NEOMYCINI SULFAS НЕОМИЦИНА СУЛЬФАТ

Состав. Неомицина сульфат является смесью сульфатных солей веществ, продуцируемых при росте Streptomyces fradiae, основными компонентами которой являются пеомицип В и его стереоизомер неомицин С.

Химическое наименование.

Описание. Белый или желтовато-белый порошок без запаха или почти без запаха.

Растворимость. Легко растворим в воде; очень мало растворим в этаноле (~750 г/л) ИР; практически нерастворим в ацетоне Р, хлороформе Р и эфире Р.

Категория. Антибиотик.

Хранение. Неомицина сульфат следует хранить в плотно укупоренной таре, предохраняющей от действия света, при температуре не выше 30 °С.

Дополнительная информация. Неомицина сульфат гигроскопичен. Даже в темноте он постепенно разлагается во влажной атмосфере, причем разрушение ускоряется при повышении температуры. Водный раствор правовращающий.

ТРЕБОВАНИЯ

Общее требование. Неомицина сульфат содержит не менее 600 ME неомицина в 1 мг в пересчете на высушенное вещество.

Подлинность

А. Проводят испытание, как описано в разделе «Тонкослойная хроматография» (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель РЗ, а в качестве подвижной фазы — свежеприготовленный раствор аммония ацетата (40 г/л) ИР. Наносят на пластинку отдельно по 1 мкл каждого из 2 растворов, содержащих (А) 20 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 20 мг стандартного образца неомицина В сульфата СО в 1 мл. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на воздухе в течение 10 мин, нагревают 1 ч при 105°С, опрыскивают раствором трикетогидриндена в бутаноле ИР. Снова нагревают 5 мин при 105 °С и оценивают хроматограмму при дневном свете. Основное пятно, которое дает раствор А, соответствует по положению и внешнему виду пятну, которое дает раствор Б.

Б. Растворяют 10 мг испытуемого вещества в 5 мл воды, добавляют 0,1 мл пиридина Р и 2 мл раствора трикетогидриндена гидрата (1 г/л) ИР и нагревают на водяной бане при температуре 65—70°С в течение 10 мин; появляется темно-фиолетовое окрашивание.

В. Раствор испытуемого вещества с концентрацией 0,05 г/мл дает характерную для сульфатов реакцию А, описанную в разделе «Общие испытания на подлинность» (т. 1, с. 132).

Сульфатная зола. Не более 10 мг/г.

Потеря при высушивании. Высушивают 3 ч при 60 °С и пониженном давлении (не выше 0,6 кПа или около 5 мм рт. ст.) над пентоксидом фосфора Р, потеря не более 80 мг/г.

pH раствора. pH раствора испытуемого вещества с концентрацией 0,10 г/мл в свободной от диоксида углерода воде Р составляет 5,0—7,5.

Неамин. Проводят испытание, как описано в разделе «Тонкослойная хроматография» (т. 1, с. 92), используя пластинку, приготовленную следующим образом: перемешивают 0,3 г кар- бомера Р с 240 мл воды и оставляют на 1 ч, периодически слегка встряхивая. Доводят pH до 7, медленно добавляя при постоянном встряхивании раствор гидроксида натрия (~80 г/л) ИР, затем добавляют 30 г силикагеля РЗ. Покрывают пластинку слоем толщиной 0,75 мм, нагревают ее 1 ч при ПО °С, дают остыть и немедленно используют. В качестве подвижной фазы используют раствор дигидрофосфата калия (100 г/л) ИР. Наносят на пластинку отдельно по 10 мкл каждого из 2 растворов, содержащих (А) 2,5 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б)’ 0,05 мг неамина СО в 1 мл. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть в струе теплого воздуха, опрыскивают раствором трикетогидриндена и раствором хлорида олова (II) ИР и нагревают 15 мин при ПО °С. Оценивают хроматограмму при дневном свете. Любое пятно, которое дает раствор А, соответствующее неамину, не должно быть более интенсивным, чем пятно, которое дает раствор Б.

Содержание сульфатов. Растворяют 1 г испытуемого вещества в 200 мл воды, добавляют 3 мл соляной кислоты (~420 г/л) ИР, нагревают до кипения и добавляют 25 мл горячего раствора хлорида бария (50 г/л) ИР. Нагревают, перемешивая, 4 ч на водяной бане, собирают осадок, промывают водой, высушивают, прокаливают и взвешивают. Каждый грамм остатка соответствует 411,6 мг сульфатов; содержание сульфатов не менее 250 мг/г и не более 310 мг/г.

Количественное определение. Проводят определение, как описано в разделе «Количественное определение микробиологической активности антибиотиков» (т. 1, с. 165), используя или a) Bacillus pumilus (штаммы NCTC 8241; АТСС 14884) в качестве тест-организма, культуральную среду Кс1 с конечным значением pH 8,0—8,1, стерильный фосфатный буфер pH 8,0 ИР1 или

ИР2, неомицин в соответствующей концентрации (обычно 2— 14 МЕ/мл) и температуру инкубации 35—39 °С; или б) Staphylococcus aureus (штамм АТСС 29737) в качестве тест-организма, культуральную среду Кс1 с конечным значением pH 7,8—8,0, стерильный фосфатный буфер pH 8,0 ИР1 или ИР2, неомицин в соответствующей концентрации (обычно 2—20 МЕ/мл) и температуру инкубации 35—39 °С, или в) Staphylococcus epider- midis (штамм АТСС 12228) в качестве тест-организма, культуральную среду Кс1 с конечным значением pH 8,0—8,1, стерильный фосфатный буфер pH 8,0 ИР1 или ИР2, неомицин в соответствующей концентрации (обычно 0,5—2 МЕ/мл) и температуру инкубации 35—39 °С. Точность определения такова, что фидуциальные пределы ошибки для найденной активности (Р = 0,95) не менее 95 и не более 105% от найденной активности. Верхний фидуциальный предел ошибки для найденной активности (Р = 0,95) не менее 600 ME неомицина на 1 мг в пересчете на высушенное вещество.