. Эту полоску вырезают по всей ширине бумаги—с одного коша вырезают зубчики, Другим концом помещают в кювету с Р/с-нои винной кислотой которая находится в камере, насыщенной водой, и алкалоиды элюируют 1 %-ной винной кислотой, элюат собирают в пробивку с делениями. За 18 ч собирают 3—6 мл элюата, доводят водой до 8 мл, тщательно перемешивают. К 2 мл полученного раствора прибавляют 4 мл реактива ван-Хрка и через 30 мин колори- метрируют в тех же условиях, что и при определении суммы алка-

ЛОЙДОВ,

По калибровочному графику находят содержание эрготамина в 1 мл испытуемого раствора. Процентное содержание х вычисляют

поформу-’е ' ■ «.100.100

4 = 0,04(100 —аі) ’

рде д__ количество эрготамина в 1 мл испытуемого раствора, г,

найденное по калибровочному графику; w - потеря в массе сырья при высушивании, %. Содержание эрготамина в пересчете иа абсо- лютш сухое сырье должно быть не менее 0,2 /о.

Построение калибровочного г р а ф и к а. Для построения калибровочного графика точную навеску 0,0113 г эрготамина тартрата-стандарта (0 0100 г эрготамика-основания) раствор я ют в 10 мл мутил отої о стар г ■ стартовую линию хроматографической бумаги марки «U (55 X 16 см) узкой

rSl-TlV И3 ГКр0ті?ЄТК'А оа ПеРБЫЙ лист °.°5 м. на второй -0,1 „о™ЄТИЙ °’15, 11 четвеР™й —0,2 ил этого раствора (50, 100 150 200 мкгі' далее поступают, как описано пыше, ’ * *

При количественном определении алкалоидов в рожках спорывьи на чабп

калХово™^ТИЯпяГа3аіШУЮ наВЄСку СЫрья (3 г) предварительно обезжиривают- кал йор ов очный график студенту дается готовый.

>< 7П е,ппК“ДИ в ы 11 ? б? Р У д 0 в я Н и е: петролейний эфир (**„„ = 40—60 ™ О’ этиловый эфир; бензол; этиловый спирт (этанол)- МеСг Na.,SO ДН' ’ ВШшая, КИСЛОта: эр готами н тартрат; формамид (50%-ный’ раствор ад”! СМРТЄ): РеаК™В ВаН'УрКа (H*S0< FeCI,. га - диметш амииоСод-

„„„Лї"Гага хРоматоГРаФкческая; бумага фильтровальная; колбы с притертой ™5К0И вмест™остью 100 мл; колбы конические вместимостью 100 мл-воронки Ш) шатиГиФИЛЬТР°М1!ЯЯ Диаметром 5 см; воронки делительные вместимостью 00 * ? химические вместимостью 200 мл; колбы мерные вместимостью

на 10 m.rfi , измерительные вместимостью 2 и 5 мл; цилиндры мерные на 10 и 100 мл, бюкси с притертой крышкой; пробирки вместимостью 10 мл* ка- мера хроматографическая для БХ; эксикатор; пульверизатор; штативы ш делительных воронок; бани водяные лабораторные; аппарат Сокслета- шкаф cv- шильщн лабораторный; УФ лампа; весы ручные; весьілабораторньіе анГ.Іші- не, сито с размером отверстий 0,315 мм; фотоэлектр о колориметр ФЭК-М-

Методика количественного определения секуринина в побегах секуринеги (Cormus Securinegae) (ФС 42-109). Побеги секуринеги полукустарниковой Securinega sufjruticom (Pali.) Rehd. сем молочайных — Euphorblaceae содержат алкалоиды — производные конденсированной би циклической системы пиперидина и пир рол идина:

некуринин


Количественное определение секуринина в сырье проводится полярометрическим методом. 100 г воздушно-сухого сырья, измельченного до величины частиц 2 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 2000 мл и заливают 1000 мл дистиллированной воды. Содержимое колбы взбалтывают 5 мин и оставляют до следующего отфйльтровьшаю° П0ВТ0РН° сбалтывают 5 мин и водную вытяжку

600 мл водного фильтрата помещают в делительную воронку вместимостью 1000 мл, подщелачивают концентрированным раствором аммиака (проба с фенолфталеиновой бумагой) и алкалоиды

исчерпывающе извлекают хлороформом 3-4 раза порциями 100 50

мовойМЛіот°нГГ° ИЗВЛЄЧЄНИЯ {пр°ба С Раств°Р°м кремневольфра-

хлороформного извлечения алкалоиды извлекают 10/о-нои HaS04 2—3 раза по 50 мл в делительной воронке

вместимостью 500 мл. Объединенный сернокислый раствор вновь подщелачивают концентрированным раствором аммиака (проба с фенолфталеиновой бумагой) и алкалоиды исчерпывающе извлекают этиловым эфиром 4—5 раз по 30—50 мл (проба с раствором кремневольфрамовой кислоты). Объединенные эфирные извлечения сушат безводным NaaS04 (10—15 г) и фильтруют через бумажный фильтр в сухую колбу. Промывают сульфат натрия небольшими порциями этилового эфира.до отсутствия алкалоидов и фильтруют через тот же фильтр. Эфир отгоняют на водяной бане досуха. Остаток эфира удаляют струей воздуха,

Сухой остаток в колбе растворяют в 5 мл 95%-ного этилового спирта и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, объем раствора доводят до метки этиловым спиртом, тщательно перемешивают и определяют угол вращения в трубке длиной 0,5—2,0 дм (поляриметр марки СМ).

1. Для приготовления 10%-ной HaS04 берут 1 часть кони. НУЗО, и 9,5 частей HjpO.

2. При отгонке эфира следует нзбеггть перегрева кристаллизующихся алкалоидов. Выделенные алкалоиды необходимо сразу же растворить в 95%-ном этиловом спирте, не оставляя на следующей день.

Процентное содержание секуринина х вычисляют по формуле

аУУ-jlOO ■ 100 Ж=У3/пП080(100—w) ’

где а — измеренный угол вращения, градусы; V — объем растворителя, взятого для извлечения алкалоидов, мл; I7! —объем извлечения, взятого для анализа, мл; V2 — объем этилового спирта, взятого для растворения алкалоидов, мл; т — масса навески сырья, г; і — толщина слоя жидкости (длина трубки), дм; да — потеря в массе сырья при высушивании, %; 1080 — удельное вращение чистого секуриннна.

Содержание секуриннна должно быть не менее 0,1 % на абсолютно сухое сырье.

Реактивы и оборудование: аммиак (кони, р-р); HaS04 1%-ная; кремневольфрамовая кислот а; этиловый эфир; этиловый спирт (этанол); вода дистиллированная; хлороформ; NajS04 (йезводн.); фенолфталеиновая бумага.

Бумага фильтровальная; колбы конические вместимостью 250 и 2000 мл; цилиндры мерные на 10, 100 и 1000 мл; колбы мерные вместимостью 25 мл; воронки стеклянные для фильтрования діаметром 5 и 10 см; воронки делительные вместимостью 500 и 1000 мл; установка для отгонки этилового эфира; поляриметр; штативы для делительных воронок; весы лабораторные аналитические; весы ручные; бюксы с притертой крышкой; эксикатор; сушильный шкаф лабораторный.

Методики количественного определения берберина в корнях барбариса обыкновенного (Radix Berber idis vulgaris).

Корни барбариса обыкновенного (Berberis vulgaris L.) сем. барбарисовых — Berberidaceae содержат алкалоиды производные изохинолина: берберин, ятроррицин, пальматин и др. Считают, что берберин может быть как в форме четвертичного аммонийного

colspan=10>
основания (I), так и в альдегидной (II) или карбинольной форме (III):
, N—Н
N


в делительную воронку вместимостью 100 мл и проводят извлечение алкалоидов 2 %-ной H,S04 порциями 20, 10 и 10 мл (до отрицательной реакции, с кр емн ев о л ъфр амов о й кислотой). Объединенные кислотные извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора до метки 2%-нои HpU4. После тщательного перемешивания раствор спектрофотомигрируют при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 1 см*

Процентное содержание берберина бисульфата х в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

50 ■ 50 ■ 100D 15* 128m(100—w)

где go __ объем эфирного .извлечения, мл; 50 — объем сернокислого извлечения, мл; 15 — объем эфирного извлечения, взятого для анализа, мл;' 128 — удельный показатель поглощения Е\^ берберина бисульфата при длине волны 420 нм; D — оптическая плотность сернокислого извлечения; т — масса навески сырья, г; w — потеря в массе сырья при высушивании, %■

Реактивы и оборудование: NaOH; этиловый эфир; HjS04

2%-ная; кремневольфрамовая кислота.

Колбы конические с притертой пробкой вместимостью 100 мл; колбы мерные вместимостью 50 мл; воронки делительные вместимостью 100 мл; пипетки измерительные 1 и 15 мл; цилиндры мерные „а 10 и 50 мл; бюксы с притертой крышкой* эксикатор: штативы дли делительных воронок; шкаф сушильный лабораторный; весы лабораторные аналитические, технические, ручные; сита с диаметром отверстий 1, 3 и 7 мм; спектрофотометр СФ-4А.


Количественное определение берберина

спектрофотометрическим методом с применением хроматографии в тонком слое сорбента. Метод основан па разделении алкалоидов в тонком слое сорбента и определении содержания берберина спектрофотометрическим методом. „ * ,

Точная навеска (0,5—1 г) измельченных корней барбариса, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм, помещают в колбу вместимостью 50 мл, приливают 10 мл 95%-ного этилового спирта и нагревают с обратным холодильником на водяной бане, поддерживая слабое кипение этилового спирта в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры отмеряют микро- гшпеткой 0,2 мл извлечения (надосадочной жидкости) и наносят на стартовую линию хроматографической пластинки с закреплен- пым слоем силикагеля сплошной полосой длиной 5—7 см на рас- стоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Для определения зоны берберина в правой части пластинки на стартовую линию наносят раствор берберина бисульфата (3—6 капилляров) в виде пятна (диаметр пятна 0,5—0,7 мм).

После высушивания пластинку помещают в хроматографическую камеру. Для проявления используется система: раствор аммиака концентрированный — хлороформ — этиловый спирт (1:3: 3). Система растворителей используется для хроматографирования одно
кратно. Толщина слоя растворителей в хроматографической камере около 5 мм; экспозиция при комнатной температуре 30—40 мин.

Хроматограмму после высушивания просматривают в УФ свете, отмечают на хроматограмме зону, соответствующую берберину' и соскабливают этот участок сорбента скальпелем н колбу вместимостью 25 мл. Берберин 4 раза элюируют 0,1 н. H^SO, при нагревании в течение 1 мин на водяной бане. Кислоту отмеряют с помощью бюретки: первый раз 4 мл, а затем три раза по 2 мл. Полноту элюирования определяют по отсутствию флюоресценции силикагеля в УФ свете. Элюат каждый раз сливают декантацией в другую колбу вместимостью 25 мл. Для удаления следов силикагеля объединенный элюат центрифугируют в течение 5 мин (1000 об/мин) Оптическую плотность элюата измеряют на спектрофотометре ШФ-4А на фоне контроля при длине волны 345 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Контролем служит элюат чистого силикагеля с тон же пластинки, снятый с площади, равной площади пятна берберина. Процентное содержание берберина в образце х рассчи- ™ на абсолютно сухую массу сырья в пересчете на бисульфат

P1-V00D

Vi&i&m (100—ш) ’

V 7"объем этилового спирта, взятого для извлечения, МЛ* vl ~~ объем извлечения, нанесенного на хроматограмму, мл; У, — объем элюата берберина, мл; D — оптическая плотность элюата* w потеря в массе сырья при высушивании, %; т — масса навески сырья, г; £[% (646)—удельный показатель поглощения берберина бисульфата.

Р е а к т и в ьт и оборудование: этиловый спирт (этанол); CaSO.; аммиак (конц.); H2S04 (0,1 н.); хлороформ; силикагель марки КСК- *

Колбы с нормальным шлифом вместимостью 50 мл; холодильники обратные стеклянные лабораторные с нормальным шлифом; микрошшетки измерительные вместимостью 0,2 мл; капилляры стеклянные; бюретки вместимостью 10 25 мл* колбы конические вместимостью 25 мл; бани водяные лабораторные* цилиндры

ппРНтгм 3 ° И 00 ыл; бюксы с притертой крышкой; камера хроматографическая для ТСХ, пластинки стеклянные для ТСХ размером 13 X 18 см; штативы лабораторные; центрифуга лабораторная; УФ лампа; шкаф сушильный лабораторный*

<< | >>
Источник: Коллектив авторов. Химический анализ лекарственных растений: Учеб, пособие для фармацевтических вузов /Ладыгина Е. Я., Сафро- нич Л. Н., Отряшенкова В, Э. и др. Под ред. Гринкевич Н. И., Сафронич Л. Н.■— М.: Высш. школа, 1983,— 176 с., ил.. 1983

Еще по теме § 5. Количественное определение:

  1. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ. ТАБЛИЦА 4. ТЕСТ-ОРГАНИЗМЫ И УСЛОВИЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОТДЕЛЬНЫХ АНТИБИОТИКОВ
  2. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ
  3. КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ВСАСЫВАНИЯ ЛЕКАРСТВ
  4. КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ПРОЧНОСТИ СВЯЗЫВАНИЯ
  5. 9.3. КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ЭЛИМИНАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
  6. Количественные и качественные дефекты фагоцитов
  7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
  8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТОКСИЛЬНЫХ ГРУПП
  9. ОПРЕДЕЛЕНИЯ
  10. ОПРЕДЕЛЕНИЕ pH
  11. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
  12. Г. Определение точки кипения
  13. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЯ ПРЕЛОМЛЕНИЯ
  14. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЗОТА
  15. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЙОДНОГО ЧИСЛА
  16. Глава 1 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРИОДА НОВОРОЖДЕННОЙ
  17. БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПГ