<<
>>

Метод ПЦР-опосредованного сайт-направленного мутагенеза [272]

Амплифицируемый участок ДНК выбирают таким образом, чтобы З’-конец одного из праймеров непосредственно примыкал к мутантному

\ неспаренные нуклеотиды ★ место мутации

рестрикция BstN1 У

Рис.

4.3. Принцип метода ПЦР-опосредованного сайт-направленного мутагенеза (статегия определения мутации G542X при муковисцидозе) (пояснения в тексте)

сайту (рис. 4.3). В нем изменяют один из нуклеотидов с 3’-конца так, чтобы в сочетании с нуклеотидом мутантного сайта в этом месте образовывался или исчезал сайт рестрикции для какой-нибудь из эндонуклеаз. Таким образом, ПЦР-продукты с нормального и мутантного аллелей отличаются по наличию индуцированного сайта рестрикции. Например, если сайт рестрикции индуцирован в мутантном аллеле, то после обработки ПЦР-продукта соответствующей эндонуклеазой на электрофореграмме при отсутствии мутации будет определяться один фрагмент, у гетерозигот — два дополнительных фрагмента, соответствующих по длине рестрицированным участкам ДНК, а у гомозигот будут присутствовать только эти два фрагмента.

<< | >>
Источник: Баранов В.С.. Генетический паспорт — основа индивидуальной и предиктивной медицины / Под ред. В. С. Баранова. — СПб.: Изд-во Н-Л,2009. — 528 с.: ил.. 2009

Еще по теме Метод ПЦР-опосредованного сайт-направленного мутагенеза [272]:

  1. Основные направления и методы пропаганды здорового образа жизни
  2. Тип IV: клеточно-опосредованная гиперсенситивность
  3. Клеточно-опосредованный экспериментальный плеврит
  4. Тахикардия типа макрориентри, опосредованная дополнительным проводящим путем
  5. Клеточно-опосредованный иммунный ответ
  6. Эффекты НСПВП, не опосредованные циклооксигеназой
  7. Тип III: гиперсенситивность, опосредованная иммунными комплексами
  8. ГОЛУБЕВ Л. Г., САЖИН Б. С., ВАЛАШЕК Е. Р.. Сушка в химико-фармацевтической промышленности. М., «Медицина»,1978, 272 с. с ил., 1978
  9. Здравомыслов В. И., Анисимова 3. Е., Либих С. С.. Функциональная женская сексопатология. — Пермь, ТОО фирма «Репринт»,1994.'—272 с., 1994
  10. Дланчини Д., Паренти. Антибиотики. Пер. с англ. — М.: Мир,1985. — 272 с., ил., 1985
  11. Здравомыслов В. И., Анисимова 3. Е., Либих С. С.. Функциональная женская сексопатология. — Пермь, ТОО фирма «Репринт»,1994—272 с., 1994
  12. Гребенников А. И.. Массаж для коррекции фигуры и лечебные обертывания / Анд­рей Гребенников. — М. : Эксмо,2010. — 272 с., 2010
  13. Петренко В.В., Дерюгин Е.Е.. Загадка нашего здоровья. Биоэнергетика человека - космическая и земная. Книга вторая. Физиология от Гиппократа до наших дней / В. Петренко, Е. Дерюгин. - 5-е изд. - М.: Амрита,2010. - 272 с. - (Серия «Тайны вашего здоровья»), 2010
  14. Направления совершенствования мазей