<<
>>

Глава 8. РАСТЕНИЯ И ПРЕПАРАТЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ФЛАВОНОИДЫ

Несмотря на широкое распространение флавоноидов в растительном мире, для изготовления лекарственных препаратов круг наиболее ценпых растений не слишком велик и его основу составляют солодка, бессмертник, зверобой, календула, скумпия, софора японская, каштан конский, стальник пашенный, рододендрон, ландыш дальневосточный, астрагал сердоплодный и некоторые другие.

Эти растения служат сырьевой базой производимых медицинской промышленностью лекарственных препаратов желчегонного, противоязвенного, капилляроукрепляющего, гипоазотемн- ческого действия,

В настоящее время установлены многие стороны биологического действия флавоноидных веществ, что нашло отражение в вышедших в последние 15—20 лет монографиях [18, 104, 117, 194, 286, 358], статьях [197, 207, 307, 360] и диссертациях [20, 206, 284].

Давно известна их Р-витаминная активность [18, 117, 358]. Некоторые вещества применяются при лечении глаукомы и для профилактики кровоизлияния в сетчатке глаза. Вещества этой обширной группы природных соединений обладают свойством снижать тонус гладкой мускулатуры и оказывают спазмолитическое действие, которое, как показали исследования сотрудников ВНИИХТЛС [20, 284], зависит от структуры флавоноидного ядра, числа и расположен ция в нем заместителей.

Флавоноиды оказывают влияние па энзиматическую активность, угнетая гиалуронидазу, а также гнетидиндекар- боксилазу п холинэстеразу [3581. Кроме того, они проявляют седативное действие [358], а также эстрогенную активность [3581. Отмечено пх положительное влияние при лечении лучевой болезни н опухолей [18, 117], оказывают они и ингибирующее действие на трансиортнуго АТФазу [197]. Некоторые из флавоноидов обладают антиаиафилактическим эффектом. Их с успехом применяют прп лечении язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки [206, 207]. Наряду с этим имеются сведения о положительном влиянии флавопо- пдных веществ на функцию почек [18, 255, 258], печени [18] п других органов.

Обладая разнообразным биологическим действием, фла- вэноиды практически нетоксичны. Так, кверцетин, кверцитрин, нарингпн, гесперпдпн и рутнн при скармливании их крысам ежедневно на протяжении 200—400 сут в количества 1 % к массе пищи не приводят к каким-либо патологическим изменениям. Употребление рутина по 60 мг ежедневно в течение 5 лет не сопровождалось токсическими явлениями. Признаков токсикоза не вызывают даже более высокие дозы (500 мг/сут) [104]. Это и не удивительно, так как фла- вонопдные вещества находят широкое применение в пищевой промышленности [195].

Бо Всесоюзном научно исследовательском институте химии и технологии лекарственных средств на протяжении последних 15 лет проводится комплексное изучение этого класса веществ с целью создания лекарственных препаратов дтя лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы, почек, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки, воспалительных процессов и др.

При фармакологическом изучении выделенных веществ установлено, что сила специфического действия их различна и зависит от строения.

Для определения зависимости силы действия от природы и числа заместителей, входящих в ядро

2- феннлбензо-у-ппрона, были проведены исследования по выяснению влияния свободных оксигрупп бокового фениль- иого радикала в аглпконах и природы сахарных компонентов на желчегонную и противовоспалительную активность (табл. 31), гипоазотемнчеекпй и диуретический эффекты (табл. 32).

Как видно из табл. 31, исследуемые флавоноидные аглп- коны различаются между собой только количеством фенольных оксигрупп в боковом фенильном радикале (кольцо Б). Остальная часть молекулы (кольцо А) у нцх одинакова.



При выяснении влияния степени гпдроксплированип бокового фенильного радикала (кольцо Б) на силу желчегонного действия были изучены кемпферол, кверцетин и мирицетнн, отличающиеся количеством оксигрунп в кольце Б.

Проведенные исследования позволили установить, что у животных, получавших кемпферол, который имеет в 4'- положении оксигруппу, желчеотделепие пе изменялось по сравнению с контролем. Увеличение числа вирішальних ОН-групп в кольце Б приводит к усилению желчеотделения. Так, под влиянием кверцетина с ОН-группами в 3'- и 4'- положениях желчеотделение возрастает на 39,6 % (см. табл. 31). Мирицетнн, в отличие от кверцетина, содержит три гидроксила в 3'-, 4'- и 5'-положениях. Он обладает наибольшим желчегонным эффектом в ряду исследуемых аглпкоиов и почти в 2 раза превосходит активность кверцетина (см. табл. 31),

7 В. П. Георпіеискціі, II. Ф. Комис.аренко, С. Е Дмнціук

Гппоазотемпчсская и диуретическая активность флавонопдов
Активность *
Вещество и характеристика строения гипоазотеми- ческая, ЕД10, иг/кг диуретическая, ЕДе0| мг/кг
Группа кемпферола

Кемпферол-З-рутинозид; 5, 7, 4'-триокси-3- (-О-Р-рутішозпл)-філавон

25,0
Кемпферол-7-рамнозид; 3, 5, 4'-триокси-7- (-О-а-Ь-рампопирапозші)-флавон 13,0
Группа кверцетина
Кверцетип; 3, 5, 7, 3', 4'-пентаоксифлавон 5,7 23,7
Авикулярпн; 5, 7, 3', 4'-тетраокси-3-(-0-а- Ь-арабинофуранозил)-флавон Гиперозид; 5, 7, 3', 4'-тетраоксн-3-(-0-р-Ь- галактопираиозпл)-флавон 7,1 24,0
8,5 30,5
Рутин; 5, 7, 3', 4'-тетраокси-3-(-0-р-рути- нозил)-флавон 20,0 63,0
Группа изорамнетина
Нарциссин; 5, 7, 4'-триокси-3'-метокси-3- (-О-Р-рутнпозил)-флавон Кейозид; 5, 7, 4'-триоксп-3'-метокси-3-(-0-Р- робинобиозил )-флавон 33,0 ,
8,5 w-
ІІзорамнетші-3, 7-диглюкозид; 5, 4'-диокси- 'З-метокси-З, 7-(-ди-0-р-Ь-глюкопирано- зпл)-флавон 3,7 7,6 **
Изорамнетіш-З-глюко-7-рампозид; 5, 4'-дио- кси-З'-.метоксл-З-(-О-р-В-глюкотіранозил)- 7-(-0-а-І-.-рашіопирапозші)-флавон 10,0 ,______

* Данные В. Е. Соколовой и Е. А. Васильченко [255], ** ЕД100,

При установлении влияния сахарного компонента на желчегонный эффект у гликозидов, имеющих одинаковые агликони (кверцетин) и разные углеродные остатки по третьему положению (см, табл. 31: авикулярпн, гиперозид и рутпн), показано, что все глнкозиды активнее их агликона и величина желчегонного эффекта зависит от природы сахарного компонента.

Галактопиранозпд (гиперозид) оказался активнее других гликозидов. Сравнительно близок к нему арабофурано- вид (авикулярпн). Рутинозид (рутин) по холелетнческрЦ

активности в 2 раза слабое гиперозпда и лишь па 10 % превосходит свой агликон.

Таким образом, на желчегонную активность флавонолов существенное влияние оказывает как степень гпдроксилиро- вания кольца Б, так и природа сахарного компонента. Гли- кознды группы кверцетина более активны, чем их агликон. Действие флавоноидных соединений, по всей вероятности, обусловлено не только строением молекулы исходного вещества, но и продуктами ее метаболизма. Как показал анализ данных литературы, образующиеся в результате метаболизма вещества имеют различную активность, которая коррелирует с таковой исходных веществ.

В организме человека и Животного флавононды как фенольные вещества имеют три основные области, способные подвергаться метаболическим изменениям: 1) фенольные гидроксильные группы; 2) ароматические кольца; 3) различные заместители, присоединенные к ароматическому кольцу [20, 286].

Характерная особенность метаболизма флавоноидных веществ — разрыв пропанового фрагмента с образованием фенолов и фенолкарбоновых кислот. Наиболее полно изучен метаболизм рутина и кверцетина. В моче крыс, кроликов, морских свинок и человека найдены три метаболита: 3, 4- диокспфенолуксусная. 4-окси-З-метоксифенил уксусная и ме- токсифенилуксусная кислоты. Образование этих кислот возможно при разрушении у-пирона кверцетина по 1, 2- и-3, 4- связям. Образовавшаяся при этом 3, 4-дпоксифенил- уксусная кислота, как обычный фенол, метилируется в организме, превращаясь в 4-окси-З-метилоксифенилуксусную кислоту. При дегидроксплированпи последней получается метоксифенплуксусная кислота. Эти вещества образуются при введении рутина или кверцетина перорально. Инъекционное введение исключает образование метоксифенпл- уксусной кислоты, что дает основание предположить возможность дегпдроксилированпя под действием кишечныес бактерий.

Выявленные метаболиты кверцетина — различные фенол- карбоновые кислоты — обладают довольно высокой холе- летическоп активностью. Этот механизм растепления вероятен для кемпферола и мприцетина.

В таком случае из кемпферола образуется не обладающая холелетической активностью параоксифенилуксусная кислота, а из мприцетина — высокоактивная 3, 4, 5-трпок- сифенплуксусная кислота, которая превращается в не менее активную 3± 5-диокси-4-метоксифенилуксусиую кислоту.

Аналогичная закономерность получена при выяснении противовоспалительного действия флавонолов (см. табл, 31). С увеличением в боковом фенильном радикале числа оксн- групп противовоспалительная эффективность повышается. Так, мирицетин в 1,78 раза активнее кверцетина. При определении влияния сахарных компонентов на противовоспалительное действие кверцетиновых гликозидов установлено, что сахарный компонент увеличивает силу противовоспалительного эффекта: арабинофураноза — в 4,6 раза, галакто- нираноза — в 3,4 раза, рутиноза — в 2,1 раза (см. табл. 31). Выведение гидроксила их кверцетина (лютеолин) приводит к повышению противовоспалительной активности. Метилирование в нем З'-положения (изорамнетин) также увеличивает эффект действия.

Еслп флавоноидные гликозпды активнее агликона (см. табл. 31), то для флаванонов наблюдается обратная зависимость. Агликоны нарингенин и ликвиритигенин более активны, чем гликозпды нарингин и ликвиритин [284].

Результаты сравнения противовоспалительного действия ряда флавоноидов показали, что сила проявляемого эффекта зависит от числа оксигрупп в кольце Б, природы и места присоединения заместителей. В зависимости от класса фла- воноидных веществ гликозидирование увеличивает или уменьшает силу действия.

Известно, что флавоноидные вещества влияют на функцию почек, повышая диурез п уменьшая количество азотистых веществ в крови [18, 44, 255].

При фармакологическом изучении ряда веществ было установлено, что они обладают диуретическим или гппоазо- темическим действием (см. табл. 32). При сопоставлении структуры этих веществ с полученными фармакологическими результатами видно (см. табл. 32), что сила проявляемого эффекта также зависит от природы сахарного компонента и структуры функциональных групп, места их присоединения к флавонондному ядру. К примеру, рутин, в отличие от кемпферол-3-рутинозида, имеет оксигруплу в З'-положении, п его активность на 20 % выше. Введение метркспла в это же положение (нарцпссин) снижает гнпоазотемрческую активность на такую же величину.

Существенное влияние оказывает природа углеводного компонента. Нарцисснн и кейозид отличаются между собой природой гексозы в углеводном остатке — D-плюкоза и DT галактоза соответственно. Эта особенность в строении делает молекулу кейозида почти в 4 раза активнее молекулы нар- цпссина.

В группе кемпферол» робнппп обладает ітапболее выраженным действием 111J. Его молекула содержи г, как и кеіш- вид, и качестии одного на сахарных компонем і ои по третьему положению робнцобиозу.

Киерцетнн-З-монозиды (аинкулярин, гинерозид) имеют сравнительно высокую гшюазотемнческую активность и незначительно отличаются но проявляемому эффекту от своего аглнкона кверцетина (см. табл. 32). По диуретической активности они значительно уступают робиннну.

Таким образом, флавононды в зависимости ог строения проявляют различный фармакологический эффект.

Источником получения противоязвенных препаратов лик- внритона ифлакарбина являются солодка голая и уральская, корни и корневища которых служат лекарственным средством н сырьем для получения фотохимических препаратов.

Солодковый корень относится к наиболее распространенным и древнейшим лекарственным средствам, применяемым в китайской медицине за 2800 лет до н. э. Он был известен суммарийцам, индийцам и является классическим средством тибетской медицины [58]. Греческие ученые назвали его «скифским сладким корнем» [58]. Великий ІІбн Сина рекомендовал применять корни солодки при язвах почек, воспалении желудка, лихорадке, легочных заболеваниях [1].

Из арабской медицины солодка в XVII в. проникла в Европу, где в настоящее время входит в большинство фар- макопей. Солодка издавна применяется народами нашей страны и описана во всех травниках, включена во всё отечественные фармакопеи. Ценность солодки как лекарственного средства определяется наличием глнцпррнзиновой (отвечающей за антидотное н антналлергическое действие), глнцпррнтоновой кислот (противовоспалительное и антибиотическое действие) [198] н флаванон-халконового комплекса, обусловливающего как спазмолитическое, так и противоязвенное действие [207],

СОЛОДКА ГОЛАЯ —

GLYCYRRIZA GLABRA L.

СОЛОДКА УРАЛЬСКАЯ —

GLYCYRRIZA URALENSIS Fiseh,

Относятся к семейству Бобовые — Fabaceae. Солодка голая растет в Средней Азии, Казахстане, Закавказье, на Северном Кавказе и на юге европейской части СССР. Солодка уральская встречается в Казахстане, Киргизии, на Южном

Урале и на юге Сибири. В медицинской практике исполь* зуют солодковый корень в качестве отхаркивающего средст на и для получения флавоноидных препаратов ликвиритона, лпкуразпда и флакарбпна. Сырье заготавливают почти круглый год. Фармакологическое действие солодкового корня обеспечивают лпкуразид, глпцпрризиновая кислота, фла- воноиды (лпквпрнтон, лпквирптозпд, пзоликвиритрин и др.), сапонины,

Корень солодки — Radix Glycyrrizae

Внешние признаки. Куски корней и подземных побегов цилиндрической формы различной длины, толщиной от 0,5 до 5 см п более. Встречаются куски корней, переходящие в сильно разросшееся корневище толщиной до 15 см. Поверхность неочищенных корней и побегов слегка продольно- морщинистая, покрытая бурой пробкой; очищенное сырье снаружи от светло-желтого до буровато-желтого цвета с незначительными остатками пробки; излом светло-желтый, волокнистый. Запах отсутствует; вкус сладкий, приторный, слегка раздражающий.

Строение корней п подземных побегов беспучковое. На поперечном разрезе под лупой видны многочисленные широкие сердцевидные лучп, придающие корням лучистое строение, в ксилеме широкие просветы сосудов. Вдоль сердцевидных лучей часто образуются радиальные трещины. У побегов имеется небольшая сердцевина, у корней сердцевины нет. Резаное сырье — кусочки различной формы, размером: для неочищенного корня — от 1 до 10 мм, для очищенного — от 3 до 6 мм. При смачивании 80%-й серной кислотой порошок солодки окрашивается в оранжево-желтый цвет (глпцпрризпн).

Для стандартизации сырья по флаванон-халконовому комплексу А. Л. Литвиненко предложены спектрофотометрп- ческие методики анализа общей суммы флавоноидов в пересчете на лпквпрптигенпн.

Количественное определение общей суммы флавоноидов в корнях и корневищах солодки. Около 1 г (точная навеска) мелко измельченных корней солодки, просеянных через СИТО диаметром 0,2 мм, помещают в конусную колбу вместимостью 100 мл и обрабатывают 5 раз по 50 мл 50%-м спиртом при нагревании на водяной бане в течение 30 мин при температх- ре 55—СО СС, затем охлаждают под проточной водой. Спиртовые извлечения фильтруют в мерную колбу вместимостью 250 мл через бумажный фильтр, предварительно смоченвый

60%-м спиртом. Объем раствора доводят 50% -м спиртом до метки (раствор А).

По 2,5 мл раствора А переносят в мерные колбы вместимостью 50 мл, объем раствора первой колбы доводят 95%-м спиртом до метки и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм при длинах волн 295 и 375 нм, применяя в качестве контрольного раствора 95%-й спирт.

Содержание суммы флавопопдов (халконов, флаванопов и димерных халконовых производных) рассчитывают по формуле

v 250-50-С-100 %

Л — а-2,5 ’

где а — навеска, г; С — количество суммы флавоноидов, найденное по калибровочному графику, построенному но ликвирпгигенипу при длине волны 295 нм, г. Содержание суммы флавоноидов (халконов, флаванопов и дпмерных халконовых производных) н пересчете на лпквпритигенпн не менее 5,3 %,

Лпквпрптоп — Liquiritonum

Созданный во ВНИИХТЛС ликвиритон является суммарным флавонопдным препаратом и представляет собой желто-бурый аморфный порошок горького вкуса без запаха.

Подлинность препарата контролируют хроматографически. На круг медленнофильтрующей хроматографической бумаги радиусом 10 см наносят 0,1 мл (100 мкг) 0,1%-го раствора препарата в 95%-м спирте. Хроматографируют в камере в системе 3%-го раствора хлорида натрпя в течение 30 мин при температуре 20 °С. Хроматограмму сушат на воздухе 40 мин, после чего опрыскивают 10%-м спиртоводним раствором едкого натра *, при этом постепенно на хроматограмме обнаруживается желтое пятно с Rf около 0.2 (халконовые производные); желто-зеленое с Rf около 0,6 (глаброзид) и оранжевое пятно с Rf около 0,7 (уралозид). Допускается наличие других флавонондных пятен желтооранжевого цвета.

* Приготовление 10% то спиртоводного раствора едкого натра. 10,0 г едкого натра (ГОСТ 6309—73) растворяют в 30 мл воды в мерпой колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки.

Так как препарат представляет сумму флаванон-халко- цовыд соединении, то стандартизацию препарата проводят

нм

Рис. 13. УФ-спектры флавоноидов солодкп в 95% -м сппрте.

3 — взолпквиритпгсшш; 2 — ликуразид; 3 — ликвирвтнгенин; і — ликвирптпн,


по сумме флавоноидов в пересчете на лпкуразпд-стандарт с ограничением содержания халконовых соединений.

Количественное определение. Около 0,025 г препарата (точная навеска), высушенного при 100—105 °С до постоянной массы, растворяют в 95%-м спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. 2 мл раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длинах волн 295 и 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, применяя в качестве контрольного раствора 95%-й спирт (рис. 13).

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца лпкуразида*.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (Хх) рассчитывают по формуле

v D^-аЛ-т

где Z?! — оптическая плотность 'испытуемого раствора при длине волны 295 нм; D0 — оптическая плотность раствора

стандартного ооразца л и кур азида при длине волны 295 нм; aL — навеска испытуемого образца, г; а — навеска стандартного образца ликуразида, г; содержание суммы флавоноидов в препарате в расчете на ликуразид должно быть не менео 70,0 %.

Содержание суммы халконовых соединений (Х3) вычисляют по формуле v Dg.a. М00

Л2 ~ D-ax-2 *

где Z)2 — оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 375 нм; D — оптическая плотность раствора стандартного образца ликуразида при длине волны 375 нм; ах — навеска испытуемого образца, г; а — навеска стандартного образца ликуразида, г. Содержание суммы халконовых соединений в препарате в расчете на ликуразид должно быть не более 15,0 %,

* Приготовление раствора стандартного образца ликуразида.

0,025 г (точная навеска) стандартного образца ликуразида, высушенного до постоянной массы при 100—105 °С (ВФС 42-786—78), растворяют в 9596-м спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 9596-м спиртом до метки. 1 мл раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 9596-м спиртом до метки. Пригоден к употреблению в течение 5 дней.

Оптическую плотность определяют тотчас но приготовлении раствора препарата,

Раздельное определение основных флавоноидов ликви- ритона осуществляется хроматоспектрофотометрическим методом по приведенной ниже методике.

На хроматограмму наносят 0,1 %-е растворы исследуемых соединений в 95%-м спирте в количестве от 10 до 100 мкс каждого вещества н 400 мкг лпквпритона. Хроматографирование проводят на маркированных в форме клина пластинках с сплпкагелем КСК или на пластинах «Сплуфол» в системе бензол — метиловый спирт (8:2), При прохождении фронта растворителя до половины пластины хроматограмму вынимают, сушат под вытяжным шкафом в течение 30 мин п снова помещают для хроматографирования до прохождения фронта растворителя до конца пластины. Пластины вынимают, сушат иод вытяжным шкафом п маркируют зоны пятен под УФ-светом, Отмеченные зоны веществ количественно с помощью специального приспособления переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл с помощью 0,5 н. раствора щелочи, доводят объем раствора указанным раствором до метки. Через 20 мин измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре при длине волны


425 нм для ликуразида и уралозпда и при 340 нм — для ликвиритина и глаброзида в кювете с толщиной слоя 10 мм (рис. 14).

В качестве раствора сравнения применяют элюат из равной по площади пятна зоны чистого сорбента, В связи с незначительным содержанием ликвиритина и ликуразида определение этих веществ осуществляют в элюатах из трех хроматограмм.

Содержание халконов и халконпзпрующего в щелочп флавона уралозпда определяют по калибровочному графику, построенному по ликуразиду, нехалконизирующихся флавонов — по лпквиритину. Оба калибровочных графика построены с учетом потерь при десорбции веществ с хроматограммы (рпс. 15), Несмотря на имеющееся различие в наклоне кривых зависимость оптической плотности от концентрации для ликуразида лежит в пределах от 1 до 25 мкг вещества, а ликвиритина — от 2 до 20 мкг в 1 мл 0,5 н. раствора щелочи. Относительная ошибка определения лежит в пределах ±2,6—3,5 %,

По данной методике был проанализирован ряд серий препарата ликвпритон. Для этого на хроматографические

Рис. 15. Калибровочные графики флавоноидов в 0,5 н. растворе гидроокиси натрия.

I — лпкуразпда при 425 нм; 2 — 0,5

ликвиритина при 340 нм,

------------------------------------------------------- 0,6-

пластины было нанесено ' полосой по 0,4 мл (400 мкг) С>4]

0, 1%-го раствора ли к ви- • ритона. Анализ разлпч- 0,г\ ных серий ликвиритина показал, что содержание * суммы основных глпкози- 1 дов находится в пределах

60,5 — 77,6 %, при содержании в основном флаваноновых глпкозпдов уралозида — 35,57 — 40,73 %, глаброзида — 14,0—17,9 %. Содержание ликвиритина, как и халкона лп- куразида, не превышает 10 %.

Сопоставление результатов раздельного определения четырех основных гликозидов препарата лпквиритон с результатами, полученными по методике спектрофотометрического определения, показывает, что последнее позволяет правильно оценить наличие флаванонов как со свободным 4'-поло- жением, так и с замещенным. Различие в 10 % между суммарным содержанием флавоноидов, определенное прп 295 нм, и суммой основных четырех флавоноидов, найденных хроматоспектрофотометрическим методом, можно отнести к остальным флавоноидным соединениям, и в первую очередь — к неучтенному содержанию агликонов — лпквпрп- тпгенина и изоликвиритигенина.

Фармакологические свойства и применение. Ликвирптон обладает антацидным, спазмолитическим и противовоспалительным действием. Рекомендуется для лечения гппер- ацидных гастритов, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Он вызывает заживление деструкций слизистой желудка. В основе этого эффекта лежат иротивоспа- лительные свойства, спазмолитическое действие, а также способность уменьшать агрессивное действие желудочного сока на слизистую желудка.

Назначают ликвиритон внутрь по 1—2 таблетки 3—4 раза в день перед едой. Курс лечения составляет месяц. В случае необходимости лечение следует продолжить или повторить.

Препарат можно использовать для профилактики сезонных обострений язвенной болезни, назначая 2—3 раза в
дєпь. Он хорошо переносится больными и пе вызывает побочных явлений.

Выпускается лпквпрнтон в виде таблеток по 0,1 г в банках по 25 штук. Хранится в сухом прохладном месте. Срок годности препарата 3 года, таблеток 2 года,

Ликуразид — Licurasidum

Выделен из корней и подземных побегов солодки ГОЛОЙ п уральской. Ликуразид (2,4'-диокси-4-0-р-В-глюкопирано- зид-2-О-р—D-апиофуранозид халкона) применяют в качестве составной части препарата флакарбпн. Чистота препарата контролируется хроматографнчески.

Обнаружение посторонних флавоноидов. 0,01 г препарата растворяют в 10 мл ацетона, 0,05 мл полученного раствора (50 мкг) мнкронипеткой наносят полосой длиной 1,5—2 см на пластину «Силуфол» размером 15X50 мм на расстоянии 2 см от нижнего края. Пластинку с нанесенной пробой высушивают в токе теплого воздуха в течение 5 мин, ззтем помещают в камеру с 15%-й уксусной кислотой и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя поднимается почти до верхнего края пластинки, ее вынимают из камеры и сушат на воздухе 40 мин. Затем пластинку опрыскивают 0,5 н. раствором едкого натра. На хроматограмме должно появиться только одно пятно желто-оранжевого цвета с R, около 0,8.

При просматривании хроматограммы в ультрафиолетовом свете при длине волны 366 нм дополнительно у линии старта может обнаруживаться пятно сине-фиолетового цвета со светлым ореолом.

Количественное определение ликуразида. Около 0,025 г (точная навеска) препарата, высушенного при 100—105 °С до постоянной массы, растворяют в 95%-м спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. 1 мл раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и объем раствора доводят 95%-м спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм (см. рис. 13). В качестве контрольного раствора применяют 95%-й спирт.

Параллельно проводят измерение оптической плотности раствора стандартного образца ликуразида*.

Содержание ликуразида в процентах (X) вычисляют по формуле

Dy-a-№ 0

^ = ~d~7i !

и і

где Di — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — оптическая плотность раствора стандартного образца лику- разида; at — навеска испытуемого образца, г; а — навеска стандартного образца ликуразида, г. Содержание ликурази- да в высушенном препарате должно быть не менее 97,0 %.

* Приготовление раствора стандартного образца ликуразида.

0,025 г (точная яавеска) стандартного образца ликуразида (ВФС 42- 786—78), высушенного при 100—105 °С до постоянной массы, растворяют в 95%-м спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. 1 мл раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. Пригоден к употреблению в течение 5 дней.

Лпкуразпд выпускается по 200—300 г в банках пз оранжевого стекла. Хранится препарат в сухом, защищенном от света месте. Срок годности 2 года.

Флакарбнн — Flacarbinum

Созданный во ВНИИХТЛС комбинированный препарат, состоящий пз флавонондов кверцетина и ликуразида, натрпй-карбоксиметилцеллюлозы и пектина.

Подлинность контролируют хроматографнчески и по цветным реакциям на натрий и пектины по приведенным ниже методикам [28, 29].

0,1 мл фильтрата наносят на круг медленнофнльтрую- щей хроматографической бумаги диаметром 10 см вокруг расположенного в центре круга отверстия диаметром 0,5 — 0,8 см. В отверстие вставляют трубку из той же хроматографической бумаги, свернутую в четыре слоя. Конец трубки опускают в помещенную в стеклянную камеру чашку Петри с 15%-м раствором уксусной кислоты и хроматографируют до-прохождения фронта растворителя к концу круга. Хроматограмму высушивают на воздухе 30 мин и рассматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 360 нм. На хроматограмме обнаруживается два пятна: желтое пятно на линии старта (кверцетин) и темное — с Rj около 0,5 (лику-. разид).

Крупинка порошка растертых гранул, внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в желтый цвет (натрий).

1 мл раствора А, приготовленного для количественного определения, разбавляют водой до 10 мл, 1 мл полученного раствора помещают в колбу вместимостью 10 мл, прибавляют 6 мл концентрированной серной кислоты и нагревают ца кипящей водяной бане 20 мин, затем прибавляют 0,2 мл

0,15%-го спиртового раствора карбазола; постепенно появляется красное окрашивание (пектин).

К 10 мл раствора А прибавляют 10 мл жидкости Фелинга и нагревают до кипения; выиадает оранжево-красный осадок (глюкоза).

Количественное определение ликуразпда, Около 1 г порошка растертых гранул (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл 95%-го спирта и нагревают на водяной бане при перемешивании до кипения. После отстаивания в течение 5 мин раствор осторожно сливают через стеклянный фильтр ПОР 40, добиваясь, чтобы на фильтр попадало небольшое количество частиц. Операцию извлечения повторяют еще 2 раза.

Спиртовые извлечения отбрасывают, а частицы вещества на стеклянном фильтре растворяют в 15 мл горячей воды, фильтруя в мерную колбу, содержащую промытую навеску препарата. Затем в эту же колбу прибавляют 20 мл воды, взбалтывают 20 мин. Раствор охлаждают в течение 1 ч при периодическом взбалтывании, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают (раствор А).

10 мл раствора А помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 2,5 мл разведенной уксусной кислоты, 5 мл реактива осаждения *, жидкость перемешивают стеклянной палочкой, которую затем промывают 5 мл воды и оставляют на 30 мин. Взвесь центрифугируют 7 мин со скоростью 5— 6 тыс. об/мин.

Раствор над осадком полностью сливают, а осадок взмучивают той же палочкой с 15 мл воды и палочку промывают 5 мл воды. Взвесь центрифугируют, как указано выше, про- мыцную жидкость отбрасывают и промывание осадка повторяют еще раз. Затем в центрифужную пробирку, промывая стенки, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты, взмучивают той же палочкой до полного растворения осадка. Взвесь центрифугируют, как указано выше, промывную жидкость отбрасывают и промывание осадка повторяют еще раз. Затем в центрифужную пробирку, промывая стенки, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты, взмучивают этой же палочкой до полного растворения осадка.

Содержание центрифужной пробирки последовательно с помощью 30 мл воды количественно переносят в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл 10%-го раствора ацетата натрия, перемешивают, прибавляют 0,5 мл 0,1%-го раствора ксиленолового оранжевого и титруют (из микробюретки вместимостью^ мл) 0,01 М раствором трилона Б ** до изменения красно-фиолетового окрашивания в желтое.

1 мл 0,01 М раствора трплона Б соответствует 0,006 г безводной натрий-карбокснметилцеллюлозы, которой должно быть от 8,0 до 12 % в пересчете па сухие гранулы.

Около 0,5 г порошка растертых гранул (точная навеска) помещают на высушенный до постоянной массы стеклянный фильтр ПОР 40 и промывают нагретым до кипения метиловым спиртом 4 раза по 10 мл, перемешивая стеклянной палочкой остаток на фильтре. Извлечение собирают в мерную колбу вместимостью 50 мл, после охлаждения доводят объем раствора метиловым спиртом до метки (раствор Б).

Остаток на фильтре промывают кипящим 80%-м раствором ацетона в*воде по 20 мл 7 раз. Первые три порции отфильтровывают без вакуума, остальные — под вакуумом. Ацетоновый раствор отбрасывают, а остаток на фильтре сушат при 102,5±2,5 °С до постоянной массы. Полученная масса остатка представляет собой сумму пектина и натрнй- карбоксиметплцеллюлозы, которой должно быть от 18,0 до 22 % в пересчете на сухие гранулы.

15 мл раствора Б помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 4 мл реактива осаждения и 5 мл воды, жидкость перемешивают стеклянной палочкой, которую 8атем промывают 5 мл метилового спирта и оставляют на 30 мин. Взвесь центрифугируют 7 мин со скоростью 5—6 тыс. об/мин.

Раствор над осадком полностью сливают в мерную колбу вместимостью 100 мл, а осадок взмучивают той же палочкой с 15 мл 0,1%-го раствора ацетата натрия в метиловом спирте *** п палочку промывают 5 мл такого же раствора. Взвесь центрифугируют, как указано выше, и промывание осадка повторяют еще раз. Промывные растворы помещают в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты п доводят объем раствора водой до метки (раствор В). В центрифужную пробирку с осадком после получения раствора В, промывая стенки пробирки, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты. Взмучивают осадок стеклянной палочкой до полного растворения, оставляют на 10 мин до образования осадка желтого цвета. Затем в центрифужную пробирку прибавляют 20 мл воды п количественно переносят в колбу вместимостью 250 мл, фильтруя через вату, смоченную водой. Пробирку и вату промывают водой 2 раза по 25 мл, присоединяя к первоначальному фильтрату. Фильтрат нейтрализуют 20 мл 10%- го раствора ацетата натрия, прибавляют 0,5 мл 0,1%-го раствора ксиленолового оранжевого и титруют 0,01 М раствором трилона Б (из микробюретки вместимостью 5 мл) до изменения красно-фиолетового окрашивания в лимонно- желтое.

1 мл 0,01 М раствора трплоиа Б соответствует 0,001209 г С1Г)Н100, (безводного кверцетина), которого должно быть от 1,8 до 2,2 % в пересчете на сухие гранулы.

* Приготовление реактива осаждения. 1,5 г ацетата свинца (ТУ 6-09-3429—73, х. ч.) растворяют в 50 мл метилового сцирта. Полученный раствор фильтруют через двойной фильтр (предварительно промытый таким же раствором ацетата свинца) в мерную колбу вместимостью 100 мл, содержащую 10 г триэтаноламина (ТУ 6-02-916—73) н доводят объем раствора метиловым сииртом до метки. Раствор годен в течение месяца.

** 0,01 М раствор трилона Б. а) Приготовление: 3,9 г трилона Б (ГОСТ 10652—73, х. ч.) растворяют в 250 мл воды, фильтруют в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки. Раствор годен в течение месяца, б) Установка титра: около 0,3 г (точная навеска) цинка (ГОСТ 3640—79) растворяют 5 мл разведенной серной кислоты в мерной колбе вместимостью 500 мл и после растворения доводят объем раствора водой до метки.

5 мл полученного раствора отмеривают микробюреткой в колбу, содержащую І00 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора ксиленолового оранжевого н нейтрализуют но каплям 5%-м раствором гндрокарбо- ната натрия до красно-фиолетового окрашивания, затем прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора **** н титруют (из мнкробюрет- кн вместимостью 5 мл) 0,01 М раствором трилона Б до изменения красно-фиолетовой окраски на желтую. Раствор годен в течение месяца.

*** Приготовление0,1%-го раствора ацетата натрия в метиловом спирте. 1 г ацетата натрия (ГОСТ 199—78, х. ч.) растворяют в метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 1 л н доводят объем раствора этим же спиртом до метки.

**** Приготовление ацетатного буферного раствора pH 5,5. 60 в ацетата натрия (ГОСТ 199—78, х. ч.) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 мл разведениой уксусной кислоты ц доводят объем раствора водой до метки.

Поправочный коэффициент вычисляют по первому способу [ГФ X, с. 831); *

v 5-a.v

А 0,0006538-5001

где о — навеска цинка, г; V — объем израсходованного на титрование трилона Б, мл.

Вода должна выдержать кроме пробы, указанной в ГФ X, следующую пробу: к 100 мл воды прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора и 10 капель 0,1%-го раствора ксиленолового оранжевого, окраска раствора должна быть желтая. Если вода данную пробу не выдерживает, ее перегоняют в стеклянном аппарате нлн пропускают через колонку с катионитом, согласно указаниям ГФ X (с. 840),

Все реактивы готовят на воде, удовлетворяющей указанным требованиям. 25 мл раствора В помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 370 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качество раствора сравнения используют воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца ликуразида *«

Содержание ликуразида в процентах (X) вычисляют по формуле

v D^a-100-100

Xl = —6) 4

где Dj — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — онтнческая плотность раствора стандартного образца ликуразида; а — навеска стандартного образца ликуразида, г; а, — навеска гранул, взятых для получения раствора Б, г; b — потеря в массе гранул при высушивании, %, Содержание С2вН80О13 (ликуразида) в пересчете на сухие гранулы должно быть от 1,8 до 2,2 %.

* Приготовление раствора стандартного образца ликуразида.

0,0300 г (точная навеска) высушенного прн 102,5+2,5 °С до постоянной массы стандартного образца ликуразида (ВФС 42-786—78) растворяют в .метиловом сйирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора тем же спиртом до метки (основной раствор).

5 мл основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл метилового спирта, 4 мл реактива осаждения, 1 мл разведенной азотной кислоты, 40 мл 0,1%-го раствора ацетата натрия в метиловом спирте и доводят объем раствора водой до метки. 25 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Четкость пятен и достаточная величина Rf в системе бензол — метиловый спирт — ацетон (8 ; 2 : 10) позволили провести количественную оценку ликуразида хроматоспектрофотометрическим и денситофлуорометрическим методами [80, 83]. В первом случае методика аналогична методике анализа препарата ликвиритон.

Во втором случае использованы исследования по флуоресцентным свойствам комплексов флавонопдов с хлористым алюминием [80, 236], в результате которых установлено наличие максимума флуоресценции комплекса ликуразида с хлористым алюминием при длине волны 485 нм, а для кверцетина — при 493 нм.

Денситофлуорометричеекое определение ликуразида и кверцетина в гранулах «Флакарбин». На пластины «Снлу- фол» наносят мпкрошшеткой по 0,02 мл спиртового раствора препарата таким образом, чтобы диаметр стартовых пятен не превышал 2 мм, и хроматографируют в системе бензол —

Рис. 1в. Калибровочные графпкп для денситофл уорометрического определения ликурааида и квер- цетина.

і — кверцетин, * — ликурнзвд,

метанол — ацетил — ацетон (40 ; 16 : 3:1), Величина фронта растворителя 100 мм. Пластины сушат под вытяж-

стого алюминия и высушивают кв потоке деплого воздуха, Денситометринеское измерение проводят через 30 мин, устанавливая монохроматоры возбуждения и эмиссии прибора соответственно максимуму возбуждения и 'флуоресценции ликуразида —422 и 485 нм, кверцетина — 450 и 493 нм. Сканирование хроматограммы проводят в направлении, перпендикулярном продвижению фронта растворителей. Каждую пластину сканируют 5 раз, рассчитывая среднее значение показателей.

Содержание веществ рассчитывают по калибровочным графикам, построенным по ликуразпду- и кверцетину-стандарту (рис. 16). Для построения калибровочных графиков на пластины «Силуфол» наносят кратные количества веществ- стандартов (0,1—0,5 мкг) и проводят определение, как и прп анализе препарата.

Сравнение хроматоспектрофотометрического и денсито- флуорометрпческого определения показывает наличие меньшей относительной ошибки при проведении анализа по первой методике. Однако следует учесть, что денситофлуоро- метрпческая методика имеет на порядок более высокую чувствительность, что позволяет количественно определять вещества до 0,1 мкг, в то время как хроматоспектрометрп- ческим .методом определение вещества возможно от 2 мкг и более в 1 мл раствора. Кроме того, при денситофлуорометрн- ческой методике сокращается время анализа с 3,5 до 2 ч. Высокая чувствительность денситофлуорометрип может служить основанием для рекомендации применения ее при хе- мотаксономическнх исследованиях.

Приведенные характеристики позволяют рекомендовать к применению хроматоспектрофотометрнческую методику в тех случаях, когда анализ требует более высокой точности (в пределах 3—3,5 %), а денситофлуорометрическую мето-
дику — для анализа микроконцентраций лпкуразида (0,1 — 0,5 мкг) с относительной ошибкой определения 4,2—5,1 %,

Фармакологические свойства и применение. Ликуразид обладает противовоспалительной и спазмолитической активностью; кверцетин оказывает капилляроукрепляющее действие; пектин и натрий-карбоксиметилцеллюлоза обладают послабляющей активностью. Перечисленные свойства компонентов позволяют гранулам «Флакарбин» оказывать спазмолитическое, капилляроукрепляющее и противовоспалительное действие, способствовать заживлению язв желудка и двенадцатиперстной кишки, снижать кислотность желудочного сока и нормализовать работу кишечника, устраняя аапоры. Флакарбин малотокснчен и в отличие от випалина оказывает более «мягкое» действие на организм.

Назначают флакарбин больным с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки по 1/2 чайной ложки

3 раза в день до еды. Препарат следует запивать теплой водой (1/3—1/2 стакана). Срок лечения обычно составляет 3—

4 нед. При необходимости курс лечения можно продолжить или повторить.

Препарат выпускается по 100 г в виде гранул во флаконах. В 1 г гранул содержится 0,02 кверцетина, 0,02 г лику- разида, 0,1 г натрий-карбоксиметилцеллюлозы, 0,1 г пектина. Флакарбин следует хранить в сухом, защищенном от света месте. Срок годности 3 года,

НОГОТКИ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ (КАЛЕНДУЛА) —

CALENDULA OFFICINALIS L.

Относится к семейству Астровые — Asteraceae. В СССР культивируется на Украине, в Белоруссии, на Северном Кавказе и в других районах. В медицинской практике применяют цветки календулы для получения настойки, настоя, препаратов калефлон и карофилен. Сырье заготавливают в начале распускания трубчатых цветков. Препараты календулы применяют в качестве бактерицидных и противовоспалительных средств. Фармакологические свойства сырья обеспечивают каротиноиды, флавоноидьц сапонины и другие биологически активные вещества.

Цветки ноготков — Flores Calendnlae

Внешние признаки. Сырье состоит из цельных или

частично осыпавшихся корзинок диаметром до 5 см, без цветоносов или с остатками цветоносов дтиюй не более 3 см.

Обертка серо зеленая, одио-двурядная; листочки ее линейные, заостренные, густоопушенные. Цветоложе слегка выпуклое, голое. Краевые цветки язычковые, длиной 15— 28 мм, шириной 3—5 мм, с изогнутой короткооиушенной трубкой, трехзубчатым отгибом, вдвое превышающим обвертку, и с четырьмя-пятыо жилками. Цветки расположены в два-три ряда у немахровых и от 10 до 15 рядов у махровых форм и окрашены в красновато-оранжевый, оранжевый, ярко- или бледно-желтый цвет. Пестик с изогнутой нижней одногнездной завязью, тонким столбиком и двулопастным рыльцем. Средние цветки трубчатые, к пятизубчатым венчиком; цвет их оранжевый, желтовато-коричневый или желтый. Запах слабый. Вкус солоновато-горький.

Количественное определение экстрактивных веществ. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито № 10 с отверстиями диаметром 1 мм по ГОСТ 214—77. Экстрактивные вещества из сырья извлекают 70%-м спиртом [ГФ X, с. 815].

Содержание зкетрактивных веществ в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

v 6-200-100

Л ~ а (100 - с) ’

где а — масса сырья, г; b — сухой остаток, г; с — потеря в массе при высушивании сырья, %.

Упакованное по 20 кг в ящики из гофрированного картона или в двойные мешки сырье календулы хранится на стеллажах, в сухом, хорошо проветриваемом помещении, Срок годности 2 года,

Настойка календулы — Tinctura Саіешіиіае

Прозрачная жидкость желтовато-бурого цвета со специфическим запахом, горького вкуса. Противовоспалительное действие обусловлено флавонолглпкозидами кверцети- нового ряда. Поэтому количественное определение проводится спектрофотометрически в пересчете на кверцетин [157].

Спектрофотометрическое определение суммы флавонондов в настойке календулы. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 5 мл препарата, прибавляют 10 мл 10%-го раствора серной кислоты, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают 30 мин в кипящей водяной бане. Затем раствор упаривают до половины первоначального объема, охлаждают 15 мин в сосуде со льдом и фильтруют через.

фильтр с диаметром около 5 см. Колбу, в которой проводят гидролиз, и осадок на фильтре промывают водой 4 раза по 10 мл. В колбу порциями прибавляют 50 мл 95%-го этанола, подогретого до 50 °С, и растворяют осадок на фильтре. Раствор собирают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят 95%-м этанолом до метки н перемешивают. 5 мл раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, объем раствора доводят 50%-м этанолом до метки и перемешивают. Измеряют оитіпєскую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 370 нм. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин рассчитывают по раствору стандартного образца. В качестве раствора сравнения используют 50%-й этанол.

Приготовление раствора стандартного образца кверцетина. Растворяют 0,04 г (точная навеска) стандартного образца кверцетина (ФС 42-1290—79), высушенного до постоянной массы при 130 °С, в 95%-м этаноле в колбе вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 95%-м этанолом до метки и перемешивают. Помещают 1 мл раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 50%-м этанолом до метки и перемешивают. 1 мл раствора стандартного образца содержит 0,000008 г кверцетина.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете на кверцетин в препарате рассчитывают по формуле 0,000008-Z)j-100-25-100 0,08-^ -

=~* .

где D0 — оптическая плотность раствора стандартного образца кверцетина; Dt — оптическая плотность испытуемого раствора.

Количественное содержание суммы флапонопдов в настойке календулы в процентах (X) в пересчете на кверцетин по удельному показателю поглощения при длине волны 370 нм \ЕJ си 646) рассчитывают по формуле v Cj-100-25 Z^-100

Х == 046-5-5 = 6-6 •

Относительная ошибка определения 3,7 %.

Фармакологические свойства и применение. При порезах и гнойных ранах, ожогах. Для полоскания прп воспалительных заболеваниях верхних дыхательных путей, ангине и др. (чайная ложка на стакан воды). Как желчегонное средство (по 10—20 капель на прием).

Выпускается препарат во флаконах по 40 мл. Хранится в защищенном от света месте, Срок годности 3 года,

Калефлоп — Caleflonum

Представляет собой очищенный экстракт, получаемый пз цветков календулы. Стандартизацию препарата согласно созданной Л. Я. Снрепко методике проводят по сумме фла- воноидов в пересчете на кверцетин-стандарт.

Количественное определение суммы флавоноидов. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в 20 мл 70%-го спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения до комнатной температуры доводят объем раствора 70%-м спиртом до метки. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 5 мл раствора препарата, 10 мл 1 н. раствора соляной кислоты, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают 1 ч при 170 °С. Затем раствор упаривают до половины первоначального объема, охлаждают 15 мин в сосуде со льдом п фильтруют через фильтр диаметром 5 см. Колбу, в которой проводили гидролиз, и осадок на фильтре промывают водой 4 раза по 10 мл. В ту же колбу помещают 50 мл 95%-го спирта, подогретого до 50 °С, и растворяют осадок на фильтре. Раствор, полученный после растворения осадка, собирают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл отбирают пипеткой 5 мл полученного раствора, прибавляют 2,5 мл 0,01 М раствора уранила ацетата ***, доводят объем раствора 50%-м спиртом до метки и через 10 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют смесь, состоящую пз 0,5 мл 0,01 М раствора уранила ацетата и 4,5 мл 50%-го спирта.

Содержание суммы флавоноидов определяют с помощью раствора стандартного образца * или с помощью калибровочного графика **.

1. В случае определения с помощью раствора стандартного образца содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете на кверцетин вычисляют по формуле

v 0,0250-1 •£>1-25-100-100 Х “ 25*25-/>0-н-5 1

где D, — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — оптическая плотность раствора стандартного образца; н — навеска препарата, г.

2. В случае определения по калибровочному графику содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете

на кверцетин вычисляют по формуле

V а-25-100-25-100 Л = 5-5-ы ’

где а — содержание кверцетина в 1 мл спектрофотометрн- руемого раствора, найденного по калибровочному графику, г. Содержание флавоноидов в пересчете на кверцетин должно быть не менее 12,0 %.

* Приготовление раствора стандартного образца. 0,0250 г (точная навеска) стандартного образца кверцетина (ФС 42-1290—79), высушенного до постоянной массы при 130 С'С, растворяют в 9596-м спирте в мерной колбе вместимостью 25 мл и доводят объем раствора 9596-м спиртом до метки (раствор А).

1 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 25 ыл, доводят объем раствором 9596-го спирта до метки и используют для количественного определения. 1 ыл полученного раствора стандартного образца содержит 0,00004 г кверцетина. Срок годности раствора А 1 год.

** Построение квлибровочного графика. 2 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки.

В мерные колбы вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл (0,00010 г), 7,5 ыл (0,00015 г), 10,0 мл (0,00020 г), 12,5 мл (0,00025 г), 15,0 мл (0,00030 г), 17,5 мл (0,00035 г) 20,0 мл (0,00040 г) полученного раствора, 2,5 мл 0,01 М раствора уранила ацетата, доводят объем 5096-м спиртом до метки и измеряют оптическую плотность, как описано выше.

При построении калибровочного графика на оси ординат откладывают оптическую плотность, на оси абсцисс — содержа sue кверцетина в 1 мл спектрофотометрируемого раствора в граммах.

*** Приготовление 0,01 М раствора уранила ацетата. 0,84 в ура- нпла ацетата растворяют в 150 мл воды, фильтруют в мерную колбу вместимостью 200 ыл и доводят объем раствора водой до метки. Срок Годности полученного раствора 1 год.

Фармакологические свойства и применение. Калефлон ока- вывает противовоспалительное и стимулирующее репаративные процессы действие при заболеваниях желудочно-кишечного тракта. По действию он отличается от ликвиритона более выраженным ингибирующим влиянием на секрецию желудочного сока, а также положительным действием на слизистый барьер желудка. Калефлон применяют при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, острых и хронических гастритах в фазе обострения, в том числе с сопутствующими воспалительными заболеваниями желчного пузыря и желчевыводящих путей.

Препарат назначают после еды по 0,1—0,2 г 3 раза в сутки. Обычно курс лечения продолжается 3—4 нед, в случае медленного рубцевания язв курс лечения можно продолжить до 6 нед.

Больным язвенной болезнью н гастритами с повышенной кислотностью калефлоы следует принимать в комплексе с антацидами, спазмолитикам и и другими препаратами, назначаемыми в этих случаях. В целях профилактики сезонных обострений язвенной болезни рекомендуется провести 2—3- иедельный курс лечения калефлоном.

При применении препарата у отдельных больных могут наблюдаться кожный зуд и диспепсические расстройства (горечь во рту, ощущения жжения в эпигастрии, усиление болей в животе). В этом случае следует прекратить прием препарата.

Калефлон выпускают в таблетках по 0,1 г в банках по 25 штук и в ячейковой контурной упаковке по 10 штук. Хранится препарат в сухом, защищенном от света месте. Срок годности препарата 3 года, таблеток 4 года.

БЕССМЕРТНИК ПЕСЧАНЫЙ (ЦМИН ПЕСЧАНЫЙ)— HELICHRYSUM ARENARIUM (L.) MOENCII

Относится к семейству Астровые — Asteraceae. Растет в средней п южной полосе европейской части СССР, реже — в степной части Западной Сибпрц и Казахстана. Промысловые заготовки проводятся на Украине, в Белоруссии и в прилегающих к ним областях РСФСР. В медицинской практике применяют соцветия бессмертника песчаного для получения препаратов желчегонного действия, Сырье заготавливают в начале цветения бессмертника, до раскрытия боковых корзинок. Фармакологическое действие соцветий определяют флавоны, горечи, дубильные вещества, эфирное масло и другие биологически активные вещества.

Данные народной медицины о желчегонном действии соцветий бессмертника песчаного у нас в стране были проверены и подтверждены в лаборатории академика И. П. Павлова [106], а затем во ВНИИХТЛС, где в 1947—1948 гг, был создан препарат флампн 1225],

Цветки бессмертника песчаного —

Flores Heliehrysi агенагіі

Внешние признаки. Корзинки шаровидные, одиночные пли по нескольку вместе на коротких шерстисто-войлочных цветоносах длиной до 1 см, в диаметре около 7 мм. Корзинки состоят из многочисленных цветков, расположенных на голом цветоложе, окруженных многочисленными неплотно прижатыми листочками обвертки. Все цветки трубчатые, пятизубчатые, обоеполые, снабженные хохолком. Листочки обвертки вогнутые, сухие, пленчатые, блестящие, наружные — яйцевидные, средние — лопатчатые, удлиненные, внутренние — узкие, линейные. Цвет обвертки лимонножелтый; окраска цветков также лпмонпо-желтая или оранжевая. Запах слабый ароматный, вкус пряно-горький.

Количественное определение суммы флавоноидов проводится спектрофотометрпческим методом по следующей методике [78, 79].

Из аналитической пробы сырья берут около 1,0 г (точная навеска) воздушно-сухих цветков бессмертника и помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, обрабатывают 5 раз по 50 мл 50%-м спиртом при нагревании на водяной бане 30 мин при температуре 60 °С. Спиртовые извлечения фильтруют через бумажный фильтр, предварительно смоченный 50%-м спиртом, в мерную колбу вместимостью 250 мл. Объем раствора доводят 50%-м спиртом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл переносят 2 мл полученного раствора п доводят объем 95%-м спиртом до метки. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре при длине ВОЛНЫ 315 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 95%-й спирт.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье (считая на пзосалипу.рпозид) вычисляют по формуле

v С-250-50-100 100

Л ~ а-2 ’ 100 — Ь'

где а — масса сырья, г; С — количество суммы флавоноидов, найденное по калибровочному графику, построенному по изосалнпурпозиду-стандарту, г; Ъ — потеря в массе при сысушиванип сырья, %. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на абсолютно' сухое сырье (считая на изосалииур- позид) должно быть не менее 8,0 %.

Построение калибровочного графика. 0,025 г (точная навеска) изосалппурпозида-стандарта (ВФС 42-37—72) растворяют 95%-м спиртом в мерной колбе вместимостью 250 мл, объем доводят 95%-м спиртом до метки. Отбирают 0,25; 0,50; 1,25; 2,5; 5,0; 6,25 мл приготовленного раствора и помещают в мерные колбы вместимостью 25 мл. Доводят объемы растворов 95%-м спиртом до меток. Оптическую плотность растворов измеряют на спектрофотометре при длине

волны 315 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 95%-й спирт.

Для построения калибровочного графика на осп ординат откладывают оптическую плотность растворов, а на осп абсцпсс — концентрации пзосалппурпозида стандарта в граммах в 1 мл спсктрофотометрирусмых растворов.

Хранится сырье бессмертника песчаного в аптеках в ящиках пли жестянках, на складах — в мешках. Срок годности 3 года.

Для получения препаратов применяют также цветки бессмертника песчаного резано прессованные (Flores Helichrysi arenarii concisocorapressi),

Фламнн — Flaniinum

Созданный во ВНИИХТЛС суммарный препарат из соцветий бессмертника песчаного, содержащий не менее 70 % флавоноидов. Представляет собой желтый порошок со слабым специфическим запахом, горьким на вкус.

Идентификацию препарата проводят по цветным реакциям или хроматографическп по следующей методике. 0,1 мл (100 мкг) спиртового раствора препарата наносят на круг медленнофильтрующей хроматографической бумаги радиусом 10 см. Параллельно наносят 0,05 мл (50 мкг) раствора стандартного образца пзосалппурпозида. Хроматографируют в камере в системе 15%-го раствора уксусной кислоты при температуре 20±2 °С до тех пор, пока фронт растворителя не дойдет до конца бумаги. Хроматограмму вынимают из камеры, сушат на воздухе 40 мин и опрыскивают 10%-м спиртоводным раствором едкого натра *. Па хроматограмме постепенно на уровне пятна стандартного образца пзо- салипурпозида обнаруживается желтое пятно. Допускается наличие других пятен.

* Приготовление 10%-го спиртоводного раствора едкого натра. 10,0 г едкого натра растворяют в 30 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем 95%-м спиртом до метки. Раствор годен в течение 6 мес.

Идентификация флавоноидных соединений фламина может быть проведена п хроматографией на пластинах «Силу- фол» в системе растворителей бензол — метанол — ацетон (8:2: 10). При просматривании хроматограмм в УФ-свето наблюдается не менее пяти пятен, из которых первые два имеют бурый цвет, переходящий в ярко-желтый при обработке 0,5 н. раствором едкого натра (нзосалпиурпознд и (±)-нарпнгенин-5-глюкозпд).

Рис. 17, Спектры поглощения флавоноидов бессмертника в 95%-м спирте.

1 — изосалппурпозид; г — (±) нарингеннн-з-О-глюкозпд; 3 — препарат

фламин.


Количественное определение суммы флавоноидов. Около 0,05 г тщательно растертого препарата (точнан навеска) раст- ворнют в небольшом количестве 95%-го спирта в.мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем 95%-м спиртом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл переносят 2 мл этого раствора и доводят объем 95%-м спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 315 нм (рис. 17) в кювете с толщиной слоя 10 мм, применяя в качестве контрольного раствора 95%-й спирт.

Содержание флавоноидов в препарате рассчитывают по формуле

v С-100-50-100-100 Л а-2-(100 — Ъ) 1

где С — количество флавоноидов в 1 мл, найденное по калибровочному графику *, г; а — навеска, г; b — содержание влаги. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 70,(D %.

* Построение калибровочного графика. 0,01000 г (точная навеска) стандартного образца пзосалппурпозида (ВФС 42-30-^-72), высушенного

/то постоянной массы при 100—105 "О, растворяют п небольшом количество 95%-го спирта в мерной ко. і би вмос і нмостыо 100 мл н доводят объем 95%-м спиртом до метки. Отбирают 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 и 2,5 мл приготовлені лого раствора в мерные колбы вместимостью 10 мл и доводят объемы 95%-м спиртом до меток. Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 315 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, применяя в качестве контрольного раствора 95% -й спирт.

Для построения калибровочного графика на оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси абсцисс — концентрацию стандартного образца изосалииурпозида в граммах в 1 мл снектрофотомет- рируёмого раствора.

Так как основной эффект желчегонного действия обусловлен наличием во флавине нзосалппурпозида и суммы (+) н (—) нарішгєшш-5-гликозидов для количественного определения предложена хроматоснектрофотометрическая методика [79].

0,1 мл (100 мкг) спиртового раствора препарата наносят на пластину «Снлуфол» н хроматографируют в системе растворителей бензол — метиловый спирт — ацетон (8:2: 10). Когда фронт растворителя поднимется до края пластинки, ее вынимают и сушат на воздухе. Просматривают в УФ- свете, маркируют зоны пятен 1 и 2. Первое пятно количественно переносят с помощью специального приспособления 95%-м спиртом в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем этим же растворителем до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 370 нм (см. рис. 17). Второе пятно переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл с помощью 95%-го спирта и измеряют оптическую плотность при длине волны 275 нм (см. рис. 17). В качестве раствора сравнения применяют элюат из равного по площади пятна зоны чистого сорбента.

Содержание нзосалппурпозида и суммы (-{-) и (—) на- рингенпн-5-гликозіідов определяли по калибровочным графикам, построенным по изосалипурпозпду-стандарту и сумме (+) и (—) нарингенин-5-глцкозидов. При построении калибровочных графиков в условиях опыта учитываются потери за счет неполной десорбции веществ с хроматограмм.

Зависимость оптической плотности от концентрации для нзосалппурпозида и суммы (+) и (—) нарингенин-5-глико- зидов лежит в пределах от 2 до 20 мкг в 1 мл 95%-го спирта.

Полученные результаты анализа показали наличие во фламине нзосалппурпозида от 37,2 до 40,75 %, а наринге- шш-5-О-гликозпда — 22,39—28,26 %. Эти же соединения составляют в экстракте бессмертника 2,40—4,20 и 1,13— 2,40 % соответственно. Таким образом, основные биологически активные вещества, обусловливающие действие фла-

мина, составляют более 55 % от взятой навески вещества.

Фармакологические свойства и применение. Фламнн применяется для лечения хронических воспалительных заболеваний, печени, желчного пузыря и желчных путей — холецистита, холангита и гепатохолецистите. Назначают препарат внутрь в дозе 0,05 г. В процессе лечения эта доза может быть увеличена. Фламнн принимается 3 раза в день за 30 мин до еды с небольшим количеством теплой воды (1/2 — 1 стакан).

Курс лечения препаратом продолжается 2—3 нед и более в зависимости от течения заболеваний. Лечение флами- ном не исключает применения других терапавтических мероприятий. В случае необходимости курс лечения может быть повторен. Побочные явления и противопоказания для применения препарата не установлены.

Выпускается фламнн в таблетках по 0,05 г в упаковке по 20 таблеток. Хранится препарат в сухом, защищенном от света месте. Срок годности 4 года,

Экстракт цветков бессмертника сухой —■

Extractum florum Helichrysi arenarii siceum

Медицинская промышленность выпускает экстракт цветков бессмертника сухой в виде гранулированного порошка, который назначается в качестве желчегонного средства по 1 г 3 раза в день.

Цветки бессмертника входят также в состав желчегонных сборов. № 1: цветки бессмертника песчаного — 40 г, листья трилистника водяного — 30 г, листья мяты перечной — 20 г, плоды кориандра — 20 г. № 2: цветки бессмертника, отделенные от остатков стеблей,— 40 г, трава тысячелистника, измельчанная,— 20 г, листья мяты перечной, измельченные,— 20 г, плоды кориандра — 20 г.

Приготовление обоих сборов к применению: столовую ложку заварить двумя стаканами кипятка, настоять 20 мин, процедить. Принимать по 0,5 стакана 3 раза в день за полчаса до еды,

СКУМПИЯ КОЖЕВЕННАЯ —

СОТ IN U S COGGYGRIA SCOP.

Относится к семейству Сумаховые — Anacardiaceae. Растет на Северном Кавказе, в Крыму, в Грузинской ССР и Азербайджанской ССР. Культивируется на Кавказе, в Крымской области и на юге европейской части РСФСР,

Листья скумпии кожевенной применяются в качестве сырья для получения медицинского танина, галловой кислоты и флакумина. Заготавливают сырье с начала цветения скумпии до созревания плодов, В листьях большое количество дубильных веществ, присутствуют флавоноиды (мпрцптрин, фустпн), эфирное масло и другие биологически активные вещества.

Лист скумпии —

Folium Colini coggygriae

Внешние признаки. Изломанные или реже цельные хрупкие листья с длинными черешками и перисто-нервным жилкованием. Длина цельных листьев от 3 до 12 см, ширина от 2 до 6 см. Листовые пластинки округлые или овальные, реже обратнояйцевидные, у вершины тупые или слегка выемчатые, у основания округлые, реже клиновидные. Край листа цельный, иногда с несколькими неглубокими волнистыми выемками; поверхность сверху голая, снизу (под лупой) слабоопушенная. На нижней стороне листа жилки сильно выдаются. Боковые жилки второго порядка в количестве 7—14 отходят от главной жилки под углом 50—90°. Жилки третьего порядка тонкие, отходят почти под прямым углом.

Пластинки листьев сверху зеленые, снизу — сизовато- веленые, иногда с красновато-фиолетовым или желтоватым оттенком; черешки и главные жилки светло-зеленые пли чаще с буровато-фиолетовым оттенком.

Количественное определение суммы флавонолов [25]. Около 1 г сырья, измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий 1 мм по ГОСТ 214—77, взвешивают с погрешностью не более 0,0002 г, помещают в плоскодонную колбу вместимостью 150—250 мл, прибавляют 100 мл 30 %-го этилового спирта, колбу присоединяют к обратному водяному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане 30 мин, периодически смывая частицы сырья со стенок встряхиванием смеси. Затем смесь отстаивают 10—15 мин п жидкость сливают через стеклянный фильтр ПОР 160 в мерную колбу вместимостью 200 мл. Извлечение повторяют еще раз указанным свыше способом, предварительно смыв частпцы сырья с фильтра 30%-м этиловым спиртом. После охлаждения полученного извлечения доводят объем раствора 30 %-м этиловым спиртом до метки (раствор А).

2 мл извлечения (раствор А) помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл 2%-го водного раст

вора хлорида алюминия и доводят объем дистиллированной водой до метки; через 30—40 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 451 нм в кювете с толщиной слоя 10 мл. Для сравнения применяют раствор, состоящий из 2 мл извлечения, 1 мл 3 %-го раствора уксусной кислоты и до 25 мл 30%-го спирта.

Содержание суммы флавонолов в процентах (XJ в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле v £-250000

" З80.о.(100 — Ь)«

где D — оптическая плотность испытуемого раствора; 380 —

ч С/

удельный показатель поглощения ЕХсм продукта взаимодействия мирицетина-3-рамнозида с хлоридом алюминия в дистиллированной воде при длине волны 415 нм; а — масса навески сырья, г; Ъ — влажность, %,

Флакумнн — Flacuminum

Созданный во ВНИИХТЛС препарат содержит сумму флавоноловых агликонов. Представляет собой зеленовато- желтый мелкокристаллический порошок со слабым специфическим запахом, слегка горького вкуса.

Контроль чистоты проводят хроматографическим методом, контролируя отсутствие флавоноидных гликозидов галловой кислоты и .танина,

Флавоноидные гликозиды. 0,05 мл (50 мкг) 0,1 %-го раствора препарата в 95 %--м спирте наносят микропипеткой на круг хроматографической бумаги марки «Ленинградская медленная» диаметром 10 см вокруг отверстия диаметром 0,5 см, расположенного в центре круга. В отверстие вставляют трубочку из той же хроматографической бумаги, свернутую в четыре слоя. Конец трубки опускают в помещенную в стеклянную камеру чашку Петри с 2%-м раствором уксусной кислоты и хроматографируют до прохождения фронта растворителя к концу круга. Хроматограмму сушат в сушильном шкафу при 100 °С в течение 15 мин, опрыскивают 10 %-м раствором сульфида алюминия (ГОСТ 3758—75), снова сушат в тех же условиях и рассматривают в УФ-свете при длине волны 360 нм. На хроматограмме должны отсутствовать другие зоны, кроме зоны препарата на линии старта.

Галловая кислота. Круг хроматографической бумаги марки «Ленинградская медленная» диаметром 10 см расчерчивают на четыре сектора, В центре круга вырезают

отверстие диаметром 0,5 см. 0,01 мл (150 мкг) 1,5%-го раствора препарата в метиловом спирте наносят микропипеткоц на один из секторов в точку, расположенную на расстоянии 1 см от центра круга. В сектор, расположенный рядом наносят указанным выше способом 0,01 мл (10 мкг) 0,1%-Го раствора галловой кпслоты в метиловом спирте. В отверстие вставляют трубочку из той же хроматографической бумаги свернутую в четыре слоя. Конец трубки опускают в помещенную в стеклянную камеру чашку Петри с 2%-м раствором уксусной кислоты и хроматографируют до прохождения фронта растворителя к концу круга. Хроматограмму сушат г, сушильном шкафу при 100 °С в течение 15 мин, опрыскивают 10 %-м водным раствором молибдата натрия и рассматривают при дневном свете. Не должно быть зоны, расположенной па уровне галловой кислоты.

Т а и и и. 0,03 мл (300 мкг) 1%-го раствора препарата в 95%-м спирте мнкропппеткон наносят на линию старта стеклянной пластинки размером 10x20 см с незакрепленным слоем селикагеля ИСК *. Пластинку с нанесенной пробой высушивают на воздухе 10 мин, помещают в камеру с системой растворителей бензол — метиловый спирт (8 : 2) и хроматографируют восходящим методом. После прохождения фронта растворителя к концу пластинки ее вынимают из камеры п опрыскивают 1%-м раствором железоаммонпевых квасцов. Не должно быть голубого или синего пятна вблизи лпипи старта.

* Приготовление пластпшш с тонким слоем сорбента по ГФ X (с. 807).

Количественное определение суммы флавоноидов [231. Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют при нагревании на водяной бане в 80 мл 95%-го спирта в мерной колбе лместнмостыо 100 мл и после охлаждения доводят объем 95%-м спиртом до метки. 10 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 4 мл реактива осаждения *, жидкость перемешивают стеклянной палочкой, которую затем промывают 5 мл 95%-го спирта. Пробирку выдерживают 30 мин в термостате или водяной бане при температуре 80 =£ 5 °С, извесь центрифугируют 7 мин с частотой вращепия 6 тыс. об/мин. Раствор над осадком полностью сливают, а осадок взмучивают с помощью той же палочки с 5 мл 4%-го раствора ацетата калия в 70 %-м спирте** н палочку промывают 15 мл этого же раствора. Взвесь центрифугируют, как указано выше, и промывную жидкость отбрасывают. Затем в центрифужную

Пробирку, промывая стенки пробирки, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты, взмучивают той же палочкой до полного растворения осадка, прибавляют 5 мл воды и оставляют па 10 мин для кристаллизации препарата. Содержимое центрифужной пробирки последовательно с помощью 80 мл воды количественно переносят в колбу вместимостью 250 мл, фильтруя через вату, смоченную водой. К фильтрату прибавляют 20 мл 10 %-го раствора ацетата калия, перемешивают, прибавляют 0,5 мл раствора кс.иленолового оранжевого и титруют 0,01 М раствором трилона Б *** (из микробюретки вместимостью 5 мл) до изменения красно-фиолетовой окраски на лимонно-желтую.

1 мл 0,01 М раствора трилона Б соответствует 0,001061 г суммы флавоноидов, которых в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 90,0 %.

* Реактив осаждения. 1,5 г ацетата свинца растворяют в смеси 50 мл 95%-го спирта с 10 г триэтаноламина (ТУ 6-02-916—74), раствор фильтруют через двойной фильтр (предварительно промытый таким же раствором ацетата свинца) в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем 95%-м спиртом до метки.

** 4%-й раствор ацетата калия в 70%-м спирте. 40 г ацетата калин, ч. д. а. (ГОСТ 5820—68), растворяют в 70%-м спирте в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора 70%-м спиртом до метки.

*** 0,01 М раствор трилона Б. а) Приготовление: 3,9 г трилояа Б, ч. д. а., растворяют в 250 мл воды, фильтруют в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки, б) Установка титра: около 0,3 г (точная навеска) металлического цинка (ГОСТ 3640—75) растворяют в 5 мл разведенной серной кислоты в мерной колбе вместимостью 500 мл и после растворения доводят объем водой до метки, 5 мл полученного раствора цинка отмеривают микробюрет- кой в колбу, содержащую 100 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора ксиленолового оранжевого и нейтрализуют по каплям 5 %-м раствором гидрокарбоната натрия до появления красно-фиолетовой окраски. Затем прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора **** и титруют (из микробюретки вместимостью 5 мл) 0,01 М раствором трилона Б до изменения красно-фиолетовой окраски на желтую.

Поправочный коэффициент К вычисляют но первому способу [ГФХ, с. 831]:

5-а

Я = 0,0006538-500-Г’

где а — навеска цинка, г; Г — объем израсходованного на титрование трилона Б, мл.

**** Ацетатный буферный раствор (pH 5,5). 60 г ацетата натрия растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 мл разведенной уксусной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

Вода должва выдерживать, кроме пробы, указанной в ГФ X, следующую пробу: к 100 мл воды прибавляют 10 мл ацетатного буферного Раствора и 0,5 мл раствора ксиленолового оранжевого. Окраска раст

вора должна быть желтая, но не розовая. Если вода данную пробу не выдерживает, ее перегоняют в стеклянном аппарате или кптиони- руют согласно указаниям ГФ X (с. 846). Все реактивы готовят на воде, удовлетворяющей указанным требованиям. Срок хранения реактивов 1 мес.

Фармакологические свойства и применение. Флакумин обладает желчегонными свойствами (оказывает холесназмо- литическое действие). По желчегонному эффекту он не уступает аллохолу и холеизиму. Препарат применяют внутрь за 30 мин до еды, 2—3 раза в день (взрослые по 0.02—0,04 г) в качестве желчегонного средства при 8аболеааниях печени и желчевыводящих путей, особенно при их дескинезии. Курс лечения продолжается 3—4 нед.

Флакумин выпускают по 0,02 г в таблетках, покрытых оболочкой, по 30 штук в байках. Препаратат хранят в сухом, защищенном от света месте по списку Б. Срок годности препарата и таблеток 3 года.

СТАЛЬНИК ПОЛЕВОЙ (ПАШЕННЫЙ)—

ONONIS ARVENS1S L.

Отйосится к семейству Бобовые — Fabaceae. Растет на Украине, Северном Кавказе и в Закавказье, в средней и южной частях РСФСР. Часто встречается в Восточной Грузии и Азербайджане. Культивируется на Украине. В медицинской практике используют корни стальника полевого для получения настойки. Сырье заготавливают осенью — с конца цветения до полного отмирания его надземных частей. Фармакологическое действие корней стальника обеспечивают и зофл а вопои ды, фенолкарбоновые кислоты, кумарини и тритерпеновый спирт оноцерин [133].

Применение стальника пашенного в народной медицине известно с глубокой древности. Диоскорид и Гален в I—II вв. до и. э. [410] применяли его как мочегонное и камперастворя- ющее средство. Греческий ученый Плиний рекомендовал корни стальника для выведения камней из мочевого пузыря, а свежие листья — для прижигания язв ротовой полости и лечения заболеваний кожи [427].

В народной медицине стальник рекомендуют применять при воспалении почек, мочевою пузыря, иочечно-каменной болезни, ревматизме, подагре, эпилепсии, экаеме и других кожных заболеваниях [288].

В научной медицине он начал использоваться с начала XX в. как мочеговное средство. У нас в стране начиная с 50 х годов стальник пашенный стал предметом изучения в

Институте фармакохимии АН ГССР, ВИЛРе, Ленинградском химико-фармацевтическом институте.

Проведенные исследования позволили установить диуретическое действие настойки, отвара корней стальника [269].

Корень стальника — Radix Ononidis

Внешние признаки. Сырье состоит из цельных или резанных вдоль кусков корней длиной до 40 см, юлщиной от 0,5 до 2,5 см. Корни цилиндрические, иногда угловатые или слегка сплюснутые, прямые или изогнутые, очень твердые, деревянистые. Поверхность корней продольно-бороздчатая; иробка местами отслаивается; излом волокнистый. Цвет корня с поверхности светло-коричневый, на изломе желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный; вкус сладковато-горьковатый, слегка вяжущий. Дробленое сырье — кусочки корней различной формы, проходящие сквозь сито с диаметром отверстий 7 мм по ГОСТ 214—77.

Качественные реакции на изофлавоноиды. Одну каплю извлечения, приготовленного для количественного определения, наносят капилляром на полоску хроматографической бумаги и просматривают в УФ-свете; наблюдается голубая флуоресценция, усиливающаяся при обработке пятна парами аммиака (изофлавоноиды).

Количественное определение изофлавоноидов [133]. От аналитической пробы, измельченной до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 10 мм ио ГОСТ 214—77, отбирают около 20 г сырья и измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм но ГОСТ 214—77.

Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую круглодонную колбу вместимостью 100 мл с притертой пробкой, приливают 40 мл 70%-го спирта, закрывают колбу пробкой и взвешивают (с точностью до 0,01 г.). Затем колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают содержимое колбы на водяной бане до кипения и поддерживают слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу вновь закрывают пробкой, взвешивают, убыль в массе восполняют 70 %-м спиртом и настаивают при периодическом взбалтывании в течение 1 ч. Затем извлечение фильтруют через сухой бумажный фильтр в сухую колбу вместимостью 50 мл. Отбирают пипеткой 0,5 мл фильтрата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 70 %-м спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на снектрофото-

метре при длине волны 2G0 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 70%-й спирт.

Соответственно оптической плотности находят по калибровочному графику количество изофлавоноидов в 1 мл испытуемого раствора.

Содержание изофлавоноидов в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

У С-40-100 Л = т-0,5-(100 — w)’:

где С — количество изофлавоноидов в 1 мл испытуемого раствора, найденное по калибровочному графику, мг; 40— объем 70 %-го спирта, взятый для извлечения изофлавоноидов, мл; т — масса сырья, г; 0,5 — объем фильтрата, взятый для получения испытуемого раствора, мл; w — потеря в массе при высушивании сырья, %.

. Построение калибровочного графика. 0,02 г (точная навеска) онопина-стандарта (ВФС 42-1238—82) растворяют в 70%-м спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл (исходный раствор). Отбирают по 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25; 0,3; 0,35; 0,4; 0,45; 0,5; 0,55; 0,6 мл приготовленного раствора в мерные колбы вместимостью 10 мл и доводят объемы растворов 70%-м спиртом до метки. Оптическую плотность растворов измеряют па спектрофотометре при длине волны 260 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения 70%-й спирт.

Для построения калибровочного графика по оси абсцисс откладывают количество ононина-стандарта в 1 мл спектрофотометрируемого раствора в миллиграммах, а по оси ординат — соответствующие значения оптической плотности:

Количество ис Количество ононина-стан
ходного раствора, дарта в 1 мл испытуемого
мл раствора, мг
0,05 0,001
0,10 0,002
0,15 0,003
0,20 0,004
0,25 0,005
0,30 0,006
0,35 0,007
0,40 0,008
0,45 0,009
0,50 0,010
0,55 0,011
0,60 0,012

Сырье стальника, упакованное в тюки по 50 кг и в мешки по 25—30 кг, хранят в сухом, хорошо проветриваемом помещении. Срок годности 2 года,

Настойка стальника — Tincture Ononidis

Прозрачная жидкость красно-бурого цвета, горького вкуса, своеобразного запаха.

Подлинность определяют по розовому окрашиванию препарата с одной каплей концентрированной серной кислоты (тритерпеновий спирт оноцерин) и по голубой флуоресценции капли препарата в УФ-свете на бумаге (изофлаво- ноиды).

Количественное определение пзофлавоноидов [133]. 2 мл (точная навеска) настойки помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 70 %-м спиртом до метки (раствор А). 10 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора тем же растворителем до метки (раствор Б). Измеряют оптическую плотность раствора Б па спектрофотометре при длине волны 2G0 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения 70%-й спирт. Соответственно оптической плотности по калибровочному графику * находят количество пзофлавоноидов в 1 мл раствора.

Содержание изофлавоноидов в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле

х _ С-100 — а 5

где С — количество изофлавоноидов в 1 мл, найденпое по калибровочному графику, мг; а — навеска, г.

Содержание суммы изофлавоноидов в препарате должно быть не менее 0,2 %.

* Построение калибровочного графика — см. раздел «Количественное определение изофлавоноидов в корне стальника».

Применяют настойку стальника при геморрое для нормализации стула (послабление) и уменьшения болей. Применяют препарат по чайной ложке 2—3 раза в день.

Выпускается во флаконах из оранжевого стекла по 100 мл и хранится в прохладном, защищенном от света месте. Срок годности 3 года.

В условиях аптек из корня стальника готовят водный отвар, для чего 30 г измельченных корней заливают 1 л воды, кипятят до получения 0,5 л отвара, фильтруют; принимают по 50 мл 3 раза в день перед едой в течение 2—4 нед.

СОФОРА ЯПОНСКАЯ —

SOPIlOllA JAPONICA L.

Относится к семейству Бобовые — Fabaceae. В СССР культивируется на кие европейской части СССР, в Закавказье и Средней Азии. В медицинской практике используют плоды и бутоны софоры японской в качестве сырья для получения настойки, рутина и кверцетина. Бутоны софоры японской заготавливают в конце бутонизации, когда на метелках развиваются крупные бутоны, а часть из них уже начинает распускаться. Плоды софоры собираюі в недозрелом состоянии. Для получения антисептического препарата — настойки используют плоды, а для получения капилляроукрепляющих препаратов — бутоны софоры японской.

Плоды софоры японской —

Fruetus Sophorae japonicae

Внешние признаки. Плоды бобов нераскрынающиеся, приплюснуто-цилиндрические, четковидные, многосемнн- ные, до 10 см длины, 0,5—1,0 см ширины, зеленовато-коричневые-, с хорошо заметным желтоватым швом. Семена темно-коричневые или почти черные, до 1 см длины, 0,4— 0,7 см ширины, большая часть семян недоразвита. Запах отсутствует, вкус горький.

Подлинность проверяют по цианидпновой реакции на фла- поноиды, а также хроматографически. Для этого в бумажный патрон из фильтровальной бумаги лабораторной по ГОСТ 12020—70 помещают 15 г сырья, измельченного до размера 0,3 мм, патрон с сырьем заключают в аппарат Сокслета, заливают 200 мл 96%-го спирта. Ведут исчерпывающую экстракцию на кипящей водяной бане в течение 10 ч (пять- шесть сливов). Вытяжку фильтруют через бумажный филыр в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора 90%-м спиртом до метки (раствор А).

1мл полученного извлечения и 9 мл 90 %-го спирта перемешивают. С помощью микронипетки наносят 0,002 — 0.004 мл раствора на стеклянную пластинку размером 4,5 X X 12 см с закрепленным слоем силикагеля марки КСК * или на пластинку типа «Силуфол» и хроматографируют в системе хлороформ —90%-й спирт—вода (05:35:2). После прохождения растворителя около 10 см хроматограмму вынимают и высушивают на воздухе 15 мин. В УФ-свете обнаруживаются три интна, наиболее темное интенсивное среднее пятно с R, 0,23 і 0,01 (дшликозид 7, 5, 3, 4'-тетраокснфла- вон) для спликагсля КСК или Rf 0,20 ± 0,01 для пластинки «Силуфол». При нагревании пластинок в точение 1—2 мин в сушильном шкафу темное пятно становится желтым.

К 1 мл раствора А прибавляют 1 мл концентрированной соляной кислоты, 0,1 г цинковой пыли. Смесь нагревают, появляется красное окрашивание (флавопы).

* Приготовление хроматографической пластинки. 0,1 г силикагеля марки КСК (с 5 % Сн8О4-0,5ІСО) [ГФ X, с. 807] размешивают с 3 мл воды, полученную массу равномерно наносят на пластинку размером 4,5x12 см и высушивают на воздухе в гечепие 20 ч (без активации).

Сотрудники Ташкентского фармацевтического института

X. X. Халматов и И. М. Ахмедходжаева предлагают оценивать качество сырья по дигликозиду тетраоксифлавона по следующей хроматоспектрофотометрической методике.

Количественное определение дигликозидя тетраоксифлавона. На хроматографическую бумагу марки «С» по ГОСТ 10395—75 наносят с помощью микропипетки вместимостью 0,1 мл 0,02 мл испытуемого раствора А в угол хроматографического листа размером 15x25 см на расстоянии 2—3 см от каждой стороны. Проводят двумерное хроматографирование спачала в системе бензол — метанол (8:2), подсушивают до удаления запахов растворителей, затем — в 10%-м водном растворе хлористого натрия.

Хроматограмму просматривают в УФ-свеге, отмечают первое от старта пятно, вырезают площадью на 1 см больше границ пятна, разрезают па мелкие полосы, помещают в склянки с притертыми пробками, прибавляют 5 мл дйметил- формамида и экстрагируют при постоянном встряхивании в течение часа, затем фильтруют и измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 352,5 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. Б качестве раствора сравнения применяют элгоат хроматографической бумаги такого же размера.

Содержание дигликозида 7,5,3,4'-тетраоксифлпвопа в процентах (X) на абсолютно сухую массу плодов софоры японской рассчитывают по формуле

v /с-Г>х-250-5-100 Х = 240-1/-а-(100 — Ь) ’

где Dx— оптическая плотность испытуемого раствора; V — объем испытуемого раствора, нанесенный на хроматограмму, мл; 250 — объем полученной настойки, мл; 5 — объем элю- ата, мл; а — навеска сырья; г; 240 — удельный показатель
поглощения дигликозида тетраоксифлавопа; к — инструментальная поправка на используемые кюветы и спектрофотометр по бихромату калия*; b — потеря в массе при высушивании, %.

Содержание дигликозида тетраоксифлавона в плодах софоры японской должно быть не менее 3,0 %.

* Приготовление раствора бихромата калия. Около 0,5000 г (точная навеска) бихромата калия [ГФ X, с. 8821 растворяют в 30 мл 0,005 М раствора серной кислоты ** в мерной колбе вместимостью 50 мл, доводят объем раствора тем же раствором до метки и перемешивают. К 2 мл полученного раствора прибавляют 8 мл 0,005 М раствора серной кислоты, перемешивают.

Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 352,5 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм на фоне 0,005 М раствора серной кислоты. Вычисляют экспериментальный удельный показатель поглощения бихромата калия по формуле

ri% 10 V.D

1СМ “ р-1 *

где р — навеска бихромата калия, г; У — объем 0,005 М раствора серной кислоты, мл; D — оптическая плотность раствора бихромата калия при длине волны 352,5 им; I — толщина слоя, равная 10 мм. Инструментальную поправку к вычисляют ио формуле

107 Е1% ’

‘ Г.СМ где 107 — удельный показатель поглощения бихромата калия при длине волны 352,5 нм. Раствор используют свежеприготовленным.

** Приготовление 0,005 М раствора серной кислоты. Кіл воды прибавляют 0,20 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Срок годности раствора месяц.

Плоды софоры японской, упакованные в двойные бумажные мешки по 30—40 кг, хранят на стеллажах в сухом проветриваемом помещении, тщательно оберегая от моли и других вредителей. Срок годности сырья 1 год.

Бутоны софоры японской —

Alabastra Sophorae japonicae

Внешние признаки. Бутоны продолговато-яйцевидные, от 3 до 7 мм длины (обычно 4—5 мм) и от 1,5 до 3 мм ширины; цветоножки от 0,5 до 4 мм длины, тонкие, легко обламывающиеся. Чашечка трубчатая с пятью короткими тупыми или слегка заостренными зубчиками, желтовато-зеленого цвета, опущенная (иод лупой), на отгибах опушение более выраже
но. Венчик находится на уровне чагнечки или несколько выступает над ней, бледно-желтого цвета. Запах слабый.

Качественные реакции на флаионоиды. 1 г намельченных бутонов софори заливают 10 мл 95%-го спирта, нагревают на водяной бане до кипения и настаивают 3—4 ч. Спиртовое извлечение фильтруют, упаривают до 2 мл, делят пополам и перепосят в две пробирки. В каждую пробирку прибавляют но три капли концентрированной соляной кислоты, в одну из пробирок прибавляют 0,03—0,05 г цинковой пыли и нагревают на водяной бане до кипения. При этом в пробирке с цинковой пылыо жидкость окрашивается в вишнево- красный цвет (флавоноиды). Окрашивание отчетливо заметно при сравнении испытуемого раствора с контрольным, т. е. без цинковой пыли.

Количественное определение рутина (методика разработана в Институте химии растительных веществ АН УзССР). 2 г (точная навеска) измельченного сырья (сито с размером отверстий 0,5 мм по ГОСТ 3924—47) помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 750—1000 мл, затем прибавляют 5 г кварцевого песка (песок нормальный для испытаний цементов по ГОСТ 0139—52, размер частиц 0,5 — 1,0 мм), 15 стеклянных шариков размером 5—10 мм, 150 мл метилового спирта и встряхивают 6 ч на вибрационном встря- хивателе, затем настаивают в течение 18 ч. Метанольное извлечение отфильтровывают через складчатый фильтр.

На стартовую линию хроматографической бумаги (марки «С», ГОСТ 10395—63) размером 14 X 55 см наносят микро- пипеткой 0,20 мл метаиольного извлечения. Хроматограмму подсушивают на воздухе в течение 5 мин и проводят хроматографирование нисходящим способом в системе 15%-й уксусной кислоты до тех пор, пока слой растворителя на бумаге не пройдет 30 см (3,5 ч). Хроматограмму подсушивают на воздухе до исчезновения запаха уксусной кислоты (3—4 ч) и просматривают в УФ-свете при 254 им. Рутин проявляется в виде желто-коричневого пятна с Rf около 0,70. Бумагу с пятном рутина вырезают, разрезают на мелкие кусочки, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, заливают 30 мл 60%-го метилового спирта и встряхивают 4 ч на вибрационном встряхивателе. Элюат отфильтровывают и измеряют его оптическую плотность на спектрофотометре при 358 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм по отношению к элю- ату (60%-й метиловый спирт)* с равной по площади бумаги, хроматографированной в тех же условиях без вещества.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина **.

Содержание рутина в сырье в процентах (X) вычисляют по формуло

у 0rНа хроматограмме 100 мкг кверцетина должны давать одно пятно при просмотре в УФ-свете (к = 360 нм).

Количественное определение кверцетина [28]. Около 0,1 г (точная навеска) препарата растворяют в горячем метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл, после охлаждения доводят объем раствора метиловым спиртом до метки.

5 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 4 мл реактива осаждения *, 5 мл воды, взвесь перемешивают стеклянной палочкой, которую затем промывают 5 мл метилового спирта. После 30-минутного отстаивания взвесь центрифугируют со скоростью 5—6 тыс. об/мин в течение 7 мин. Раствор пад осадком полностью сливают, а осадок взмучивают с помощью той же палочки с 15 мл 0,1%-го раствора ацетата натрия в метиловом спирте и палочку промывают 5 мл такого же раствора. Взвесь центрифугируют, как указано выше, промывную жидкость отбрасывают и операцию промывания осадка повторяют еще раз. Затем в центрифужную пробирку, промывая стенки, прибавляют 3 мл разведенной уксусной кислоты, взмучивают с помощью той же палочки до полного растворения осадка красного цвета, после чего прибавляют 5 мл воды и оставляют на 10 мин для кристаллизации кверцетина, Содержимое центрифужной пробирки последовательно С ПОМОЩЬЮ 80 мл воды количественно переносят в колбу для титрования, фильтруя через вату, смоченную водой. Фильтрат нейтрализуют 25 мл 5%-го раствора гидрокарбоната натрия, тщательно перемешивая, прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора **, 15 капель 0,1%-го раствора ксиле- нолового оранжевого и титруют из микропипетки вместимостью 5 мл 0,01 М раствором трилона Б *** до перехода красно-фиолетового окрашивания раствора в лимонножелтое.

1 мл 0,01 М раствора трилона Б соответствует 0,001209 г С15Н1007, которого в препарате должно быть не менее 97,5 %.

* Приготовление реактива осаждения. 1,5 г ацетата свинца (ГОСТ 1027—67) растворяют в 50 мл метилового спирта, раствор пропускают через двойной фильтр (предварительно промытый таким же раствором ацетата свинца) в мерную колбу вместимостью 100 мл, содержащую 10 г триэтиноламича по ТУ 6-02-916—74, и доводят объем раствора метиловым спиртом до метки.

** Приготовление ацетатного буферного раствора с pH 5,5. 60 г

ацетата натрия (ГОСТ 199—78) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 мл разведенпой уксуспой кислоты н доводят объем раствора водой до метки.

*** Приготовление 0,01 М раствора трилона Б. а) Приготовление: 3,9 г трилона Б, ч. д. а., растворяют в 250 мл воды, фильтруют н мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки, б) Установка титра: около 0,3 г (точная навеска) цинка (ГОСТ 3640—76) растворяют в 5 мл разведенной серной кислоты в мерной колбе вместимостью 400 мл, объем раствора доводит водой до метки.

В колбу, содержащую 100 мл воды, отмеривают микробюреткой 5 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл ксиленолового оранжевого и нейтрализуют по каплям 5%-м расгвором гидрокарбопата натрия до появления краспо-фиолетового окрашивания, затем прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора и титруют из микробюретки вместимостью 5 мл 0,01 М раствором трилоза Б до перехода краснофиолетового окрашивапия в желтое.

Поправочный коэффициент вычисляют по первому способу [ГФ X, с. 831].

5-а

Х ~~ 0,0006538• 500■ V’

где а — навеска цинка, г; Г — объем трилона Б, израсходованного па титрование, мл.

Вода должна выдерживать, кроме пробы, указанной в ГФ X, следующую пробу: к 100 мл воды прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора и 0,5 мл 0,1%-го раствора ксиленолового оранжевого; окраска раствора должпа быть желтая, ио не розовая.

Фармакологические свойства и применение. Препарат применяют при повышенной проницаемости и хрупкости капилляров при гипертонической болезни, атеросклерозе, ревматизме, гематологических, инфекционных и других заболеваниях.

Используют его при повреждении капилляров в лечении антикоагулянтами, мышьяком, висмутом, тиоцианатами, а также как вспомогательное и профилактическое средство при сосудистых осложнениях атеросклероза (инфаркт миокарда, инсульт, ретинопатии), при лучевой терапии и радиохирургическом методе лечения злокачественных новообразований. Противопоказания не установлены.

Принимают внутрь в таблетках но 0,02 г 3—5 раз в день. Дозы и продолжительность лечения индивидуализируются в зависимости от клинической картины. Курс лечения до 5—6 нед. Одновременно с кверцетином рекомендуется назначать аскорбиновую кислоту.

Выпускается кверцетин в таблетках по 0,02 г в стеклянных трубках по 20 штук. Хранится в герметически закупоренных склянках в защищенном от света месте. Срок годности препарата и таблеток 3 года.

Кверцетин входит также в состав разработанных во ВНИИХТЛС таблеток «Кверсалип» (Quersalinum), состоящих из кверцетина (0,02 г) и ацетилсалициловой кислоты (0,3 г). Применяются при остром ревматизме, полиартритах. Выпускается по 20 таблеток в стеклянных флаконах. Храниться препарат в сухом прохладном месте. Срок годности 2 года.

ЗВЕРОБОЯ ПРОДЫРЯВЛЕННЫЙ —

HYPERICUM PERFORATUM L.

Относится к семейству Зверобойные — Hyper їсасеае. Растет в европейской части СССР, на Кавказе, в Западной и Восточной Сибири, Средней Азии. В медицинской практике используют траву зверобоя в качестве вяжущего и антисептического средства, а также для производства настойки и антибактериального препарата новоимапин. Сырье заготавливают в фазу цветения растения.

Зверобой имеет сложный химический состав, включающий флавоноиды, производные антрахинона, оксикумарині»!, эфирные масла, жиры, аскорбиновую и никотиновую кислоты, холин, катехины, следы алкалоидов, оксикоричные кислоты и др. [51. Очевидно, наличие перечисленных ценных биологически активных веществ обеспечивает широкое применение этого растения и народной медицине в качестве противовоспалительного средства при лечении гнойных ран, ожогов, заболеваниях печени, почек, 13 старинной литературе зиб- робой называли «Ивановой кровью», так как при растирании его семян и цветов на пальцах остается красный сок. Немцы называли его «чертогоном», полагая что он изгоняет чертей и домовых, или «божественной травой от ран», а в Италии — «пупочной травой». В России в 1770 г. А. Т. Болотовым 1331 было описано ботаническое строение зверобоя продырявленного, его географическое распространение и способы приготовления лекарств: зверобойного масла, отрарон, настоек. Автор указывает, что «...при случае всех свежих ран, уязвлений, конвульсий, ожогов и тому подобных повреждений ничто не может быть полезнее как для внутреннего, так и наружного употребления сей травы и лекарств, из ней составленных... потому и употребляется она в числе знаменит- нейших веществ при составлении многих бальзамов от ран».

По данным сотрудников Института ботаники АН ТССР и ВНИИХТЛС 1125], в Узбекистане, наряду со зверобоем обыкновенным, два вида этого рода — зверобой шероховатый (Hypericum scluibrum) и зверобой удлиненный (Н. elvn- gatum L. )— имеют один и тот же состав биологически активных веществ. По результатам проведенных исследований, зверобой шероховатый и зверобой удлиненный, запасы которых значительны в Узбекистане и Туркмении, рекомендованы для применения в медицинской практике наряду со зверобоем обыкновенным.

Трава зверобоя — Ilerba Іїурегісі

Внешние признаки. Стебли облиственные с цветками, бутонами и отчасти с недозрелыми плодами. Стебли супротивно ветвистые, цилиндрические с двумя продольными ребрами, голые, до 30 см длины. Листья сидячие, супротивные, 0,7—3,5 см длины, до 1,4 см ширины, голые, цельнокрайние, продолговатые с притупленной верхушкой, с многочисленными вместилищами, просвечивающими в виде светлых точек. Стебли и листья матоао-зеленого цвета. Цветки собраны в щитковидную метелку. Чашечка сростнолистная, глубокопятираздельная, лопасти ланцетовидные, тонкозаостренные. Венчик раздельнолепестной, в 2—3 раза длиннее чашечки, пять золотисто-желтых лепестков с бурыми пятнами, с неровным краем. Много тычинок, сросшихся у основания нитями в три пучка. Пестик один с верхней яйцевидной трехгиездной завязью и тремя отогнутыми кнаружи столбиками. Плод — трехгнездная многосемяннш коробочка^ при созревании буреющая, Семена мелкие, цилиндрические, темно коричневые, мелкоячеистые. Запах слабый, ароматный; вкус горьковатый, слегка вяжущий. Резаное сырье — кусочки листьев, стеблей, цветков и незрелых плодов размером от 0,5 до 8 мм.

К сырью зверобоя продырявленного возможны примеси других растений. Зверобой пятнистый — Hypericum та- culatum Crantz. Стебель четырехгранный, полый. Чашелистики тупые. Зверобой жестковолосый (шершавый) — Hypericum hirsutum L. Стебли без продольных ребер; чашелистики (иод луной) с железистыми ресничками. Зверобой изящный — Hypericum elegaris Steph. Стебли с двумя тонкими продольными ребрами, чашелистики ланцетовидные, по краю тонкодлиннозубчатые с черными железками па концах зубчиков.

Л. Я. Сиренко и И. Г. Левашова предлагают стандартизировать сырье по содержанию суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид-стандарт снектрофотометрическим методом но следующей методике.

10 г сырья помещают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл с обратным холодильником, добавляют 200 мл 80%-го этанола и нагревают в течение часа на водяной бане. Спиртовий экстракт отфильтровывают и упаривают под вакуумом до 10—15 мл, переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора 80%-м этанолом до метки (раствор А), предварительно обработав водный остаток хлороформом.

0,1 мл раствора А переносят в колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 3 мл 2%-го раствора хлорида алюминия и доводят объем раствора 96%-м этанолом до метки. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения состоит из 0,1 мл раствора А, помещенного в колбу вместимостью 25 мл и доведенного 9(3 %-м этанолом до метки.

Содержание флавоноидов в процентах (А) рассчитывают по формуле

у 1°°

*

где а — количество гнперозида-стандарта, найденное по калибровочному графику, г; Ьг — навеска сырья; Vx — объем экстракта, мл; Ь2 — количество миллилитров, взятых для определения; V., — объем, н котором проводят спектрофотометрическое определение. Содержание суммы флавоноидов в исследуемых образцах составляет Зд5—3,9 %,

Построение калибровочного графика. 0,25 г (точная навеска) пшерознда-стандарта (ВФС 42-1088—81), предварительно высушенного до постоянной массы, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют в 90%-м етаноле. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора 96%-м етанолом до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора содержит 0,0025 г гиперозида-стандарта.

В мерные колбы вместимостью 25 мл помещают 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 мл раствора гиперозида-стандарта, 15 мл 0,5%-го раствора хлорида алюминия и доводят объем раствора 90%-м етанолом до метки. Измеряют оптическую плотность приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствором сравнения служит 0,5%-й раствор хлорида с 96%-м этанолом. Проводят пять параллельных определений, результаты обрабатывают методом наименьших квадратов. При построении калибровочного графика на оси ординат откладывают величину оптической плотности, а на оси абсцисс — содержание гиперозида-стандарта в 1 мл снектрофотометрируемого раствора.

Сырье зверобоя, упакованное в тюки по 50 кг, хранится на стеллажах, в сухих хорошо проветриваемых помещениях. Срок годности 3 года.

Новоиманин — Novoimaninum

Разработанный в Институте микробиологии и вирусологии АН УССР новоиманин представляет собой смолистую красновато-желтую массу с приятным специфическим запахом. Антимикробное действие проверяют биологическим методом на культуре золотистого стафилококка. Антибактериальным титром препарата считается то последнее раз- ведение новоиманина, при котором через 18 ч мясо-пептон- ный бульон остается прозрачным. Минимальным допустимым титром активности является разведение 1:1 000000 (1 мкг/мл).

Фармакологическое действие и применение. Действует преимущественно на грамположительные микробы, в том числе на стафилококки, устойчивые к пенициллину. Применяется наружно при лечении абсцессов, флегмон, инфицированных ран, ожогов. При абсцедирующих пневмониях и пиопневмотораксе используют ингаляции в виде аэрозолей 0,1%-го раствора новоиманина на 10%-м растворе глюкозы.

В отоларингологии при гнойных отитах, гайморитах применяют 0,01—0,1 %-е растворы, полученные путем разведения спиртового раствора стерильной дистиллированной водой.

Выпускается 1%-й спиртовый раствор во флаконах из оранжевого стекла по 10 мл. Хранится по списку Б, в защищенном от света месте при температуре не выше 10 °С.

Срок годности препарата 3 года, 1%-го спиртовою раствора — 2 года. Растворы, полученные путем разведения 1%-го спиртового раствора новоиманина, пригодны для применения в течение 24 ч.

Настойка зверобоя — Tinctura Hyperici

Прозрачная жидкость красновато-бурого цвета.

Количественное определение дубильных веществ. 5 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл 40%-го спирта и доводят объем раствора водой до метки. 5 мл полученного раствора помещают в коническую колбу вместимостью 1 л, прибавляют 750 мл воды, перемешивают и титруют 0,1 н. раствором перманганата калия до перехода окраски от синей через сине-зеленую в желтую (индикатор — индигокармин). Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. раствора перманганата калия соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин, которых в препарате должно быть не менее 1 %.

Применяется как вяжущее и противовоспалительное средство в стоматологии. Внутрь назначают по 40—50 капель

3— 4 раза в день, для полосканий — по 30—40 капель на полстакана воды.

Выпускается во флаконах по 25 и 50 мл. Хранится в защищенном от света месте. Срок годности 4 года,

<< | >>
Источник: Георгиевский В. П., Комиссаренко II. Ф., Дмитрук С. Е.. Биологически активные вещества лекарственных растс- ний/Георгиевский В. П., Комиссаренко II. Ф., Дмитрук С. Е.—Новосибирск: Наука, Сиб, отд-ние,1990. 1990
Помощь с написанием учебных работ

Еще по теме Глава 8. РАСТЕНИЯ И ПРЕПАРАТЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ФЛАВОНОИДЫ:

  1. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ФЛАВОНОИДЫ
  2. Реферат. Лекарственные растения, содержащие лигнаны2017, 2017
  3. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КСАНТОНЫ
  4. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КУМАРИНЫ И ХРОМОНЫ
  5. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ЧИСТЫЕ ГОРЕЧИ
  6. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АРОМАТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ
  7. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КАРОТИНОИДЫ (ПРОВИТАМИНЫ А)
  8. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ НАФТОХИНОНЫ (ВИТАМИН К)
  9. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ГИДРОЛИЗУЕМЫЕ ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА
  10. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ СТЕРОИДНЫЕ САПОНИНЫ
  11. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ЛИГНАНЫ
  12. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АСКОРБИНОВУЮ КИСЛОТУ (ВИТАМИН С)
  13. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ФИТОЭКДИЗОНЫ
  14. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АНТРАЦЕНПРОИЗВОДНЫЕ
  15. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КАРДИОГЛИКОЗИДЫ
  16. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ СЕСКВИТЕРПЕНОИДЫ
  17. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ТИОГДИКОЗИДЫ
  18. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ СЛИЗИ