<<
>>

Глава 9. РАСТЕНИЯ II ПРЕПАРАТЫ,СОДЕРЖАЩИЕ КАРДИОСТЕРОИДЫ

Несмотря па то, что арсенал лекарственных препаратов, применяемых при сердечной недостаточности, велик, лишь кардиостероидные препараты способны оказывать благоприятный и более длительный эффект. Очевидно, поэтому

кардиостеропдные препараты не теряют своего значения на протяжении почти двух столетий и остаются незаменимыми.

В СССР работами коллективов ВНИИХТЛС (г. Харьков), Института химии растительных веществ АН УзССР (г. Ташкент), Всесоюзного института лекарственных растений (г. Москва), Института фармакохимии им. И. Г. Кута- тсладзе (г. Тбилиси) проведены глубокие исследования кар- донолидов и буфадиенолидов, которые легли в основу технологических методов производства лекарственных препаратов, содержащих сердечные гликозиды.

Химиками, фармакологами и аналитиками перечисленных школ проведены фундаментальные исследования кардиостероидов различных видов наперстянки (Digitalis purpurea L., D. lanata Elirh., D. ierruginea L.), желтушника (Erysimum canescens Roth, E. cheiranthoides L. и др.), ландыша (Convallaria majalis L., C.. transcaucasica Utkin, C. Keiskei Mig.), горицвета (Adonis amurensis Regol, A. sibiricus Patrin ex Ledeb., A. turcestanica (Korsh.) Adolf, и др.), вязеля (Coronilla viminales L., C. juncea L., C. scorpioides (L.) Koch.), строфанта (Strophanthus gratus, 5. Kombe Oliver), олеандра (Nerium oleander L.), джута длиннонлодного (Cor- chorum olitorius L.), xapra кустарникового (Comphoraepus fru- ticosus L.) R.), морозника (Helleborus purpurascens Waldst. et Kit.) и др.

Из перечисленных растений в настоящее время выделено и установлено строение свыше 400 сердечных гликозидов П86, 187]. Как отмечалось в гл. 1, все сердечные гликозиды являются сложными органическими соединениями, расщепляющимися при гидролизе на агликоны (генины) и сахара.

Выбор сердечнош гликозида для терапии обусловлен не только его активностью, но и быстротой наступления эффекта и продолжительностью действия, что, в свою очередь, связано с физико-химическими свойствами гликозида и способом его введения.

Сердечные гликозиды по физико-химическим свойствам разделяют па две группы: полярные (гидрофильные) и неполярные (гидрофобные).

В организме человека сердечные гликозиды претерпевают различные превращения. Полярные гликозиды (строфантин, конваллятоксин, препарат коргликон) малораство- римы в липидах п плохо всасываются в желудочно-кишечном тракте, не связываются с альбуминами крови. Эго способствует быстрому выделению их с мочой.

Примепяют эти гликозиды парентерально (внутривенно). Эффект действия при этом развивается через 5—10 мин и

достигает максимума через 25—30 мин. Период биологического полувыделеиия из плазмы крови составляет 23 ч. Полностью действие прекращается через 2—3 дня.

Неполярные гликозиды (дигитоксин) легко растворимы в липидах, быстро связываются с белками крови. Дигитоксин прочно фиксируется в печени, подвергается при этом гидроксилированию и ферментативному отщеплению сахарного компонента.

Выделение дигитоксина из организма происходит под влиянием ферментов печени, где свободные агликоны взаимодействуют с глюкуроновой и серной кислотами с образованием малоактивных соединений [186]. Медленное протекание этих процессов является основной причиной длительной циркуляции дигитоксина и его метаболитов в крови. Другая причина медленного выделения неполярных гликозидов из организма — образование прочных химических связей с сывороточными альбуминами, что препятствует фильтрации гликозидов через почечные клубочки и выделению с мочой [56].

Так как неполярные гликозиды всасываются и не разрушаются в желудочно-кишечном тракте, они достаточно эффективны при приеме внутрь. Действие начинает проявляться через 2—4 ч и достигает максимума через 8—12 ч. Период полувыделеиия в среднем 5 дней, действие прекращается полностью через 14—21 день.

Некоторые гликозиды, например дигоксин, занимают промежуточное положение между наиболее полярным (строфантин) и неполярным (дигитоксин), хорошо всасываются в желудочно-кишечном тракте и относительно мало связываются с белками плазмы, поэтому, подобно строфантину, оказывают быстрый эффект при внутривенном введении — через 5—20 мин, а при приеме внутрь — через 20—30 мип.

Все сердечные гликозиды после всасывания и поступления в кровь фиксируются в тканях, в том числе в сердечной мышце, что приводит к накоплению препарата в организме. Наиболее кумулятивным эффектом за счет образования прочных связей с белками обладают дигитоксин, затем ацетил- дигитокснн, целанид, дигоксин. Относительно малый кумулятивный эффект у препаратов группы строфантина (строфантин К, строфантидин ацетат, коргликоп, адонизид).

Выбор препарата и способа введения обусловлен показаниями. На вопрос, какой из препаратов сердечных гликозидов является лучшим, авторы монографии «Сердечные гликозиды» Б. Е. Вотчал и М. Е. Слуцкий [56] отвечают: «Лучшим является тот сердечный гликозид, свойства которого (и положительные и отрицательные) хорошо известны врачу и которыми врач может оперировать достаточно осторожно и без излишней боязни. Это, однако, не означает, что все виды сердечной недостаточности можно лечить одним и тем же препаратом. Большое разнообразие клинических форм сер- дечпой недостаточности и индивидуальная реактивность, с одной стороны, различные терапевтические свойства сердечных гликозидов — с другой, должны учитываться при выборе препарата».

Поэтому при острой сердечно-сосудистой недостаточности и внезапно возникшей декомпенсации, когда необходима немедленная помощь, показаны препараты строфантина (строфантин К, коргликон), а при сердечной недостаточности с выраженной синусовой тахикардией или мерцательной аритмией — инъекции целанида. При хронической сердечной недостаточности, а также для поддерживающей терапии после устранения явлений острой сердечно-сосудистой недостаточности применяют дигитоксин, гитоксин, дигоксин, ацетилдигоксин, а при недостаточной сердечной деятельности (умеренной степени) и при вегетативно-сосудистых неврозах — препараты горицвета (адонизид, кардиовален).

«Для успешного лечения вполне достаточно иметь небольшое количество (по одному-два из каждой группы)^ препаратов сердечных гликовидов. Остальное зависит от искусства врача. Применяя достаточно смелую и не шаблонную тактику, можно добиться не только лучших результатов, но и более быстрого эффекта в неотложных случаях сердечной недостаточности» [50].

Очевидно, исходя из этой фразы можно в какой-то мере объяснить тот факт, что за последнее десятилетие из Государственного реестра лекарственных средств СССР исключены многие препараты: адонизид, гитален, гомфотин, кон- валлятоксин, корезид, корельборин, корнерин, строфанта настойка, К-строфантин-р, таблетки листьев наперстянки (0,05 г), цимарин, нериолин, олиторизид, экстракт ландыша сухой (1 : 2), экстракт наперстянки сухой, эризимин, эри- зимозид.

На январь 1986 г. Государственным реестром лекарственных средств СССР разрешены к применению в стране препараты разных видов наперстянок — дигитоксин, гитоксин, кордигит, дигоксин, целанид, ацетилдигоксин, лантозпд, дигален-нео; травы горицвета — адонизид сухой, экстракт горицвета, кардиовален, таблетки «Адонис-бром»; строфанта — строфантин К, строфантидина ацетат; ландыша — коргликон, настойка ландыша, капли ландышево-пустырни- ковые; желтушника — кардиовален.

Активпость кардиотонпческих препаратов, содержащпх сердечные гликолиды, оценикается биологическим методом па лягушках, кошках и голубях. По требоиапию Государственной фармакопеи СССР, одна лягушиная единица действия (ЛЕД) соответствует дозе стандартного препарата, вызывающего в определенных условиях опыта систолическую остановку сердца у большинства подопытных стандартных лягушек. Под одной кошачьей (КЕД) или голубиной (ГЕД) единицей действия подразумевают дозу стандартного препарата из расчета на 1 кг массы тела, вызывающую остановку сердца кошки или голубя.

На характеристике некоторых лекарственных препаратов, лекарственных растений — сырья для их создания, контроле стандартизации и применении остановимся подробнее.

НАПЕРСТЯНКА ПУРПУРОВАЯ —

1DIGITALIS PURPUREA L.

Относится к семейству Норичниковые — Scrophiilaria- "сеае. В СССР культивируется на Северном Кавказе, Украине и в Молдавии. В медицинской практике используют лист наперстянки пурпуровой в качестве сырья для получения порошка, настоя, сухого экстракта, препаратов дигнток- син, гитокоип, кордигит, которые показаны при хронической сердечной недостаточности. Сырье заготавливают в период от начала цветения дос плодоношений (июль — сентябрь). Фармакологические свойства наперстянки пурпуровой определяют сердечные гликозиды (лигитоксин, дигито- нин, гитоксин, пурпуреагликозиды А и В и др.), стероидные сапонины, флавопопды и другие биологически активные вещества.

Интересна история введения этого растения в медицинскую практику. В народной медицине оно применялось в 500—1200 гг. как рвотное средство. Впервые описал наперстянку, дав ей латинское название Digitalis purpurea, Леонард Фуш в 1542 г. в своем учебнике по ботанике «De historia spirpimn». Началом введения наперстянки в медицинскую практику можно считать 1785 г., когда английский ботаник, физиолог и врач Уаптерпнг опубликовал брошюру «Сообщение о наперстянке и о некоторых лечебных сторонах ее действия: заметки из практики при лечении отеков и некоторых других заболеваний». Характеризуя действие наперстянки, он писал: «Эта трава имеет также действие на сердце, какое не свойственно ни одному из существующих у нас средств. И ото действие может быть обращено к пользе больного». Не менее важная заслуга автора — стандартизация приготовленных листьев наперстянки, что позволило рекомендовать ему определенную схему дигитализации.

У нас в стране применение наперстянки описано в рукописи С. А. Рейха «О пользе Digitalis purpurea при водянке», из которой стало известно, что изучение лечебного эффекта наперстянки в России датируется 80-ми годами XVIII столетия.

Лечение «наперстяночиой травой» с большим количеством наблюдений над дозировками проведено С. П. Боткиным 140], который считал ее ценнейшим из имеющихся в нашем распоряжении лекарственных средств.

Попытки изолировать активное начало наперстянки в чистом виде предпринимались в начале XIX столетия, однако лишь в 1809 г. Пати нел-лем выделен первый кристаллический гликозид, названный «дигиталином», а в 1875 г. Шмидебергом был приготовлен из листьев наперстянки пурпурной гликозидный ирепарат, названный дигитоксином.

Б настоящее время установлено, что первичные (или ген- уинные) гликозиды, присутствующие в листьях наперстянки, в результате аутоферментативного гидролиза, т. е. посредством ферментов гликозидаз, содержащихся в самом растении, переходят во вторичные гликозиды, являющиеся действующими веществами нрепаратов наперстянки.

Лист наперстянки — Folium Digitalis

Внешние признаки. Листья продолговато-яйцевидной или яйцевидно-ланцетной формы, край нерапномерногород- чатый. Прикорневые листья с длинными крылатыми черешками, стеблевые — от короткочерешковых до сидячих. Листья ломкие, морщинистые, сверху темно-зеленые, снизу сероватые от обилия волосков, имеющихся по всей пластинке, с характерной і устой сеткой сильно выступающих мелких разветвлений жилок. Длина от 10 до 30 мм и более, ширина до 11 см. Запах сухих листьев слабый, резко усиливается при настаивании в горячей воде. Резаное сырье — кусочки листьев различной формы размером от 1 до 8 мм.

Государственная фармакопея СССР разрешает к применению наравне с наперстянкой пурпуровой наперстянку крупноцветковую (Digitalis grandiflnra Mill.) того же семейства, произрастающую в лесах Урала, прилегающих к нему районах Западной Сибири, на Северном Кавказе, в Карпатах, предгорьях Алтая.

Внешние признаки. Листья ланцетовидные или удлиненноланцетовидные, с острой верхушкой с редкомелкопильчатым краем; прикорневые и нижние стеблевые листья суживаются постепенно в короткий широкий крылатый черешок, верхние — сидячие. Только центральная и боковые жилки первого порядка выступают с нижней Поверхности (не образуя сетки) и только эти жилки опушены. Длина листа до 30 см, ширина до 6 см. Цвет зеленый с обеих сторон. Запах слабый, нередко усиливается при настаивании в горячей воде.

Фармакологическая активность сырья определяется биологическим методом. 1 г листа наперстянки должен содержать 50-66 ЛЕД или 10,3—12,6 КЕД.

Количественное содержание дигитоксина и гитоксина в листьях наперстяпки пурпуровой можно определить хроматоспектрофотометрическим методом по следующей методике.

Количественное определение дигитоксина и гитоксина в ферментированных листьях наперстянки [91]. Около 3 г (точная навеска) порошка листьев наперстянки (0,25— 0,5 мм) помещают в колбу вместимостью 150 мл, приливают 30 мл воды, 3 капли толуола и оставляют на 2 сут для ферментации. Затем в колбу приливают 70 мл этилового спирта, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают 15 мин на кипящей водяной бане. Далее выдерживают при комнатной температуре 15 мин, охлаждают и фильтруют через двойной слой марли. Процесс экстрагировании повторяют еще раз с 30 мл 70%-го этилового спирта. Сырье в колбе и на марле промывают 70%-м спиртом 2 раза по 15 мл. Объединенные извлечения упаривают под вакуумом (до 80— 90 мл). Затем к извлечению приливают 25 мл 15%-го раствора ацетата свинца и центрифугируют в течение 5 мин при 5000 об/мин, осадок промывают 15 мл воды с последующим центрифугированием.

Из очищенного экстракта гликозиды извлекают хлороформом (4 раза по 40 мл) при взбалтывании в течение 3 мин и 1 раз смесью хлороформа с этиловым спиртом (3 : 1). Извлечения последовательно фильтруют через бумажный фильтр с безводным сульфатом натрия (5 г). Объединенные извлечения отгоняют досуха. Остаток растворяют в 4 мл смеси метанол — хлороформ (1:1) и используют для хро- мато графическо го р а з де л єни я.

Лист хроматографической бумаги размером 18x50 см, разделенный прорезями на семь полос по 2,5 см шириной, пропитывают 20%-м раствором формамида в этиловом спир

те п течение 5 мин, отжимают между листами фильтровальной бумаги и оставляют на воздухе 30 мин. Затем на линию старта пяти полос при помощи микропипетки наносят по 0,03—0,04 мл анализируемого раствора в виде сплошной линии на протяжении 2 см, на шестую полосу наносят по 0,05 мл 1%-го раствора дигитоксина и гитоксина (1 : 1), а седьмую полосу оставляют для контроля. Место нанесения извлечения осторожно при помощи капилляра смачивают 20%-м раствором формампда в этиловом спирте. Хроматографирование проводят восходящим способом в смеси метил- этилкегон — ксилол (1 : 1), насыщенной формамидом, в течение 2,5 ч.

После того как фропт растворителей пройдет 30 см, хроматограмму вынимают из камеры, сушат 20 мин на воздухе. Затем от нее отрезают две полосы, на одну из которых наносят анализируемый раствор, а на вторую — сумму дигитоксина и гитоксина. Полосы высушивают над электроплиткой до прекращения выделения паров формамида, опрыскивают смесью из 15 мл 25%-го раствора трихлор- уксусной кислоты в этиловом спирте и 1 мл свежеприготовленного 3%-го водного раствора хлорамина. Полоски снова нагревают при 80 °С в течение 5 мин, просматривают в УФ- свеге и отмечают границы пятен дигитоксина и гитоксина на обеих полосах. Пятно дигитоксина имеет желтую флуоресценцию. R/ около 0,6±0,07, пятно гитоксина обнаруживает голубую флуоресценцию, Rf 0,26 ±0,07. Из непроявленных полос хроматограммы вырезают участки, лежащие против пятен дигитоксина и гитоксина на проявленных полосах. Вырезанные участки сушат при температуре 105 °С в течение 10 мин, помещают в сухие пробирки, заливают 10 мл свежеприготовленного ксаптгидролового реактива (10—15 мг ксанггидрола в 100 мл смеси ледяной уксусной и концентрированной соляной кислот, 99 : 1), пробирки закрывают тампоном из гигроскопической ваты и помещают в термостат на 20 мин ири температуре 60 °С. Затем пробирки помещают в ледяную воду на 5 мин, выдерживают 10 мин при комнатной температуре и определяют оптическую плотность при 535 нм на спектрофотометре в кюветах с толщиной слоя 1 см. Нулевую точку прибора устанавливают по элюатам из участков контрольной полосы, соответствующих по размерам участкам, содержащим дигитоксин и гитоксин. По калибровочному графику определяют содержание дигитоксина и гитоксина.

Методика количественного определения диги гоксипа и гитоксина в сухпх листьях наперстянки отличается тем, чго опускается стадия ферментации. При обработке получеп- пых результатои методом математической статистики найдено, что относительная погрешность метода не превышает 5 %. По разработанной методике проанализировано несколько образцов сырья и установлено, что в листьях отечественной наперстянки содержится дигитоксина от 0,015 до 0,040 %, гитоксина — от 0,015 до 0,0.15 %. После ферментации количество дигитоксина увеличивается от 0,080 до 0,140 % и гитоксина — от 0,070 до 0,130 %. Это объясняется ферментативным гидролизом пурпуреагликозида А до дигитоксина и пурпуреагликозида В до гитоксина.

Хранится в аптеках цельное и резаное сырье по списку Б в жестянках или банках, порошок — в маленьких, предварительно высушенных при 60—70 °С, доверху наполненных, плотно закупоренных и залитых парафином банках или в запаянных ампулах из оранжевого стекла. Каждая банка или ампула должна быть снабжена этикеткой, указывающей число единиц действия в 1 г и массу в граммах, которая по активности эквивалентна 1 г стандартизованного порошка наперстянки. На складах цельное сырье хранят в тюках, резаное—в мешках, порошок — в двойных бумажных пакетах (внутренний пергаментный). Биологическая активность листьев наперстянки контролируется ежегодно.

Дигитоксин — Digitoxinum

Гликозид, получаемый из различных видов наперстянки. Представляет собой белый кристаллический порошок, практически нерастворимый в воде, мало растворимый в спирте, трудно растворимый в хлороформе, очень мало растворимый в эфире. Технология получения препарата разработана во ВНИИХТЛС.

Подлинность. К раствору 1—2 мг препарата в 1 мл 95%- го спирта прибавляют 1 мл раствора нитропруссида натрия и 1—2 капли раствора едкого натра; появляется постепенно исчезающее красное окрашивание.

К раствору 1—2 мг препарата в 1 мл 95%-го спирта прибавляют 1 мл 1%-го спиртового раствора ж-динитробензо- ла и 2 капли раствора едкого натра; появляется постепенно исчезающее красно-фиолетовое окрашивание.

1—2 мг препарата растворяют в 2 мл ледяной уксусной кислоты, содержащей 0,05 % хлорида окисного железа. Полученный раствор осторожно по стенке вливают в пробирку с 2 мл концентрированной серной кислоты; на границе двух

слоев появляется бурое окрашивание. Верхний слой постепенно окрашивается в сине-зеленый или синий цвет.

Примеси других гликозидов контролируют хроматографией в тонком слое силикагеля — пластины «Силуфол» в смеси 96%-й этанол — хлороформ (1 : 1).

Количественное определение дигитоксина можно осуществить хроматоспектрофотометрическим методом [220J: около 0,02 г (точная навеска) дигитоксина растворяют в смеси 96%-й этанол — хлороформ (1 : 1) в мерной колбе вместимостью 100 мл и после полного растворения доводят обком раствора той же смесыо до метки.

В четыре точки на пластинке «Силуфол» размером 15 X ХІ5 см наносят полученный раствор но 0,12 мл. В пятую точку наносят 0,12 мл 0,02%-го раствора дигитоксина-стан- дарта и хроматографируют восходящим способом в системе растворителей хлороформ — ацетон (1:1) до прохождения растворителей до края пластинки. Полоску со стандартом дигитоксина отрезают и проявляют 1%-м раствором ванилина в 10%-м растворе хлорной кислоты, подогревая 5— 10 мин в сушильном шкафу при температуре 70—80 °С. Проявленную полоску соединяют с пластинкой и отмечают зоны с дигитоксином. Затем отмеченные зоны соскабливают и элюируют 5 мл 70%-го этанола в течение 30 мин.

К 3 мл полученного элюата прибавляют 2,5 мл нейтрального раствора пикриновой кислоты и 0,5 мл 2%-го раствора едкого натра. Через 15 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора дигитоксина-стандарта с помощью фотоэлектроколориметра при длине волны около 490 им в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Раствором сравнения служит смесь, состоящая из 3 мл 70%-го спирта, 2,5 мл нейтрального раствора пикриновой кислоты и 0,5 мл 2%-го раствора едкого натра.

Содержание дигитоксина в порошке в процентах (X) вычисляют по формуле

v С-0.0002-100-100

А D -а ’

о

где D — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 —■ оптическая плотность раствора дигитоксина-стандарта; а — навеска препарата, г. Содержание дигитоксина в препарате должно быть не менее 97 %. Относительная ошибка определения при доверительной вероятности 0,95 не превышает ^4,5 %.

Приготовление раствора дигитоксина-стандарта: 0,0200 г (точная навеска) дигитоксина-стандарта (ВОЗ) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют в 90 мл

смеси 96 %-й етанол — хлороформ (1:1). После полного растворения доводят объем раствора той же смесью до метки. 1 мл раствора содержит 0,0002 г дигитоксина-стандарта.

Фармакологические свойства и применение. Дигитоксин является наиболее активным гликозндом наперстянки, обладающим сильным кардиотоническим действием. Он значительно увеличивает силу сокращения мышцы сердца и замедляет частоту сердечных сокращений; препарат действует длительно, обладает выраженными кумулятивными свойствами, быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта.

Под влиянием дигитоксина у больных отмечается значительное уменьшение признаков недостаточности кровообращения или полное их исчезновение и улучшение общего самочувствия. Препарат применяется при хронической сердечной недостаточности с нарушением кровообращения II и III степени во всех случаях, показанных для лечения наперстянкой.

Дигитоксин принимают внутрь по 1—2 таблетки 2—3 раза в день, с уменьшением в последующие 3—5 дней до 1 — 1/2 таблетки 1—2 раза в день. Применение больших доз (5—6 таблеток в день) допустимо только у больных, не принимавших в течение ближайшей недели препараты группы наперстянки.

Длительность приема препарата и его оптимальная поддерживающая доза определяются врачом в каждом отдельном случае.

При проявлении побочных явлений (боли в области сердца, резкое замедление пульса, бигеминня, тошнота) необходимо временно прекратить прием препарата или уменьшить его дозу.

Механизм действия дигитоксина и всех сердечных глико- зидов проявляется в их сниженном влиянии на биоэнергетику миокарда [60]. Малые дозы препаратов повышают содержание катехоламинов в миокарде, стимулируют Na+- и К+- насос и оказывают положительный монотропный эффект. При увеличении дозы гликозидов угнетаются Na+-Kv- АТФаза сарколемм и Na+- и К+-насос, активируется транс- сарколемпая система обмена Na+—Са2+. В связи с чем повышается поступление в клетки ионов Са, что приводит к дальнейшему положительному ионотропному эффекту.

Дигитоксин выпускается в таблетках по 0,1 мг (0,0001 г) и в виде свечей по 0,00015 г гликозида (для больных с явлениями диспепсии или застоя в системе воротной вены). Хранится препарат по списку А в сухом, защищенном от света месте. Срок годности таблеток 3 года, свечей — 1,5 года.


Препарат, созданный по ВНИИХТЛС, представляет собой сумму гликозидов наперстянки пурпуровой. По внешнему виду это слегка желтоватый аморфный порошок, трудно растворимый в воде, легко — в спирте.

Подлинность. Полосу хроматографической бумаги марки «Ленинградская С» по ГОСТ 10395—75 (15x45 см), нарезанной поперек волокна, пропитывают в течение 5 мип 20%-м раствором формамида в метиловом спирте, отжимают между листами фильтровальной бумаги и сушат на воздухе 15 мин при комнатной температуре.

На линию старта наносят 0,04 мл (40 мкг) 0,1 %-го спиртохлороформного раствора (1 : 9) препарата. Хроматографируют восходящим методом в камере со смесью растворителей ксилол — метилэтил — кетон (1:1), насыщенной фор- мамидом, до тех пор, пока расстояние от фронта растворителя до верхнего края бумаги не будет составлять 15 см. Хроматограмму вынимают из камеры, сушат в сушильном шкафу при 120 °С в течение часа. Высушенную хроматограмму опрыскивают смесью растворителей, состоящей из 15 объемов 25 %-го раствора трихлоруксусной кислоты в спирте * и одного объема свежеприготовленного 3%-го раствора хлорамина **.

Хроматограмму высушивают в течение 5 мин при 80° С и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 360 нм. При этом обнаруживают пять пятен, соответствующих дигитоксину с Rf 0,6+0,04; гиталлоксину с /?/ 0,46+0,04; гитоксину с Rf 0,25+0,04; веродоксипу с Rf 0,15±0,04 и отроспезиду с Rf 0,06±0,04.

На хроматограмме могут обнаруживаться дополнительные пятна с Rf 0,65+0,04 (дпгитоксигенин) и 0,3+0,04 (ги- токсигенин).

* Приготовление 25%-го раствора трихлоруксусной кислоты в спирте. 25 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют при взбалтывании в 70 мл 95%-го спирта, после растворения доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки.

** Приготовление 3%-го раствора хлорамина Б. 3 г хлорамина Б растворяют в 100 мл воды. Раствор должен быть свежеприготовленным.

Количественное определение суммы гликозидов. Около 0,01 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 95%-м спирте и доводят объем раствора 90%-м спиртом до метки (раствор А).

15 мл раствора Л помещают В мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки (раствор Б). К 5 мл раствора Б прибавляют 5 мл раствора пикрата натрия* и через 10 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 495 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 5 мл 95%-го спирта и 5 мл раствора пикрата натрия.

Содержание суммы гликозидов в пересчете на дигиток- син в процентах (X) вычисляют по формуле

v C-Pj-Fg-100-100

Х = V2-V4-JI-1 000 000 (100 — а) *

где С — количество дигитоксина, найденное по калибровочному графику, мкг; Fj — объем раствора Б, мл; Уа — объем раствора Б, взятый для определения, мл; VH — объем раствора А, мл; У4 — объем раствора А, взятый для приготовления раствора Б, мл; Н — навеска препарата, г; а — потеря массы при высушивании, %.

Содержание суммы гликозидов в пересчете на сухое вещество должно быть 70,0—85,0 %.

* Приготовление раствора пикрата натрия. В мерпую колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл растаора едкого натра и доводят объем раствора 1%-м раствором пикриновой кислоты ** до метки. Раствор пикрата ннртия применяют свежеприготовлен в ым.

** Приготовление 1%-го раствора пикриновой кислоты. 10,0 г пикриновой кислоты (точная навеска) в пересчете на сухое вещество помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 900 мл воды, растворяют при частом взбалтывании и нагревают на кипящей водяной бане, доводит объем раствора водой до метки. Сохраняют в защищенном от света месте. Срок годности раствора 6 мес.

Построение калибровочного графика. 0,02 г (точная навеска) дигитоксина (ГФ X, с. 221 ], высушенного при 100— 105 °С до постоянной массы, растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 95%-м спирте и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки (раствор А). В мерные колбы вместимостью 50 мл отмеривают 2,5; 5,0, 7,5, 10,0, 12,5, 15,0, 17,5, 20,0, 22,5 мл раствора А и доводят объем раствора 95%-м спиртом до метки.

В колбы вместимостью 50 мл отмеривают по 5 мл каждого раствора и по 5 мл раствора пикрата натрия. Спустя 10 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 495 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм, В качестве раствора сравнения применяют раствор, состоящий из 5 мл 95%-го спирта и 5 мл раствора пикрата натрия.

По полученным данным строят калибровочный график откладывая на оси ординат оптическую плотность и на оси абсцисс концентрацию растворов, выраженную в микрограммах дигитоксина.

Биологическую активность препарата определяют биологическим методом [ГФ X, с. 917].

Для биологической оценки препарата на кошках 0.02 г препарата растворяют в 10 мл 95%-го спирта и доводят объем раствора 0,9 %-м раствором хлорида натрия до 200 мл (1:15 000). Для биологической оценки препарата на лягушках 0,01 г препарата растворяют в 1 мл 95%-го спирта и доводят объем раствора водой до 20 мл (1 : 2000).

1 г препарата должен содержать 6000—8000 ЛЕД или 800-1200 КЕД.

Фармакологические свойства и применение. Клинические наблюдения показали, что применение кордигита больными с нарушенным кровообращением способствует урежению пульса, уменьшению частоты дыхания, уменьшению отеков, повышению диуреза, сокращению границ сердца и печени, ослаблению других симптомов декомпенсации. Он показан во всех случаях применения наперстянки, особенно при митральных пороках и мерцательной аритмии.

Кроме того, кордигит дает прекрасные результаты при сердечных заболеваниях, осложненных инфарктом в легком, при заболеваниях миокарда, различных формах' пневмонии с явлениями сердечной недостаточности, при astma mixte, базедовой болезни с явлениями сердечной декомпенсации.

Противопоказан препарат в случаях острых эндокардитов. Применение его должно быть ограничено у больных с аортальными пороками и аневризмой аорты.

При правильной дозировке (2—4 раза в день по 0,0004) пи кумулятивного, ни токсического действия не оказывает. Ввиду отсутствия кумулятивных свойств препарат может применяться длительно, по потребности, установленной врачом. Большие дозы могут перейти во вторую или третью степень токсического действия дигиталиса. Выпускается кор- -дигит в виде таблеток с содержанпем гликозида по 0,0008 г, что по своей активности соответствует 0,1 г стандартных листьев наперстянки. Биологическая активность каждой серии кордигита ежегодно проверяется на кошках и лягушках. Хранится препарат по списку А в защищенном от света месте. Срок годности 3 года.

Свечи с кордигитом — Suppositoria cum Cord ig і to

Каждая свеча содержит 0,008 пли 0,0012 г кордигита. Применяют свечи с кордигитом при лечении хронической недостаточности кровообращения, преимущественно у больных с явлениями диспепсии или застоя в системе воротной вены. Свечу с кордигитом вводят в прямую кишку 1—2 раза в день.

После получения терапевтического эффекта в качестве поддерживающей дозы назначают по одной свече в день. Ввиду небольших кумулятивных свойств препарат может применяться длительно. Выбор дозировки определяется врачом в зависимости от возраста и состояния больного. Противопоказания в применении данной лекарственной формы кордигита такие же, как для других препаратов наперстянки. Хранятся свечи с кордигитом по списку Б, в сухом, защищенном от света месте. Срок годности 2 года.

НАПЕРСТЯНКА ШЕРСТИСТАЯ —

DIGITALIS LA NAT A EI1RH.

Относится к семейству Норичниковые — Scrophnlaria- сеае. В СССР культивируется на Украине, Северном Кавказе, в Молдавии. В медицинской практике используются листья в качестве сырья для получения препаратов дигок- снна, целанида, ацетилдигоксина и лантозида. Сырье заготавливают в фазе развитой розетки. Фармакологические свойства сырья обеспечивают сердечные гликозиды — диги- ланиды (ланатозиды) А, В, С, D, Е; дигитоксин, дигоксин; стероидные гликозиды — дигитонин, тигонпн, а также холин, ацетилхолнн. В процессе высушивания и хранения листьев наперстянки шерстистой происходит гидролитическое расщепление первичных гликозпдов. Дигиланид (лан- тозид) А и В переходит соответственно в дигитоксин и гиток- снн, а дигиланид (лантозид) С переходит в новый гликозид — дигоксин. Препараты наперстянки шерстистой применяются при острой и хронической недостаточности кровообращения 1—III степени, вызванной атеросклеротическим кардиосклерозом, гипертонической болезнью, при тахисистолической и тахиаритмической формах мерцания предсердий.

Лист наперстянки шерстистой Folium Digitalis lanati

Внешние признаки. Листья плотные, слегка кожистые, продолговато-ланцетные, туповатые или заостренные, обычно цельнокрайние, реже по краю листа слегка волнистые или с несколькими мелкими зубчиками, с ясно заметной главной и тремя-четырьмя боковыми жилками, длиной 6— 12 (20) см, шириной 1,5—3,5 см. Поверхность листьев голая, с верхней стороны блестящая. Цвет — сверху зеленый, сни- ву — светло-зеленый, жилки желтовато-бурые, у основания листе часто красновато-лиловые. Запах слабый, своеобразный. Вкус не определяется — ядовито. Резаное сырье — кусочки листьев различной формы, размером от 1 до 8 мм.

Биологическая активность сырья, предназначенного для получения лантозида, определяется биологическим методом. 1 г листьев должен содержать не менее 100 ЛЕД [ГФ X, с. 918].

Сырье, предназначенное для получения целанида, анализируется химическим методом.

Количественное определение суммы дигиланидов А, В, С. 5 г (с точностью до 0,01 г) измельченных до размера частиц 1—3 мм (сито № 30 ГОСТ 214—57) листьев заливают 50 мл 80%-го (по объему) метилового спирта и встряхивают в течение часа. Извлечение отфильтровывают и отбирают,40 мл фильтрата, что соответствует 4 г сырья. Полученное извлечение упаривают до удаления метилового спирта на водяной бане при 50 °С под вакуумом (по начала вспенивания раствора) и обрабатывают в делительной воронке четыреххлористым углеродом по 10 мл 4 раза. Из обработанного таким образом раствора глнкозиды извлекают смесью хлороформа с изопропиловым спиртом (в соотношении 3:1 по объему) по 10 мл 3 раза, взбалтывая по 5 мин. Извлечение собирают в коническую колбу вместимостью 50 мл, обезвоживают 2 г безводного сульфата натрия и фильтруют; сульфат натрия на фильтре промывают 5 мл такой же смеси с изопропиловым спиртом, которые присоединяют к фильтрату.

Извлечение отгоняют досуха под вакуумом на водяной бане при температуре не более 50 °С. Сухой остаток количественно переносят в калиброванную колбу вместимостью 1 мл с помощью смеси хлороформа и метилового спирта в соотношении 1 : 1 (по объему) и полученный раствор хроматографируют на бумаге нисходящим способом, как описано ниже.

0 В, П. Георгиевский, Н, ф, Комиссаренко, С, Е. Дмитрун


Лист хроматографической бумаги марки «Ленинградская С» размером 16x50 см размечают вдоль на четыре равные полосы по 4 см шириной; на расстоянии 10 см от верхнего края бумаги отмечают стартовую линию. Затем бумагу протягивают 10 раз через 30%-й раствор (по объему) фор- мамида в метиловом спирте, отжимают между листами фильтровальной бумаги и подсушивают на воздухе 15—20 мин. На линии старта в точки, расположенные в центрах полос, наносят: на первую полосу — 0,01 мл раствора со «евпдете- телями» (см. ниже), на две другие — исследуемый раствор по 0,01—0,02 мл в каждую точку (50—100 мг суммы диги- ланидов); четвертую полосу оставляют чистой (контроль). Затем бумагу помещают в камеру и хроматографируют нисходящим способом в течение 4—6 ч, не давая фронту растворителей дойти до конца полосы. В качестве подвижной фазы растворителей используют смесь хлороформ — дпок- сан — « бутиловый спирт (7:2: 0,5), насыщенную форма- мидом. Хроматографирование проводят при постоянной температуре в темном месте. По истечении указанного времени хроматограмму вынимают из камеры, карандашом отмечают линию фронта, сушат на воздухе 15—20 мин, затем в сушильном или вакуум-суншльном шкафу при 120 СС в течение 30 мин.

Сухую хроматограмму разрезают на отдельные полосы по линиям, обозначенным ранее карандашом. Контрольную полосу со «свидетелями» и одиу полосу с исследуемым раствором опрыскивают или смачивают свежеприготовленным 25%-м раствором трихлоруксуспой кислоты в хлороформе, содержащем хлорамин Т (0,2 г хлорамина Т в 100 мл раствора трихлоруксуспой кислоты). После этого полосу сушат 1 —2 мии на воздухе, затем 5 мин при 120 °С (лучше в ва- куум-сушильыом шкафу) и наблюдают свечение пятен в ультрафиолетовом свете, отмечая границы пятен на полосе карандашом. Дигиланид А имеет значение Rf около 0,79 и желто-зеленую флуоресценцию, дигилаппд В — Rf около 0,55 и голубовато-зеленую флуоресценцию н дигиланид С — Rf около 0,39 и голубую флуоресценцию.

Проявленную полосу с исследуемым веществом прикладывают к непроявлеиным полосам с исследуемым веществом так, чтобы линии старта совпали. Затем из непроявлеиных полос вырезают участки, расположенные против зон каждого из дигиланидов А, В п С, измеряют каждый участок и обозначают карандашом номер анализа и букву дигилани- да. Недостающую до 4x8 см площадь каждого участка дополняют обрезками бумаги от контрольной полосы,

Полученные с дпгиланпдами участки бумаги помещают по отдельности в пробирки (2x20 см) и заливают каждую 10 мл свежеприготовленного ксантгидролового реактива. Параллельно вырезают из контрольной полосы участок бумаги такого же размера и заливают 10 мл того же реактива. Пробирки закрывают ватными тампонами, выдерживают при 60 °С в течение 1 ч в водяной бане или в сушильном шкафу, затем охлаждают холодной водой 5 мин и оставляют стоять на 30 мин при комнатной температуре. После этого растворы колорпметрируют на ФЭК-М против воды в кюветах с толщиной слоя 10 мм, обязательно закрытых крышками с зеленым светофильтром (максимум около 512 нм). Отсчеты проводят по правому барабану. Нулевую точку находят по раствору с контрольной бумажкой (правый светофильтр) против воды (левый светофильтр). По Калибровочному графику определяют концентрацию дигиланида в миллиграммах в 1 мл колорпметрируемого раствора. Содержание каждого дигиланида в сырье в процентах (X) вычисляют по формуле

( у fl'C* 6

Л ~ e-~d-i0 000’

где а — количество дигиланида в 1 мл колорпметрируемого раствора, найденного по калибровочному графику, мг; b — общий объем колорпметрируемого раствора, мл; с — общий объем раствора, приготовленного для хроматографирования, мл; d — количество раствора, наносимого на хроматограмму, мл; е — навеска в пересчете на абсолютно сухое сырье, г.

Содержание суммы дигпланпдов А, В и С в абсолютно сухом сырье должно быть не менее 0,1 %.

Построение калибровочного графика. 0,025 г (точная навеска) цоланпда-стандарта помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в смеси * (1:1) метилового спирта и хлороформа (стандартный раствор). Хроматографическую бумагу марки «Ленинградская С» размером 16 X Х50 см готовят, как указано в разделе «Количественное определение», помещают ее в хроматографическую камеру и дают пройти растворителям до момента их стенания с бумаги. После этого бумагу вынимают из камеры, сушат сначала на воздухе 20 мин, затем 30 мин при 120 °С (лучше в вакуум- сушильном шкафу)**. После просушкп бумагу разрезают на полосы размером 4x8 см, на которые по отдельности наносят раствор стандарта *** в количествах 0,01, 0,05, 0,10, 0,12 мл, что соответствует содержанию 1, 5, 10 и 12 мкг в 1 мл колорпметрируемого раствора целаїшда-стапдарта (ФС 42-990—75). Полосы бумаги просушивают на воздухе, помещают по отдельности в пробирки (2x20 см) и заливают каждую 10 мл свежеприготовленного ксантгидролового реактива. Одновременно заливают полосу бумаги такого же размера, но без вещества (контрольный опыт)'1"1"1'. Далее поступают, как описано в «Количественном определении». Полученные значения оптических плотностей откладывают по оси ординат, а на оси абсцисс — концентрацию целанида-стан- дарта в мпкрограммах в 1 мл колориметрируемого раствора.

* Приготовление реактивов и растворов. Смесь растворителей для хроматографирования готовят тю ГФ X (с. 800).

** Особое внимание следует обратить на удаление паров форма- мида при сушке хроматограммы, так как присутствие следов форма- мида в колорпметрируемых растворах приводит к ослаблению интенсивности их окраски.

*** Приготовление раствора дигилаиндов («свидетелей») для хроматографии. Около 0,005 г абицпна (дигиланидов А, В, С) растворяют в 1 мл смеси хлороформа и метанола в соотношении 1 : 1 (по объему) в мерном цилиндре с притертой пробкой и хранят в темном месте при комнатной температуре.

**** Контрольный раствор для установления нулевой точки фото- влектроколориметра следует делать для каждой хроматограммы.

Листья наперстянки шерстистой, упакованные в мешки по 20—25 кг или в тюки по 50 кг, хранятся по списку Б, в сухом, хорошо проветриваемом помещении. Активность листьев наперстянки шерстистой, используемых для получения лантозида, контролируется ежегодно,

Дигоксин — Digoxinuin

Созданный во ВНИИХТЛС на основе гликозида, содержащегося в листьях наперстянки шерстистой, препарат дп- гоксин представляет собой белый кристаллический порошок, практически нерастворимый в поде, малорастворимый в спирте.

Качество контролируется следующими основными показателями. Удельный показатель поглощения с пикратом натрия — ^}см от 215 до 230 при длине 495 нм.

Удельный показатель поглощения с ксантгидроловым реактивом — Е\ см от 680 до 740 при длине волны 535 нм [ГФ X, с. 779]. Удельное вращение — от 10,5 до 13,5° (2 %-го раствора в пиридине). Пиридин перед приготовлением раствора перегоняют, собирая фракцию, кипящую при 115 °С.

Примеси других глпкозидов: 0,01 г препарата растворяют в 100 мл смеси хлороформа и 95%-го спирта (1 : 1). 0,03 мл полученного раствора (3 мкг) мпкропипеткой наносят на линию старта полоски среднефпльтрующей бумаги для хро

матографии размером 15x45 см, нарезанной поперек волокон. После нанесения основного вещества, данное пятно смачивают 20%-м раствором формамида в метиловом спирте. Бумагу предварительно пропитывают 20%-м раствором формамида в метиловом спирте в течение 5 мин, отжимают между листами фильтровальной бумаги и сушат на воздухе 15 мин при комнатной температуре.

Хроматографируют восходящим методом в камере со смесью растворителей ксилол — метил эти лкетон (1 : 1), насыщенной формамидом, до тех пор, пока фронт растворителей пройдет до 30 см. Хроматограмму вынимают из камеры, сушат при температуре 120 °С в течение 1 ч.

Высушенную хроматограмму опрыскивают смесью из 15 объемов 25%-го раствора трнхлоруксусной кислоты в 95 %-м спирте и одного объема свежеприготовленного 3%-го водного раствора хлорамина Б. Затем хроматограмму снова высушивают при температуре 120 СС в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 360 нм. Должно появиться одно пятно, флуоресцирующее голубым цветом с величиной Rt около 0,17.

Количественное определение дигоксина. Препарат должен иметь активность, установленную биологическим методом и выраженную в единицах действия (КЕД, ГЕД). Биологическую активность препарата оиределяют на кошках и голубях по методу Государственной фармакопеи СССР X издания (с. 921, 924).

Для биологического испытания 0,01 г препарата растворяют в 10 мл 95%-го спирта, получая исходный раствор 1 : 1000.

Для испытания на кошках исходный раствор дигоксина доводят изотоническим 0,9 %-м раствором хлорида натрия до концентрации 1 : 100 000. Длительность наблюдения 60— 120 мин. Количество КЕД в 1 г препарата определяют по формуле


где К — разведение испытуемого препарата; т — масса животного, кг; а — доза разведенного препарата, мл.

Для испытания на голубях исходный раствор дигитоксп- на разводят изотоническим 0,9 %-м раствором хлорида натрия до концентрации 1 : 30 000.

Длительность наблюдения 65—95 мин. Количество ГЕД в 1 г препарата определяют по той же формуле.

1 г препарата должен соответствовать 3277—4347 КЕД и 1950-2СО0 ГЕД.

Фармакологическое действие и применение. Обладает значительным систолическим действием, относительно сильно замедляет сердечный ритм. По сравнению с дпгитоксином имеет меньшую способность к кумуляции в организме, оказывая также сильный диуретический эффект. За счет меньшего, чем у дигитоксина, связывания с белками сыворотки крови приближается в этом отношении к строфантину [88].

Хорошая всасываемость при приеме внутрь позволяет проявить кардиотонический эффект через 1—2 ч и достичь максимума в течение 8 ч. Назначают препарат при хронической недостаточности кровообращения I—II А и И Б степени, а также при трихиаритмпческой форме мерцания предсердий, пароксизмальной мерцательной аритмии, пароксизмальной суправентрикулярной тахикардии. Противопоказан дигоксин при блоквдах сердца и интокепкозе ранее применявшимся препаратом наперстянки.

Выпускается препарат в таблетках по 0,00025 г (таблетки для детей по 0,0001 г) и ампулах по 10 мл 0,025 %. Хранится препарат и лекарственные формы по списку А, в защищенном от света месте. Срок годности препарата и таблеток для' взрослых — 5 лет, таблеток для детей — 4 года, ампульного раствора — 3 года,

Лантозид — Lantosidum

Новогаленовый препарат, содержащий сумму гликозп- дов наперстянки шерстистой. Представляет собой прозрачную жидкость от желто-зеленого до зеленого цвета.

Активность препарата определяют биологическим методом. 1 мл препарата должен содержать 9—12 ЛЕД или 1,5-1,6 КЕД.

Применяется при хронической недостаточности кровообращения I—III степени, сопровождающейся тахикардией, тахиаритмией и мерцанием предсердий.

Выпускается в банках из оранжевого стекла по 15 мл. Хранится препарат по списку В в прохладном, защищенном от света месте. Срок годности контролируется ежегодно.

Целанид — Celanidum

Препарат создан во Всесоюзном научно-исследовательском институте лекарственных растений из наперстянки шерстистой и представляет собой бесцветный нлн белый кристаллический порошок без запаха.

Контроль чистоты препарата проводят хроматографией на бумаге по следующей методике. 5 мг препарата растворяют в 1 мл смеси хлороформа и метилового спирта (I : 1). С помощью микропнпеткй 0,025 мл полученного раствора наносят на линию старта на полосе быстрофильтрующей бумаги для хроматографии (16x50 см), предварительно пропитанной 30%-м расгвором формамида в метиловом спирте, отжатой между листами фильтровальной бумаги и подсушенной на воздухе в течение 15—20 мин. Бумагу помещают в камеру п хроматографируют нисходящим способом 3—4 ч, не давая фронту растворителей дойти до конца полосы. В качестве подвижной фазы растворителей используют смесь хлороформ — дноксан — «бутиловый спирт (7:2: 0,5), насыщенную формамндом. Хроматограмму вынимают из камеры, подсушивают на воздухе 15—20 мин, затем сушат в сушильном пли вакуум-су шильном шкафу 30 мин при 120 °С. Сухую хроматограмму опрыскивают или смачивают свежеприготовленным 25%-м раствором трихлоруксусной кислоты в хлороформе, содержащим хлорамин Б (0,2 г хлорамина Б в 100 мл раствора трихлоруксусной кислоты). Затем хроматограмму вновь выдерживают 5 мйп в сушильном шкафу при 120 °С, вынимают из шкафа и просматривают в ультрафиолетовом свете.

На хроматограмме должно быть отчетливо видно синее пятно целанида с Rf около 0,39. Допускается сине-голубое пятно ланатозида D с Rf около 0,17; не должны обнаруживаться пятна других глнкозидов.

Потеря в массе при высушивании. Около 0,2 г препарата (точная навеска) сушат в вакуум-эксикаторе над пятиокисью фосфора в течение 24 ч. Потеря в массе не должна превышать

7,5 %. Сульфатная зола из 0,2 г препарата должпа быть невесомой.

Количественное определение целанида. Около 0,025 г препарата (точная навеска) растворяют в смеси- хлороформа н метилового спирта (1 : 1) в мерной колбе вместимостью 5 мл.

Полосу быстрофильтрующей бумаги для хроматографии (16x50 см) размечают вдоль на четыре равные полосы но 4 см шириной каждая, хорошо пропитывают в 30 %-м (по объему) растворе формамида в метиловом спирте, отжимают между листами фильтровальной бумаги и подсушивают па воздухе 15—20 мин. На линию старта, отстоящую на 10—12 см узкого края полосы бумаги, в три точки, расположенные в центрах полос, наносят по 0,02 мл испытуемого раствора; четвертую полосу оставляют как контрольную, Хроматограмму помещают в камеру* и хроматографируют, как указано выше (см. «Посторонние гликозиды»). Высушенную хроматограмму разрезают вдоль на отдельные полосы по линиям, обозначенным заранее. Первую из исследуемых полос протягивают в фарфоровой чашке через описанный выше раствор проявителя. После этого полосу сушат 1—2 мин на воздухе, затем в сушильном или в вакуум-сушильном шкафу** при температуре 120 °С и паблюдают свечение пятен в ультрафиолетовом свете, отмечая на полосе карандашом границы пятен.

Проявленную полосу с исследуемым веществом прикладывают к другим (пепроявленпым) полосам так, чтобы линии старта совпали. Затем вырезают из полос с исследуемым веществом отмеченные участки размером 8x4 см, расположенные против зоны целанида. При необходимости недостающую площадь участка дополняют обрезками бумаги от контрольной полосы. Участки бумаги с целанидом помещают в пробирки 2x20 см и заливают 10 мл свежеприготовленного ксантгидролового реактива. Одновременно вырезают из контрольной *** полосы участок бумаги такого же размера и заливают 10 мл того же реактива. Пробирки помещают в водяную баню (или сушильный шкаф) при 00 °С на 1 ч, ватем охлаждают холодной водой 5 мин и оставляют на 30 мин при комнатной температуре, после чего растворы колориметри- руют против воды с зеленым светофильтром (максимум около 512 нм) в кюветах с толщиной слон 1 см, обязательно закрытых крышками. Нулевую точку паходят но раствору с контрольной бумажкой против воды. По калибровочному графику определяют концентрацию целанида в микрограммах и 1 мл колориметрируемого раствора.

Содержание целанида в процентах (X) вычисляют по формуле

v а-Ь-е ■ “ с-сМОООО *

где а — количество целанида в 1 мл колориметрируемого раствора, найденного по калибровочному графику, мкг; b — объем колориметрируемого раствора, мл; с — количество раствора, Понесенного на хроматограмму, мл; d — навеска целанида в пересчете на сухое вещество, г; е — объем испытуемого раствора, мл. Содержание С,9И7вОго должно быть 95,0—105,0 % в пересчете на сухое вещество.

Для построепин калибровочного графика готовят стандартный раствор, для чего 0,025 г (точная навеска) специально приготовленного стандартного образца целанида помешд-

ют в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в смеси хлороформа и метилового спирта (1 : 1).‘

Описанным выше способом, по без нанесения вещества, готовят контрольную хроматограмму, помещают в камеру, прогоняют растворители и высушивают. Высушенную хроматограмму разрезают на полосы размером 8x4 см, наносят раствор стандартного образца в количестве 0,01; 0,05, 0,10, 0,12 мл, что соответствует 1; 5; 10 и 12 мкг целанида в 1 мл колориметрируемого раствора. Полосы бумаги просушивают на воздухе, помещают по отдельности в пробирки и заливают каждую 10 мл свежеприготовленного ксантгидролового реактива. Далее поступают, как описано в ходе количественного определения.

При построении калибровочного графика на оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси абсцисс — концентрацию целанида в микрограммах в 1 мл колориметрируемого раствора.

* Смесь растворителей для хроматографирования. В делительную воронку вместимостью 250 мл помещают 70 мл хлороформа, 20 мл ди- оксана, 5 мл н-бутнлового спирта и около 10 мл формамида. Смесь тщательно встряхивают 10 мин и оставляют расслаиваться па 18— 20 ч. Нижний слой (подвижная фаза) отделяют и помещают в кювету для нисходящей хроматографии.

** Особое внимание нужно обратить на удаление паров формамида при сушке хроматограммы, так как присутствие следов формамида в колориметрируемых растворах приводит к ослаблению интенсивности их окраски.

*** Контрольный раствор установления нулевой точки фото- олектроколориметра делать для каждой хроматограммы.

Небольшое количество подвижной фазы наливают в стаканчик и помещают на дно камеры для насыщения парами смеси растворителей в течение 20—24 ч. Хроматографирование проводят при постоянной температуре в темном месте.

Биологическую активность препарата определяют биологическим методом. 1 г препарата должен содержать 14 000-16000 ЛЕД пли 3200-3800 КЕД.

Фармакологическое действие и применение. Действует аналогично другим препаратам наперстянки. Обладает относительно небольшим кумулятивным эффектом. При внутреннем введении по скорости действия близок к строфантину, оказывая более сильное брадпкардическое действие. Назначают целапид при острой и хронической недостаточности кровообращения II и III стеиени, тахисистолической форме мерцания предсердий, суправентрикулярной форме пароксизмальной тахикардии. Противопоказания, как и для других гликозыдов наперстянки.

Выпускается в таблетках по 0,0002 г, 0,05 %-й раствор во флаконах по 10 мл, 0,02%-й раствор в ампулах по 1 мл. Хранится препарат и его лекарственные формы но списку А, в защищенном от света месте. Срок годности препарата — 3 года, таблеток и раствора — 2 года, ампульного раствора — 1 год.

СТРОФАНТ КОМКЕ -

STROPHANTUS КОМВЕ OLIV.

Относится к семейству Кутровые — Аросупасеае. Растет в Африке, культивируется в Камеруне, Нигерии. В медицинской практике используются семена в качестве сырья для получения настойки и препарата строфантин К. Фармакологическое действие семян строфанта обеспечивают сердечные гликозиды и в частности гликозид строфантин,

Семена строфанта —*

Semen strophanthi

Внешние признаки. Семена продолговато-вытянутые, сплюснутые, с закругленным нижним концом и заостренным верхним, переходящим в ость летучки, обычно обломанной у основания. Длина семян 12—18 мм, ширина 3—6 мм, толщина 2—3 мм, они покрыты шелковистыми волосами, прижатыми в направлении от основания к заостренному концу. Цвет серебристо-серый или зеленовато-серый; после стирания волосков семена становятся от желтовато-бурых до светло- коричневых. На плоской стороне семени заметен семяшов, тянущийся от основания ости на протяжении примерно 2/3 семени. Семена сравнительно мягкие, растираются между пальцами. У размоченного в горячей воде семени при надавливании кожура вместе с тонким эндоспермом легко отделяется от крупного зародыша, состоящего из двух овальных удлиненных семядолей, почечки и корешка. Запах слабьій, усиливается при растирании семени.

Биологическую активность семян строфанта определяют биологическим методом. 1 г семян строфанта должен содержать не менее 2000 ЛЕД или 240 КЕД.

Количественное определение основных сердечных гликовидов в семенах строфанта. В колбу вместимостью 150 мл вносят 1 г измельченных до 0,25 мм и обезжиренных хлороформом семян строфанта, заливают 20 мл смеси хлороформ — этанол (2 : 1) и экстрагируют в течение 1 Ч на вибрационном

встряхивателе. По истечении указанного времени жидкость фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу на 100 мл, семена промывают 10 мл смеси растворителей, перенося промывную смесь в эту же мерную колбу. Операцию извлечения повторяют еще раз, после чего семена промывают 2 раза 10 мл смеси. Содержимое фильтра промывают 10 мл смеси растворителей и доводят этой же смесью до метки. Затем отбирают 20 мл экстракта, отгоняют растворители на водяной бане при пониженном давлении и сухой остаток растворяют в 1 мл смеси хлороформ — метанол (1 : 1).

0,04 мл полученного экстракта микропипеткой наносят на линию старта стеклянной пластины размером 20x20 см с закрепленным слоем силикагеля. Рядом в качестве «свидетелей» наносят этот же раствор экстракта и растворы стандартных образцов основных глпкозидов: К-строфантозида, зризимозида и К-строфантвна-[3. Затем проводят двухступенчатое хроматографирование восходящим способом в системе растворителей: хлороформ — этиловый еппрт (3:1). После того как фронт растворителя пройдет 12 см пластины, ее вынимают из камеры, сушат па воздухе 10 мин и затем снова хроматографируют 17 см (до конца пластины). Полосы «свидетелей» проявляют щелочным раствором лі диштїро- бензола в бензоле. По положению пятен гликозндов на контрольных полосах отмечают положение этих гликозндов на основной испытуемой полосе. Количественно переносят пятна глпкозидов в стаканы для центрифугирования 10 мл смеси: хлороформ — метанол (1 : 1). Центрифугируют со скоростью 8 тыс. об/мин в течение 5 мин. Отбирают 5 мл над- осадочной жидкости, переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 мл. Растворители отгоняют при пониженном давлении на водяной бане. К сухому остатку прибавляют 5 мл метанола и 5 мл пикраіа натрия. Раствор перемешивают и через 15 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре СФ-16 при длине волны 494 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Измерения проводят против контроля, который получают путем перенесения чистого участка силикагеля, соответствующего своим размером участку с испытуемым гликозидом, в центрифужную пробирку с помощью смеси растворителей хлороформ — метанол (1 : 1) с последующим центрифугированием, отбором надосадочной жидкости и ее последующей отгонкой. Сухой остаток растворяют в 5 мл метанола и затем прибавляют 5 мл ппкрата натрия.

Содержание гликозида в процентах (X) рассчитывают по формуле

v а-10-Ь-100-10

A = c-d- 6 •*

где а — количество гликозида в 1 мл спектрофотометрируе- мого раствора, г; Ь — объем исходного раствора экстракта, г; с — навеска сырья, г; d — количество раствора экстракта, нанесенного на хроматограмму, мл.

В анализируемых образцах семян содержится К-стро- фантоэида от 2,5 до 3,0 %; эризимозида — до 1,5 % и К- строфантина-p — в среднем от 0,2 до 0,7 %. Общее содержание гликозидоз также колеблется.

Методика дает возможность проводить количественное определение главных гликозидов в семенах строфанта. Относительная ошибка хроматоспектрофотометрического определения в сырье, рассчитанная с доверительной вероятностью 0,95, не превышает 6 %.

Семена строфанта хранятся по списку А. В аптеках — в хорошо укупоренных банках; на складах — в ящиках. Срок годности контролируется ежегодно.

Строфантин К —>

Strophantinum К

Отечественный препарат, получаемый из семян строфанта Комбе по технологии ВНИИХТЛС. Основные компоненты препарата — К-строфантозид, эрйзимозид, К-стро- фантин-р и в следовых количествах цимарин и строфантидіні.

Подлинность определяется на основе хроматографических данных в тонком слое силикагеля в системе хлороформ — метанол (3 : 1). При нанесении 100 мкг препарата на хроматограмме должны наблюдаться три четкие пятна. Биологическую активность препарата устанавливают биологическим методом. 1 г препарата должен содержать 43 000— 58 000 ЛЕД или 5800 -7100 КЕД или 3827-4773 ГЕД.

Количественное определение основных сердечных глико- видов в препарате строфантин К: 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в 5 мл метанола (мерная колба). Из полученного раствора (800 мкг) микропипеткой наносят 0,04 мл на линию старта стеклянной пластины размером 20 х20 см с закрепленным слоем силикагеля. Рядом в качестве «свидетелей» наносят этот же раствор строфантина К и растворы стандартных образцов основных гликозидов: К- строфантозида, эризимозида и К-строфантина-[Ф Затем проводят двухступенчатое хроматографирование восходящим способом в системе растворителей хлороформ — этиловый спирт (3 : 1). После того как фронт растворителя пройдет 12 см пластины, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе 10 мин и зо гем снова хроматографируют до конца пластины,

Полосы «свидетелей» проявляют щелочным раствором м- динитробензола в бензоле. По положению пятен гликози- дов на контрольных полосах отмечают положение этих гли- козидов на основной испытуемой полосе. Количественно переносят пятна гликозидов в стаканы для центрифугирования 10 мл смеси хлороформ — метанол (1 : 1). Центрифугируют со скоростью 8 тыс. об/мин в течение 5 мин. Отбирают 5 мл надосадочной жидкости, переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 мл. Растворители отгоняют при пониженном давлении при температуре водяной бани 55—60 °С. К сухому остатку прибавляют 5 мл метапола и 5 мл пикрата натрия. Раствор перемешивают и через 15 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре СФ-16 при длине волны 494 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Измерения проводят против контроля, который получают путем перенесения чистого участка силикагеля, соответствующего своими размерами участку с испытуемым глико- зидом в центрифужную пробирку с помощью смеси растворителей хлороформ — метанол (1:1) с последующим центрифугированием, отбором надосадочной жидкости и ее последующей отгонкой. Сухой остаток растворяют в 5 мл метанола и затем прибавляют 5 мл пикрата натрия.

Содержание глпкозидов в процентах (X) рассчитывают по формуле

v а-10-Ь-100-10

Л ~ c-d-5 1

где а — количество гликозидов в 1 мл спектрофотометрпруе- мого раствора, г; b — объем исходного раствора строфантина К, г; с — навеска строфантина К, г; d — количество раствора строфантина К, нанесенного на хроматограмму, мл.

В случае, когда содержание гликозида определяют с помощью калибровочной кривой цимарина, вводятся коэффициенты пересчета для К-строфантозида — 1,50; для эри- зимозида — 1,20 и для К-строфантина-р — 1,22.

При обработке полученных результатов методом математической статистики найдено, что относительная погрешность метода определения К-строфантозида — 3 %, эризи- мозида и К-строфантина-р — 1,5 %. По разработанной методике проанализировано несколько серий препарата п показано, что содержание К-строфантозида в препарате от 40 до 50 %; эрпзимозпда от 25 до ЗС % и К-строфантина-Р от 7 до 20 %.

В связи с тем, что в препарате основную часть составляет К-строфантозид с коэффициентом пересчета Ц5 относительно

В табл. 33 представлены результаты количественного содержания суммы гликозидов, полученные после хроматографического разделения и без него, но с введением коэффициента пересчета 1,5.

Результаты, полученные двумя методами, в основном совпадают. Содержание суммы главных гликозидов в препарате колеблется от 80 до 95 %.

Количественное определение суммы сердечных ГЛИКОЗИДОВ в препарате строфантин К. 50 мг строфантина К (точная навеска) растворяют в 5 мл метанола (мерная колба). В пробирки или колбы отбирают 0,02 мл полученного раствора и нагревают на водяной бане до удаления растворителей. Сухой остаток растворяют в 5 мл метанола, прибавляют 5 мл пикрата натрия. Раствор перемешивают и через 15 мин измеряют оптическую плотность на СФ-16 при длине волны 494 нм против контроля, состоящего из 5 мл метанола и 5 мл пикрата натрия. Количество гликозидов рассчитывают по калибровочной кривой цимарина.

Содержания гликозидов в процентах (X) определяют по формуле

Y к-а-Ь-10-100 А “ c-d '

где к — коэффициент пересчета, равный 1,5; а — количество гликозидов в 1 мл раствора, найденное по калибровочной кривой, мл; Ъ — объем раствора, в котором находится строфантин К, мл; с — навеска строфантина К, г; d — объем раствора строфантина К, взятого к анализу, мл.

Фармакологические свойства и применение. Препараты строфанта получили признание быстрее, чем препараты ва-
перетинки. В научную медицину он был введен после экспедиции Лингвингстона вглубь Африки (1859 г.). Экспедицией было обнаружено, что стрелышй яд, который африканцы получают из всех видов строфанта, обладает брадикарди- ческим действием. Первые физиологические исследования стрельного яда были проведены в 1865 г. в Медико-хирургической академии в Петербурге, С начала 1900-х годов начинается широкое применение строфантина 1261].

Применение строфантина обусловлено высокой эффективностью, быстротой и малой продолжительностью действия. Эффект при внутривенном введении проявляется через 5— 10 мин и достигает максимума через 15—30 мин. Практически но обладает кумулятивным действием. Назначают препарат при острой сердечно-сосудистой недостаточности на почве острого инфаркта миокарда, при тяжелых формах хронической недостаточности кровообращения II и III степени, при сердечной декомпенсации с нормальной частотой сердечного ритма или брадисистолической форме мерцания предсердий.

Противопоказаниями являются различные органические изменения сердца и сосудов, острый миокардит, эндокардит, далеко зашедшие случаи кардиосклероза.

Выпускается строфантин К в виде 0,05 и 0,0025 %-х растворов для инъекций в ампулах по 1 мл. Срок годности препарата 3 года, инъекционного раствора — 2 года, после указанного срока годности — контролируется ежегодно.

ГОРИЦВЕТ ВЕСЕННИЙ (АДОНИС ВЕСЕННИЙ)—

ADONIS VERNALIS L.

Относится к семейству Лютиковые — Ranunculaceae. Растет на Украине, Северном Кавказе, в Молдавии, в центральных черноземных областях РСФСР, Поволжье, на Южном Урале, в предгорной части Алтая. В медицинской практике используют траву горицвета весеннего в качестве сырья для получения настоев, экстракта, а также препара і а адонизида и таблеток «Адонис-бром>>. Применяют нрепараты горицвета при сравнительно легких формах хронической недостаточности кровообращения. Сырье заготавливают с начала цветения растений до начала плодоношения. Фармакологическое действие травы горицвета весеннего обеспечивают содержащиеся в ней еердечные гликозиды, в том числе цимарин, адонитоксин, адонивернит, К-строфантин-[5; сапонины, фитостерин и другие биологически активные вещества.

Трава горицвета —

Herba Adonidis vernali9

Внешние признаки. Стебли облиственные, с цветками или без них, иногда с бутонами или с плодами разной степени развития, иногда частично осыпавшимися. Стебли, срезанные выше бурых низовых чешуевидных листьев, длиной 10—35 см, толщиной до 0,4 см, простые или маловетвистыс, 8вленые. Листья очередные, сидячие, полустеблеобъемлющие, в общем очертании округлые или широкоовальные, пальчато-рассеченные на пять долей, из которых две нижние — перисто-рассеченные, три верхние — дваждыперисто-рас- сеченные; доли листьев линейные, у верхушки шиловидно заостренные, цельнокрайные, 0,5—2 см длины, 0,5—1 мм ширины. Листья голые, зеленые, по отцветении жестковатые, Цветки одиночные на верхушке стеблей и ветвей, золотисто-желтые, правильные, около 3,5 см в поперечнике, свободнолепестные, с 5—8 чашелистиками, 15—20 лепестками, с многочисленными тычинками и пестиками. Чашелистики яйцевидные, вверху притупленные с редкими зубцами, зеленоватые, опушенные, 12—20 мм длины, около 12 мм ширины, легко опадающие. Леиестки продолговато-эллиптические, на верхушке суженные, зазубренные. Плод сборный, овальный, состоит из многочисленных сухих серо-зеленоватых семянок, сидящих на цилиндрическом буроватом цветоложе. Семянки 3,5—5,5 мм длины и около 3 мм ширины, овальные, с коротким крючкообразно загнутым книзу столбиком, морщинисто-ячеистые, опушенные. Запах слабый.

Резаное сырье — кусочки стеблей, ветвей и листьев, а также частей цветков и плодов размером до 10 мм.

Биологическую активность травы горицвета определяют биологическим методом. 1 г травы горицвета должен содержать 50—66 ЛЕД или 6,3—8 КЕД. Хранится сырье по списку Б, в аптеках — в хорошо укупоренных банках или жестянках; на складах — в тюках. Срок годности контролируют ежегодно,

Адонизид — Adonisidum

Адонизид — новогаленовый препарат, представляет собой прозрачную жидкость своеобразного запаха, горького вкуса. В 1 мл содержится 23—27 ЛЕД или 2,7—3,5 КЕД.

Применяется при недостаточной сердечной деятельностп (умеренной степени) и при вегетативно-сосудистых неврозах. Назначается внутрь: взрослым по 20—40 капель 2—3 раза в

день, детям количество капель соответствует количеству лет.

Выпускается по 15 мл во флаконах-капельницах. Хранится препарат по списку Б, в прохладном, защищенном от света месте. Срок годности контролируется ежегодно.

Адонизид сухой —

Adonisidiun siccuin

Адонизид сухой — суммарный препарат горицвета, в котором содержатся все гликоаиды растения — цимарпн, адонитоксин, строфантин К — в таких же количественных соотношениях, как и в жидком адонизиде. Препарат представляет собой аморфный порошок желтоватого цвета, горького вкуса, хорошо растворимый в воде и спирте.

Фармакологические свойства и применение. Сухой адони- вид обладает кардиотоническим действием, 1 г препарата соответствует 2083 КЕД и 670 мл фармакопейного адонизида. Он улучшает самочувствие и способствует нормализации частоты пульса и дыхания у больных с вегетодистонией и органическими пороками сердца. Кроме того, совместное применение сухого адонизида с резерпином у больных гипертонической болезнью способствует исчезновению неприятных субъективных ощущений со стороны сердца; улучшению спа и уменьшению раздражительности.

Применяют препарат при недостаточности кровообращения I и II А степени, осложненной вегетодистонией, при органических пороках сердца, а также вместе с резерпином при гипертонической болезни. Адонизид сухой назначают внутрь по 1 таблетке 2—4 раза в день. В отдельных случаях доза может быть увеличена до 4—5 таблеток в сутки. Курс лечения 10—20 дней. При необходимости лечение можно повторить с перерывами в 3—4 дня.

Препарат не показан при тяжелых органических поражениях сердца и сосудов. Не рекомендуется его назначать также больным, страдающим гастритами и энтеритами в период обострения.

Сухой адонизид выпускается в таблетках (ФС 42-1418— 80), с содержанием в 1 таблетке 0,00075 г препарата. Препарат сохраняется в хорошо закупоренных флаконах в сухом прохладном месте с предосторожностью (список Б). Срок годности препарата и таблеток 2 года.

Отечественная промышленное^ выпускает таблетки «Адо- пис-бром», покрытые оболочкой, содержащие экстракт горицвета сухого и калий бромид.

Количественное определение ілпко:шдоп проводит дующими фотометрическим или биологическим метод

Четыре таблетки помещают в склянку вместима 100 мл, прибавляют 20 мл 20%-го спирта и извлекаю! вибрационном аппарате в течение 30 мин. Затем фильтруют в выпарительную чашку. Склянку и осадок на фильтре промывают 5 мл 20%-го спирта, фильтрат упаривают на кипящей водяной бане до 6 мл и сливают в делительную воронку. Выпарительную чашку промывают 2 мл воды и сливают в делительную воронку, прибавляют 30 мл смеси хлороформ — спирт (5 : 1) и взбалтывают 5 мин. Отстаивают и спиртохлороформный слой сливают в мерную колбу вместимостью 100 мл, фильтруя через 4 г безводного сульфата натрии предварительно смоченного смесыо хлороформ — 96%-й спирт (5 : 1). Извлечение повторяют еще 2 раза, собирая спиртохлороформные извлечения в ту же мерную колбу, и доводят объем раствора смесыо хлороформ — 96%-й спирт (5 : 1) до метки (раствор А).

50 мл раствора А пропускают через колонку диаметром 1 см с 3 г окиси алюминия для хроматографии [ГФ X, с. 867] II степени активности и выпаривают на кипящей водяной бане до 2 мл. Оставшийся растворитель удаляют с помощью груши или продуванием воздуха. Осадок количественно переносят 70%-м спиртом в мерную колбу вместимостью 25 мл, промывая выпарительную чашку 70%-м спиртом 3 раза но 8 мл и доводят объем раствора тем зке спиртом до метки,

К 3 мл полученного раствора и к 3 мл раствора цимарина- стандарта* прибавлшот по 1,5 мл нейтрального раствора пикрата натрия ** и по 0,5 мл 2 %-го раствора едкого натрии и тщательно перемешивают. Через 15 мин измеряют оптическую плотность обоих растворов на фотоэлектроколориметре при длине волны 520 нм (светофильтр № 4) в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют смесь, состоящую из 6 мл 70%-го спирта, 3 мл нейтрального раствора пикрата натрия и 1 мл 2%-го раствора едкого натра.

Содержание сердечных гликозидов в одной таблетке в граммах (А) в пересчете на цимарин вычисляют по формуле

У _ D-0,00002 -100 -25 Л £>о-4-50 11

где D — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — оптическая плотность раствора цимарина-стандарта; 4 — количество таблеток, взятых для анализа; 0,00002 г цимари-

* Приготовление раствори стандартного образца цимприпа. 0,0100 г (точная навеска) цимарипа-стандарта (ФС 42-633—72) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 70%-м спирте. После полного растворения доводят объем раствора тем же спиртом до метки. Раствор стабилен в течение года.

20 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 70%-м спиртом до метки. Раствор стабилен в течение года. 1 мл раствора содержит 0,00002 г цимарине.

** Приготовление нейтрального раствора пнкрата патрия. 1 г

пикриновой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 25 мл воды, 4,86 мл 1 н. раствора едкого натра (точно эквивалентное количество) и доводят объем раствора водой до метки. 5 мл полученного раствора титруют 0,1 ■ н. раствором едкого натра или 0,1 и. раствором соляной кислоты (индикатор — фенолфталеин).

В случае получения щелочного раствора или кислого раствора пнкрата натрия к нему прибавляют по расчету 0,1 п. раствор едкого иатра или 0,1 н. раствор соляпой кислоты.

Раствор стабилен в течение 1 мос.

Биологическую активность препарата определяют па травяных лпгудшах (Rana temporaria) и озерных лягушках (liana radibinda) по методам ГФ X (с. 917).

Оставшийся раствор А выпаривают на кипящей водяной бане до 2 мл. Остаток растворителя отгоняют с помощью груши. Осадок растворяют в 1,5 мл 95 %-го спирта и прибавляют 6 мл воды. Полученный раствор вводят подкожно травяным лягушкам, внутривенпо или внутрисердечно1 озерным лягушкам и определяют наименьшую дозу в миллилитрах испытуемого раствора и раствора стандартного образца цимарина *, вызывающую систолическую остановку сердца у большинства (трех или четырех) из пяти лягушек данной группы в течение 1 ч при подкожном введении или 15 мин при ннутривенном или внутрисердечном введении.

Содержание ЛЕД в одной таблетке вычисляют по формуле v 6-7-5 0,3-а-2’

где а — наименьшая доза, установленная для испытуемого раствора, при подкожном и внутрисердечном способах введения, мл. При внутривенном способе введения наименьшая доза испытуемого раствора дается в миллиметрах на 1 г массы лягушки; Ъ — наименьшая доза, установленная для раствора циммрина-стапдарта, при подкожном и внутрисердечном способах введения, мл. При впутривенном способе введения наименьшая доза раствора цимарипа-стаидарта дается в миллиметрах на 1 г массы лягушки; 0,3 — доза,

* Приготовление раствора цимарина-стапдарта. 0,0300 г (точная навеска) цимарина-стапдарта (ФС 42-633—72) растворяют в 90 мл 25%- го спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл и после полного растворения доводят объем тем нее спиртом до метки. Раствор стабилен в течение 1 года. В день опыта полученный раствор разводят водой в 4 раза, т. с. к 1 мл раствора прибавляют 3 мл воды.

Таблетки «Адонис-бром», покрытые оболочкой, применяются как успокоительное средстно при неврозах и для лечения легких форм недостаточности кровообращения. Выпускается препарат во флаконах по 25 таблеток, Хранится в сухом месте. Срок годности 2 года,

ЖЕЛТУШНИК РАСКИДИСТЫЙ (СЕРЫЙ)—

ERYSIMUM DIEFUSUM EIIRH.

Относится к семейству Капустные — Brassicaceae. Растет в Средней Азии, в европейской части до Южного Урала, в Сибири, Крыму и на Северном Кавказе. Культивируется на Украине, в Краснодарском крае. В медицинской практике используют траву желтушника раскидистого в качестве сырья для получения сока, который входит в состав препарата кардиовален. Фармакологические свойства сырья определяют сердечные гликозиды, в том числе эризимин, эрнзимо- вид, близкие по действию к гликозидам группы наперстянки.

Трава желтушника раскидистого свежая —

НсгЬа Erysimi diffusi recens

Внешние признаки. Стебли ветвистые, с тонкими, направленными вверх веточками, облиственные, с цветками и незрелыми плодами разной степени развития. Длина стеблей около 30 см. Листья очередные, сидячие, лннейно-ланцет- ные или линейные, резкозубчатые или цельнскрайные, около 3—6 см длины и до 0,5 см ширины. Стебли и листья серовато- зеленые от обилия прижатых волосков, хорошо заметных под лупой. Соцветия — рыхлая кисть. Чашечка состоит из четырех продолговатых или ланцетных чашелистиков 5—7 мм длины; венчик четырехлепестпый; лепестки бледно-желтые, обычно вдвое длиннее чашечки, с обратнояйцевидным или округло-эллиптическим отгибом и длинным узким ноготком, немного превышающим чашечку. Тычинок шесть, из них

дне короткие, пестик с верхней двугнездной завязью, коротким столбиком и головчатым двухлопастным рыльцем. Плод — четырехгранный стручок длиной до 7 см, шириной около 1 мм, отклоненный от стебля, беловатого цвета с зелеными гранями; семена мелкие, продолговатые, зеленые. Запах слабый, своеобразный,

Кардиовален — Cardiovalenum

Кардиовалеп — комплексный препарат, в состав которого входит сок желтушника раскидистого — 17,2 мл, адонизид концентрированный (активность 85 ЛЕД в 1 мл) — 30 мл, настойка свежих корневищ валерианы —48,6 мл, экстракт боярышника жидкого — 2,2 мл, камфора — 0,4 г, натрий бромид — 2 г, спирт 95%-й — 1,6 мл, хлорбутанол- гндрат — 0,25 г.

Препарат представляет собой жидкость светло-бурого цвета, солоновато-горького вкуса, с запахом камформы и валерианы. Биологическая активность контролируется на лягушках. В 1 мл раствора содержится 45—55 ЛЕД.

Применяется кардиовален по 15—20 капель 1—2 раза в день при ревматических пороках сердца, кардиосклерозе с явлениями сердечной недостаточности и нарушениями кровообращения I, II А степени, а также при стенокардии (без органических изменений сосудов сердца), вегетативных неврозах.

Выпускается препарат по 15—25 мл во флаконах-капельницах. Хранится по списку Б, в прохладном, защищенном от света месте. Срок годности 1 год, в случае соответствия всем требованиям — срок годности продлевается еще на 1 год.

ЛАНДЫШ МАЙСКИЙ — CONVALLARIA MAJALIS L,

Относится к семейству Лилейные — Liliaceae. По данным «Флоры СССР», на территории Советского Союза растет единственный вид Convallaria majalis L., представленный тремя географическими расами, которые рассматриваются некоторыми авторами как самостоятельные виды: С. majalis

L. , С. transcaucasica Utkin ex Grossh. и C, keiskei Miq, [110, 139, 274].

Растет ландыш майский в европейской части СССР, Наряду с типичной формой используют закавказскую разновидность, распространенную на Северном Кавказе, в Закав

казье и Крыму, п дальневосточную разновидность, произрастающую в Забайкалье, Приамурье, Приморье, на Сахалине и Южных Курилах. В медицинской практике используют траву, листья и цветки ландыша в качестве сырья для получения разнообразных лечебных препаратов, применяемых при лечении сердечно сосудистых заболеваний. Траву и цветки заготавливают в период цветения, листья — до цветения и в начале цветения ландыша. Фармакологические свойства сырья ландыша обеспечивают сердечные гликоэиды, в том числе конваллятоксин, конваллятоксол, конваллозид и др.

Путь применения ландыша в научной медицине для лечения больных с заболеваниями сердца был открыт великим русским терапевтом С. П. Боткиным. В дальнейшем почти вековая практика лечения сердечно-сосудистых заболеваний показала, что из ландыша могут быть получены препараты, которые по своему действию близки к строфантину,

В настоящее время известно, что в ландыше насчитывается свыше 22 видов карденолидпой природы. Во ВНИИХТЛС были проведены исследования по выявлению основных гликозпдов трех видов ландыша, произрастающих на территории СССР — ландыша майского, закавказского и дальневосточного, изучены их фармакологические свойства [184].

В результате проведенных исследований было установлено, что качественный состав всех трех видов одипаков, а конваллятоксин, конваллозид, дезглюкохейротоксип, конваллятоксол и локундьезид составляют половипу всего гликозид- ного состава ландышей. Отмечено, что в ландыше дальневосточном количественное содержание больше, чем в других видах [140 .

Трава ландыша — Herba Convallariae

Внешние признаки. Различают три вида сырья: цветки (соцветия), листья и траву (смесь листьев и цветочных стрелок с цветками). Листья с длинными влагалищами отдельные и попарно соединенные, реже по три, овально-ланцетовидные или продолговато-эллиптические, к верхушке заостренные, цельнокрайние, голые с обеих сторон, с дуговидным жилкованием, зеленые, черешки часто желтоватые. Длина листа 10—20 см, ширина 3—8 см. Цветоносные стебли голые, светло-зеленые, в поперечном сечении трехгранные или полукруглые, заканчиваются односторонней рыхлой кистью из 5—10 (20) пониклых желтовато-белых цветков

(иногда с буроватым оттенком). Цветки с простым околоцветником на изогнутых цветоножках, выходящих из пазух пленчатых ланцетовидных или линейных прицветников; околоцветник венчиковидный, колокольчатый, сростнолепестный, с шестью зубцами, диаметром 6—14 мм, тычинок шесть на коротких нитях, прикрепленных к основанию околоцветника. Завязь верхняя, шаровидпая, трехгнездная; столбик с расширенным рыльцем. Запах слабый. Резаное сырье — кусочки цветоносов, листьев и цельных цветков размером от 1 до 10 мм.

Биологическую активность сырья определяют биологическим методом. 1 г травы ландыша должен содержать не менее 120 ЛЕД или 20 КЕД; 1 г цветков — не мепее 200 ЛЕД или 33 КЕД; 1 г листьев — не менее 90 ЛЕД или 15 КЕД.

Количественное определение основных сердечных глико- зидов ландыша хроматоспектрофотометрнческим методом [121-124].

В круглодонную колбу, снабженную шлифом, вместимостью 250 мл отвешивают 50,0 г 70%-го этанола. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане до кипения. После этого колбу быстро отсоединяют, вносят 5,0 г измельченных (0,25 мм) воздушно-сухих листьев ландыша, вповь присоединяют к холодильнику и кипятят 30 мин. По истечении указанного времени раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят 70 % м этанолом до первоначальной массы. Полученный экстракт отцеживают через марлю, отбирают 27,5 г (соответствует

2,5 г сырья) и отгоняют спирт при пониженном давлении при температуре баии 55—60 °С до объема 10 мл. К горячему экстракту прибавляют 5 мл раствора основного ацетата свинца, перемешивают в течение 10 мин, затем переносят количественно в стакан для центрифугирования с помощью дистиллированной воды. Центрифугируют со скоростью 5 тыс. об/мин в течение 5 мин. Жидкость над осадком переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл. Стаканы промывают водой по 10 мл и еще 2 раза центрифугируют.

Из очищенного водного экстракта сердечные гликозиды извлекают смесью хлороформ — этанол (4:1) 1 раз 60 мл и 5 раз по 40 мл каждый раз в течение 5 мин. Извлечения фильтруют через фильтр с 15,0 г высушенного сульфата натрия. Седьмой раз фильтр промывают 40 мл смеси растворителей. Извлечения собирают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл и отгоняют растворители при пониженном давлении на водяной бане до объема 3—4 мл, количественно

bgcolor=white>I
Ландыш Серия Конпалло вив Локундьсвит Конпаллятокс ол
Майский I 0,0715±0,0005 0,0105±0,0006 0,0384±0,0005
II 0,0728±0,0003 0,0125±0,0003 0,0395±0,0004
III 0,0707±0,0004 0,0134±0,0003 0,0378±0,0003
Дальпсвосточ- 0,0357±0,0016 0,0133±0,0016 0,357 ±0,0011
ЕЫЙ II 0,0462±0,0019 0,0162±0,0017 0,0237±0,0014
III 0,0226 ±0,0013 0,0166±0,0018 0,014±0,0017
Закавказский I 0,0375±0,003 0,0303±0,0026 0,0250±0,0021

переносят раствор гликозидои в круглодоннуго колбу вместимостью 100 мл, отгоняют растворители до объема 1 мл, остаток высушивают продуванием воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл смеси хлороформ — метанол (1 : 1).

На лист хроматографической бумаги марки «среднепро- пускающая», нарезанной полосами и импрегнированной водной фазой системы растворителей /(.-амиловый спирт — беп- вол — вода (1:1: 1), наносят на одну полосу по 0,05 мл 0,1 %-х растворов конваллозида, локундьезида, конвалля- токсола, конваллятокеппа и дезглюкохейротоксина в метиловом спирте; па последующие шесть полос — по 0,05 мл экстракта. Хроматографирование ведут в органической фазе системы л-амиловый спирт — бензол — вода (1:1:1) восходящим способом в течение 20—24 ч. После этого бумагу вынимают из камеры, высушивают на воздухе пли в сушильном шкафу при 50 °С на протяжении 10 мин. Две контрольные полосы (одну — с экстрактом, вторую — со «свидетелями» гликозидами) протягивают через раствор хлорида сурьмы в хлороформе. Полосы высушивают 1 мин на воздухе, затем нагревают в сушильном шкафу при 105 °С в течение 3 мип. Хроматограмму просматривают в УФ свете. С помощью пятен на контрольных полосах отмечают расположение гликозидов на других полосах. Участок бумаги с пятном гли- козида вырезают, разрезают на кусочки (размером около 1 см), помещают в круглодонную колбу вместимостью 50— 100 мл, заливают 30 мл метанола и элюируют 30 мин на кипящей водяной бане с обратным холодильником. Элюаты переносят в колбы вместимостью 250 мл, оставшиеся в элюа- те кусочки бумаги промывают 20 и 15 мл метанола. Метанол отгоняют при пониженном давлении, сухой остаток растворяют в 5 мл мсіанола, прибавляют 5 мл раствора пикрата

различных видах ландыша (п — 5, а = 0,05), %
Конв аллят окенн Ді’ЗГЛЮКОХРЙрОТОКСИН Сумма сердечных гли- коаиДов
0,0195±0,0005 0,0!82±0,0005 0,155±0,003
0,0204±0,0004 0,0133±0,0008 0,156±0,0047
0,0246±0,0003 0,0139±0,00027 0,160±0,0008
0,0371±0,0015 0,0356±0,0016 0,169±0,012
0,0291 ±0,0022 0,0176±0,0008 0,164±0,014
0,0336±0,0015 0,0314±0,0012 0,166±0,013
0,0250±0,0021 0,0234±0,0024 0,177±0,0052


натрия, перемешивают, через 15 мин отфильтровывают через бензольный фильтр и измеряют оптическую плотность на СФ-4А при длине 494 нм в кювеїе с толщиной слоя 10 мм. С помощью калибровочной кривой стандартного конвалля- токсина определяют количество гликозидов в 1 мл элюата.

Содержание гликоэида в процентах (X) в сырье рассчитывают по формуле

у __ а-10-6-100

(с — d)-k ’

где а — концентрация гликозида в 1 мл спектрофотометр и- руемого раствора, найденная по калибровочной кривой, г; Ь — объем раствора, в котором растворен экстракт -глико- видов, мл; с — сухая навеска листьев, г; d — количество влаги, содержащееся в навеске, г; к — количество раствора, нанесенного на хроматограмму, мл.

Результаты анализа основных сердечных гликозидов и их суммы в растительном сырье в различных видах ландыша приведены в табл. 34. Как видно из приведенных данных, в сырье ландыша майского конваллозид находится в наибольшем количестве, меньшее содержание локундьезида, конваллятоксола и конваллятоксина, еще меньше дезглюко- хейротоксина.

По качественному составу гликозидов исследованные серии примерно одинаковы, однако по содержанию как суммы, так и отдельных гликозидов они отличаются друг от друга, поэтому необходимо проводить количественную оценку растительного сырья при получении из него лекарственного препарата.

Ошибка проведенных определений, как правило, не превышает 14,0 %.

О ООООООООФ ЛбНдыШ % м аиста | Сырье
ООООО ООООФ Ландыш

Закавказский

О О О О О О О О О О О Ф п Ландыш дальневосточный
О 1 Конваялозид Гликозиды
О 1 Локундьезид
О 1 Конвалятоксол
О 1 Конвалятоксин
О 1 Ррзглтохейроттн
Рис. 18. Хроматограммы различных видов ландыша, Система: н-амиловый спирт — бензол — вода (1 ; 1 : І),


Учитывая, что при производстве препаратов может быть использовано сырье ландыша не только майского, но также закавказского и дальневосточного, проведено количественное определение входящих в них сердечных ГЛИКОЗИДОВ,

В листьях ландыша закавказского отмечено отсутствие локундьезида, В остальных видах он содержится, причем в наибольших количествах — в ландыше дальневосточном, Г1о содержанию конваллятоксина и дезглюкохейротоксина сырье также неравноценно, наибольшие количества их отмечены в листьях ландыша дальневосточного (от 0,03 до 0,04 %). Менее всего конваллштоксола в листьях ландыша дальневосточного, а больше всего — в листьях ландыша майского.

На рис. 18 показана схема хроматограммы различных видов ландыша. Все сырье по качественному составу примерно одинаково, за исключением того, что в листьях ландыша закавказского отсутствует локундьезид.

При количественном определении общей суммы ГЛИКОЗИДОВ способ экстракции тот же, только на полоску хроматографической бумаги наносят 0,02 мл полученного экстракта. Участок бумаги с пятном гликозида вырезают и в дальнейшем поступают так, как описано в методике количественного определения ОСНОВНЫХ ГЛИКОЗИДОВ в сырье.

В табл. 34 также приведены результаты количественного содержания суммы сердечных ГЛИКОЗИДОВ в листьях трех видов ландыша. Все виды содержат примерно одинаковую сумму ГЛИКОЗИДОВ,

Хранится сырье ландыша по списку Б, в аптеках — в жестянках, на складах: цветки — в ящиках, листья и трава — в мешках, тюках или кипах. Биологическая активность травы ландыша контролируется ежегодно.

Корглнкон — Corglyconum

Созданный во ВІІИИХТЛС препарат содержит сумму гликозидов ландыша и представляет собой порошок от светло-желтого до буровато-желтого цвета, легко растворим в 95%-м спирте, трудно растворим в воде.

Подлинность препарата контролируется хроматографически по следующей методике [70, 77]. 0,4 г препарата растворяют в 10 мл метилового спирта. Микропипеткой 0,05 мл полученного раствора наносят на линию старта стеклянной пластинки с закрепленным слоем селикагеля *. На расстоянии 2 см от первой точки на линию старта наносят микропипеткой 0,05 мл (150 мкг) 0,3%-го раствора конваллятоксина в метиловом спирте [ГФ X, с. 170,]. Пластину с нанесенными пробами высушивают на воздухе 40 мин, а затем помещают в камеру со смесью бензол — бутанол (1 : 1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластины, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе 30 мин в вытяжном шкафу. Затем пластину опрыскивают спачала 10%-м раствором лг-динитробензола в бензоле, затем водно-мстанольным раствором едкого натра **. Должно появиться не менее пяти пятен синего цвета, имеющих следующие значения Rt но отношению к конвалляток- сину: конваллозид — от 0,15 до 0,27; локундьезид — от 0,5 до 0,7; конваллятоксол — от 0,8 до 0,9; копваллятоксин — 1,0; дезглюкохейротоксин — от 1,1 до 1,2.

* Приготовление пластины. Смесь 3 г силикагеля марки КСК (3-минутная фракция — 0;1 мм), 0,45 г кальция сульфата CaS04 ХІ/2 Н20 и 9 мл воды тщательно перемешивают в колбе, наносят на плас- тину размером 10x20 см катком, обеспечивающим толщину слоя 0,25 мм. Через 10 мин после этого наносит пробы.

** Приготовление водно-метаполыюго раствора едкого натра. 6 г едкого натра растворяют в смеси 25 мл воды и 45 мл метилового спирта. Раствор применяют свежеприготовленным.

Для количественного определения предложен ряд методик спектрофотометрического, хроматоспектрофотометрического и дснситометричоского анализа.

Количественное определение суммы гликозидов. Около 0,01 г препарата (точная навеска) растворяют в метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем метиловым спиртом до метки. 2 мл получепного раствора помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 3 мл метилового спирта и 5 мл раствора пикрата натрия *. Через 15 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 494 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствором сравнения служит смесь, состоящая из 5 мл метилового спирта и 5 мл раствора пикрата натрия.

По калибровочному графику ** находят концентрацию гликозидов в 1 мл спектрофотометрируемого раствора.

Содержание общей суммы гликозидов в процентах (X) вычисляют по формуле

_ а-Ъ-10-100

c-d ’

где а — количество гликозидов в 1 мл спектрофотометрируемого раствора, найденное по калибровочному графику, г; Ъ — объем раствора, взятый для растворения навески кор- гликона, мл; с — навеска препарата, г; d — объем испытуемого раствора, взятый для определения, мл. Содержание суммы гликозидов в препарате должно быть 30—50 % в пересчете на конваллнтоксии,

* Приготовление раствора пикрата натрия. 1 г пикриновой кислоты растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, прибавляют 5 мл раствора едкого натра и доводят объем раствора водой до метки. Раствор применяют свежеприготовленным.

** Построение калибровочного графика. 0,0100 г> конвалляток- сіша [ГФ X, с. 176] растворяют в метиловом спирте в мерной колбо вместимостью 100 мл и доводят объем раствора метиловым спиртом до метки. Из нолученпого раствора отбирают 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,25; 1,50; 1,75; 2,0 мл и доводят объем каждого раствора до 5,0 мл метиловым спиртом. В каждую колбу прибавляют но 5 мл раствора пикрата натрия. Далее поступают, как описано в количественном определении. Строят калибровочный график, откладывая но оси абсцисс соответствующие концентрации конваллятоксниа в миллиграммах в 1 мл спектрофотометрируемого раствора, но оси ординат — оптическую плотность.

Количественное определение основных гликозидов препарата коргликон. Па стартовую линию пластины (18x2(5), покрытую тонким слоем силикагеля, закрепленного гипсом (методику приготовления пластины см. выше), наносят от 0,05—0,075 мл (4%-го) раствора коргликопа в метаноле. Рядом в качестве «свидетелей» наносят тот же раствор коргликопа и растворы гликозидов: конваллозида, локундье- зида, конваллятоксола, конваллятоксниа и дезглюкохей- ротокенна. Хроматографирование ведут восходящим способом в системе растворителей бензол — бутанол (1:1) — вода 50 %. После этого пластинку вынимают из камеры, высушивают до удаления растворителей. Полосы «свидетелей» проявляют щелочными раствором ле-динитробензола в бензоле или раствором хлорида сурьмы в хлороформе. По положению пятен гликозндов на контрольных полосах отмечают положение этих пятен на основной испытуемой полосе. Количественно переносят пятна гликозидов в стаканы для центрифугирования 10 мл смеси хлороформ — метанол (1 : 1). Центрифугируют со скоростью 7000 об/мин в течение 15 мин. ^Отбирают 5 мл надосадочпой жидкости, переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 мл. Растворители отгоняют при пониженном давлении при температуре водяной бани 55-60 °С. К сухому остатку прибавляют 5 мл метанола и 5 мл пикрата натрия. Раствор перемешивают, через 15 мин измеряют оптическую плотность при помощи спектрофотомера СФ-4А при длине волны 494 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Измерения проводят против контроля, который получают путем перенесения чистого участка силикагеля, соответствующего своими размерами участку с испытуемым гликозидом, в центрифужную пробирку с помощью смеси растворителей хлороформ — метанол (1 : 1) и с последующим центрифугированием, отбором надосадочпой жидкости и ее последующей отгонкой. Сухой остаток растворяют в 5 мл раствора пикрата натрия.

С помощью калибровочной кривой стандартного конвал- лятоксина определяют количество гликозидов в одном миллилитре элюата..

Содержание глпкозида в процентах (X) рассчитывают по формуле

v а-10-6-10-100 ~ cd-Ъ '

где а — количество гликозидов в 1 мл колориметрируемого раствора, г; b — объем исходного раствора коргликона, мл; с — навеска коргликона, г; d — объем раствора корглп- кона, нанесенного на хроматограмму, мл.

По разработанной методике проведено количественное определение основных гликозидов в различных сериях препарата коргликон. Результаты анализов представлены в табл. 35. Из полученных данных следует, что как по содержанию суммы гликозидов, так и по содержанию индивидуальных гликозидов все серии различаются. Содержание общей суммы колеблется от 30 до 50 % в пересчете на кон- валлятоксин.

Количественное определение общей суммы сердечных гликозидов в препарате коргликон, без предварительного


разделения на топком слое силикагеля, проводят по методике, описанной ниже.

Денситометричеекое определение сердечных глнкозидов в препарате коргликон 177]. На линию старта стеклянной пластины размером 4x19 см наносили 0,01 мл (0,5 %) раствора препарата коргликон и хроматографировали. Затем обрабатывали реактивом ванилин — серная кислота. Измерения проводили через 10 мин на денситометре ЕШ-65 т, светофильтр с длиной волны 510 пм. Общий вид хроматограммы и денситограммы препарата коргликон представлены на *рис. 19,

Каждый пик кривой поглощения свидетельствует о наличии пятен. Оценка должна проводиться с симметричного дополнения этого пика в отношении перпендикуляра к основной линии. При этом будут получены кривые Гаусса, Для определения процентного содержания каждого пятна из точек пересечения кривых Гаусса проводят перпендикулярные линии от базиса кривой поглощения до интегральной кривой. Через точки пересечения этих перпендикуляров с интегральной кривой проводят горизонтальные линии, Липейку длиной 100 мм кладут концом (100 мм) на

Рис, 19, Хроматограмма (а) и депснтограмыа (б) препарата коргликон,

1 — коиваллозид; 2 — локундье- вид; з і— конваллптоксол? 4 — кон- валлятоисин; з — дезглюкохеіі- ротоксші*
hspace=0 vspace=0 align=center> Таблица 35

коргликоне после ТСХ (п = 5; f = 2,78; а = 0,95), %

Конпаллятокснн Дезглюко хей ротон- си н Сумма сердечных гликозидов Общая сумма сердечных . гликозидов
5,99±0,22 1,95±0,15 34,71 ±0,046 37,25
7,44±0,16 2,89±0,14 38,85±0,25 37,70
6,02±0,161 2,06±0,11 37,59±0,358 42,10
2,72±0,27 3,26±0,28 41,50±0,004 42,5
9,76±0,111 3,72±0,130 41,50±0,028 42,2


интегральную кривую в той точке, которая расположена перпендикулярно над концом кривой, а началом (0 мм) — на базис. По линейке отсчитываются наклонные расстояния между горизонтальными линиями, которые указывают на процентное значение отдельных пятен. Спектрофотометрическим методом установлено, что препарат коргликон в своем составе содержит до 40 % сердечных гликозидов, поэтому при расчете денситометрическим методом по интегральной кривой мы учитываем это, проводя расчет не от 100 %, а от 40 %.

Результаты количественного определения основных гликозидов в препарате коргликон представлены ниже (%):

Гликозид Метод

хроматоспектрофото- денситометри чесний метрический

Конваллозпд 8,81 8,90 .
Локундьезид 4,02 4,05
Конваллятоксол- 6,03 6,27
Конва лл ятоксин 5,99 6,18
Дезглюкохейротоксин 1,97 2,09
Яотн= ±0,36-2,29 Еот ~ ±0>5~:

Денситометрический метод позволяет сократить время проведения хроматоспектрофотометрического анализа с 3 до 1 ч и может быть рекомендован для постадийпого метода контроля.

Биологическую активность препарата определяют биологическим методом [ГФ X, с. 931] но сравнению со стандартным экстрактом ландыша, разведенным в 4 раза. 1 г препарата должен содержать 19 000—27 000 ЛЕД или 3030— 3700 КЕД.

Для биологического испытания 10 мг препарата растворяют в 10 мл 70 %-го спирта и получают исходный раствор (1 ; 1000). Для испытания на лягушках применяют раствор-

1 : 6600. 3 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора'водой до метки. Длительность наблюдений 1 ч.

Для испытания на кошках применяют раствор 1 : 50 000. 5 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят изотоническим 0,9 %-м раствором натрия хлорида до метки.

Фармакологические свойства и применение. Коргликоп обладает весьма значительной биологической активностью и по быстроте действия и слабой способности кумулировать близок к строфанту. При внутривенном введении действие препарата проявляется через 20—30 мин и длится 8—15 час. Под влиянием лечения коргликоиом наблюдается увеличение силы и замедление ритма сердечных сокращений, уменьшение дефицита пульса, усиление диуреза, уменьшение застойных явлений в большом и малом круге кровообращения, увеличение скорости кровотока. У больных с экстрасисто- лической аритмией, наряду с улучшением гемодинамики, под влиянием коргликона в ряде случаев наблюдается восстановление нормального ритма сердечной деятельности. Коргликон оказывает успокаивающее действие на центральную нервную систему, улучшает сон и общее самочувствие.

Коргликон высокоэффективен при лечении острой и хронической недостаточности кровообращения у больных с клапанными пороками сердца и хроническими заболеваниями сердечной мышцы различного происхождения. Отмечено благоприятное действие этого препарата па больных с явлениями недостаточности коронарного кровообращения, в том числе со свежими ипфарктами миокарда и с рубцовыми изменениями мышцы сердца после перенесенных ранее инфарктов миокарда.

Препарат показан при острой и хронической сердечной недостаточности, пароксизмальной тахикардии. Противопоказания к применению коргликона такие же, как для строфантина.

Коргликон выпускается в ампулах — 0,6 мг в 1 мл раствора. Хранится по списку А, в защищеппом от свете месте, при температуре не выше 5 °С. Срок годности препарата 3 года, ампульного раствора — 2 года.

Настойка ландыша — Tinctura Convallariae

Прозрачная жидкость велеповато-бурого цвета, со слабим своеобразным запахом и горьким вкусом. Стандартизуется настойка биологическим методом; в 1 мл содер-

жител 10,4—13,3 ЛЕД или 2—2,5 КЕД, Назначается впутрь взрослым по 15—20 капель, детям — от 1 до 12 капель 2— 3 раза в день при неврозах сердца, а также при нарушении сердечной деятельности без нарушения компенсации сердечно-сосудистой системы.

Выпускается во флаконах-капельницах по 25 мл. Хранится в защищенном от света месте. Срок годпости контролируется ежегодно.

Настойка ландыша входит в состав готовых лекарственных средств: капли ландышево-валериановые — срок годности 2 года; капли ландышево-валериановые с адонизидом и натрием бромидом — 2 года; капли ландышево-пустыр- никовые — 1 год; валокормид — срок годности 2 года, а также капли, содержащие настойку красавки, ландыша, валерианы и ментола — срок годности 2 года,

Конвафлавин — Convaflavimim

Суммарный флавонопдный препарат, созданный во ВШШХТЛС из трапы ландыша дальневосточного. В состав конвафлавина входят в основном флавоноиды кейозид, гиперазид, кверцетин робинобиозида и незначительное количество кверцетина.

Так как в траве ландыша дальневосточного содержатся сердечные гликозиды, в контроле чистоты препарата Л. Я. Сиренко предусмотрен хроматографический тест па отсутствие кардиогликозицов.

Обнаружение сердечных глнкозпдов. К 0,02 г препарата прибавляют 20 мл смеси хлороформ — 95%-й спирт (75 ; : 25), взбалтывают в течение 5 мнн и фильтруют через колонку диаметром 10 мм, содержащую 5 г окиси алюминия «для хроматографии». Фильтрат упаривают до остатка около 0,2 мл и наносят на круг бумаги «для хроматографии» сред- нефильтрующей диаметром 200 мм с отверстием в центре диаметром 10 мм. В центр круга вставляют фитиль из бумаги «для хроматографии» и помещают в эксикатор, где находится стаканчик с 3%-м раствором уксусной кислоты, и хроматографируют при комнатной температуре до тех пор, пока расстояние от фронта растворителей до края бумаги на будет составлять 20 мм. Хроматограмму вынимают из эксикатора и сушат на воздухе в течение 40 мин, после чего опрыскивают 5%-м раствором метадинитробензола *, после просушивания обрабатывают спиртоводным раствором едкого калия **. Не должно появляться кольцо голубого цвета.

< * Приготовление 5% -го раствора метадппитробензола. 5 г мета-

динитрооензола в мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют в 80 мл хлороформа и доводят объем раствора хлороформом до метки. Раствор годен в течение недели.

** Приготовление спиртоводного раствора едкого калп. 6 г едкого калп (ГОСТ 4203—65) растворяют в 45 мл воды и прибавляют 25 мл 95%-го спирта. Раствор годеи в течение месяца.

Количественное определение суммы флавоноидов [250]. 0,2 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 70 мл 50%-го спирта и доводят объем раствора 50%-м спиртом до метки. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 1%-го раствора тетраэтиламмонпя иодида *, 0,1 г сульфита натрия тщательно перемешивают и помещают в электролизер. Затем в течение 15 мин пропускают водород или другой инертный газ (аргон или азот) и раствор полярографируют при катодной поляризации в интервале — 1,0—1,7 В при дифференциальной записи. В тех же условиях полярографируют 5 мл 0,05 %-го раствора гиперозпда-стандарта **.

Содержание суммы флавоноидов в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле

v 0,0500 • 5 • 100 • Нх • 100 5-Нх

Х = 100-е-5-7/ст =

где Нх — высота волны испытуемого раствора, мм; #ст — высота волны гиперозпда-стандарта, мм; а — навеска препарата, г.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперо- вид-стандарт ** должно быть не менее 17,0 %,

* Приготовление 1%-го раствора тетраэтиламмонпя иодида. 1 г тетраэтиламыония иодида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. Раствор годен в течение месяца. Хранят в защищенном от света месте.

** Приготовление 0,05 %-го раствора гиперозпда-стандарта. 0,0500 г (точная навеска) предварительно высушенного при температуре 135 + 1 °С в течение 3 ч гнперозид-стандарта (ВФС 42-1088—81) растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 50 %-м спирте, доводят объем раствора 50%-м спиртом до метки и перемешивают. Раствор годен 1 год. Хранят в защищенном от света месте.

Фармакологические свойства п применение. Конвафлавин оказывает желчегонное действие и обладает спазмолитическими свойствами. Препарат малотоксичен. В отличие от аллохола нормализует вязкость желчи и содержание билирубина. Применяют препарат в качестве желчегопного средства при острых и хронических заболеваниях печени и желчных путей (холециститы, холангиты, хронические холециститы и т. д.).

Конвафлавірн назначают внутрь по 0,02 г 3 раза в депь до еды ежедневно в течение 3—4 нед. При необходимости курс лечения конвафлавином повторяют. При передозировке препарата у отдельных больных иногда могут наблюдаться головокружение, растройство стула, аллергическая сыпь. В этом случае прием конвафлавина следует прекратить.

Конвафлавин выпускают по 0,01 г в таблетках, покрытых оболочкой, в банках из орапжеього стекла по 50 штук. Препарат следует хранить в плотно закрытых банках, в сухом, защищенном от света месте. Срок годности препарата 6 лет, таблеток — 3 года.

<< | >>
Источник: Георгиевский В. П., Комиссаренко II. Ф., Дмитрук С. Е.. Биологически активные вещества лекарственных растс- ний/Георгиевский В. П., Комиссаренко II. Ф., Дмитрук С. Е.—Новосибирск: Наука, Сиб, отд-ние,1990. 1990
Помощь с написанием учебных работ

Еще по теме Глава 9. РАСТЕНИЯ II ПРЕПАРАТЫ,СОДЕРЖАЩИЕ КАРДИОСТЕРОИДЫ:

  1. Реферат. Лекарственные растения, содержащие лигнаны2017, 2017
  2. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ СТЕРОИДНЫЕ САПОНИНЫ
  3. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КУМАРИНЫ И ХРОМОНЫ
  4. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ЧИСТЫЕ ГОРЕЧИ
  5. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АРОМАТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ
  6. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КСАНТОНЫ
  7. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КАРОТИНОИДЫ (ПРОВИТАМИНЫ А)
  8. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ГИДРОЛИЗУЕМЫЕ ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА
  9. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ НАФТОХИНОНЫ (ВИТАМИН К)
  10. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ФИТОЭКДИЗОНЫ
  11. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АНТРАЦЕНПРОИЗВОДНЫЕ
  12. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ КАРДИОГЛИКОЗИДЫ
  13. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ТИОГДИКОЗИДЫ
  14. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ АСКОРБИНОВУЮ КИСЛОТУ (ВИТАМИН С)
  15. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СЫРЬЕ, СОДЕРЖАЩИЕ ФЕНОЛЬНЫЕ ГЛИКОЗИДЫ